JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:26 min. • July 8th, 2025
Weź płytkę wielodołkową pokrytą środkiem powierzchniowo czynnym, aby zmniejszyć napięcie powierzchniowe studzienki.
Dodaj pożądany stosunek astrocytów i neuronów do odpowiedniej pożywki hodowlanej.
Odwirować, aby osadzić komórki, a następnie inkubować.
Niskie napięcie powierzchniowe zapobiega przywieraniu komórek do powierzchni studni, powodując ich agregację.
Komórki przylegają do siebie poprzez różne interakcje błonowe, w tym cząsteczki adhezyjne, tworząc sferę kokultury 3D.
Zbierz kulki i przenieś je do rurki.
Pozwól kulom się uspokoić. Usunąć supernatant i dodać świeżą pożywkę hodowlaną.
Przenieść kulki do kolby obrotowej zawierającej odpowiednią pożywkę wzrostową i inkubować ze stałym wirowaniem.
W sferze neurony rozciągają projekcje względem siebie, tworząc połączenie zwane synapsą, podczas gdy astrocyt rozciąga się w kierunku synapsy, ustanawiając ścisły związek z neuronami.
Dodaj żądany stosunek zdysocjowanych hAstros i hNeurons lub iNeurons w łącznej objętości dwóch mililitrów do każdej studzienki mikropłytki. Odwirować płytkę 100 razy g przez trzy minuty i wrócić do inkubatora na dwa dni.
Po jednym dniu w płytce powinny uformować się gęsto upakowane mikrosfery. Użyj mikro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych