Różnicowanie ludzkiej linii komórkowej nerwiaka zarodkowego w dojrzałe neurony
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:08 min. • July 8th, 2025
Zacznij od niezróżnicowanej linii komórkowej nerwiaka zarodkowego składającej się z komórek podobnych do neuronów i nabłonka w pożywce o wysokim stężeniu surowicy.
Usunąć pożywkę i dodać pożywkę różnicującą zawierającą zmniejszone stężenie w surowicy, uzupełnioną kwasem retinowym.
Deprywacja surowicy zapobiega proliferacji komórek podobnych do nabłonka.
Kwas retinowy indukuje ekspresję genów neuronalnych w komórkach neuronopodobnych, przekształcając je w bardziej zróżnicowany fenotyp.
Dodaj koktajl trypsyny-EDTA, aby odłączyć częściowo zróżnicowane komórki.
Dodać pożywkę zawierającą białka surowicy, aby zablokować trypsynę.
Umieść komórki na płytce i wprowadź świeżą pożywkę różnicującą zawierającą kwas retinowy i dodatkowo obniżony poziom w surowicy.
Komórki kontynuują rozwijanie rozszerzonych procesów.
Dodaj trypsynę, aby oderwać komórki.
Następnie dodaj pożywkę, aby zablokować trypsynę i ułóż komórki na naczyniu pokrytym białkiem macierzy zewnątrzkomórkowej, aby promować adhezję komórkową.
Na koniec uzupełnij pożywką bez surowicy zawierającą neuronalne czynniki wzrostu.
Czynniki te indukują końcowe różnicowanie do dojrzałych neuronów wykazujących rozległe rozgałęzione procesy neu
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych