Ustalenie guza mózgu w organotypowym modelu kokultury warstw
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:46 min. • July 8th, 2025
Zacznij od wycinka mózgu myszy osadzonego w agarozie.
Umieść wycinek mózgu na wkładce membranowej zawierającej pożywkę hodowlaną.
Zanurz plasterek, aby zapewnić równomierną ekspozycję na składniki odżywcze.
Zbierz niewielką objętość podłoża z wkładki i przenieś ją na dno studzienki.
Usuń nadmiar podłoża z wkładu.
Przenieść wkładkę na płytkę Petriego zawierającą pożywkę hodowlaną.
Ostrożnie usuń krawędzie agarozy z plastra, aby był dostępny do kolejnych interakcji.
Umieścić wkładkę w nowym dołku zawierającym pożywkę hodowlaną i inkubować ją, aby ułatwić odzyskiwanie plastrów.
Dodaj ludzkie komórki guza mózgu do plastra i inkubuj.
Komórki nowotworowe oddziałują z komórkami mózgowymi i mikrośrodowiskiem w obrębie wycinka, inicjując namnażanie i ustanawiając model kokultury 3D.
Za pomocą łyżki cedzakowej umieść plasterek mózgu w podłożu na wkładce i delikatnie dociśnij plasterek, aby był całkowicie zanurzony. Powtórz procedurę dla wszystkich plasterków. Następnie wyciągnij jeden mililitr pożywki hodowlanej w plasterkach z górnej części wkładki i wlej ją na dno studzienki.
Usuń i wyrzuć nadmiar pożywki, aż krawędzie agarozy wokół wycinka mózgu staną się widoczne, i zrób to samo dla pozo
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych