JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:15 min. • July 8th, 2025
Weź znieczulonego szczura i zastosuj środek znieczulający do jego oka, aby znieczulić odruchy.
Przytnij wąsy i zdezynfekuj obszar wokół oka, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
Pod mikroskopem zaciśnij dolną powiekę, aby wybrzuszyć oko, odsłaniając żyłę nadtwardówkową.
Żyła ta łączy się z przednią komorą za pośrednictwem kanału Schlemma i siatki beleczkowej w celu odpływu cieczy wodnistej.
Wprowadzić mikroigłę z hipertonicznym roztworem soli fizjologicznej do odsłoniętej żyły.
Wstrzyknąć sól fizjologiczną, wypierając krew. Wykonać drugie wstrzyknięcie naprzeciwko pierwszego, aby uzyskać jednolity efekt na całym oku.
Sól fizjologiczna dostaje się do siatki beleczkowej.
Wysokie stężenie soli powoduje stres osmotyczny, prowadzący do śmierci komórek i bliznowacenia tkanek. To bliznowacenie blokuje odpływ cieczy wodnistej przez siatkę, zwiększając ciśnienie wewnątrzgałkowe.
Podwyższone ciśnienie uszkadza komórki zwojowe siatkówki, które są neuronami przenoszącymi informacje wizualne do mózgu. Uszkodzenie prowadzi do jaskry, stanu, który powoduje utratę wzroku.
W tej procedurze, po znieczuleniu zwierzęcia koktajlem KAX, sprawdź odruchy, szczypiąc go w stopy lub ogon, aby upewnić się, że zwierzę jest nieprzytomne. Następnie przytnij wąsy nożyczkami. Następnie nasącz aplikator z bawełnianą końcówką roztworem betadyny i przetrzyj obszar wokół oka eksperymentalnego.
Pod mikroskopem użyj hemostatu, aby zacisnąć dolną powiekę, aby wybrzuszyć oko, odsłonić żyłę nadtwardówkową i ograniczyć ruch gałek ocznych. Następnie ostrożnie przekłuj żyłę nadtwardówkową mikroigłą pod kątem od 10 do 20 stopni do żyły. Nakłucie do żyły kończy się sukcesem, gdy zaobserwuje się, że krew dostaje się do końcówki mikroigły.
Powoli wstrzyknij 50 mikrolitrów soli fizjologicznej do żyły. Żyły bledną na biało, gdy sól krąży w naczyniach krwionośnych, ale niektóre regiony mogą zachować krwistoczerwony wygląd.
Najbardziej krytyczny etap tej procedury ma miejsce podczas wstrzykiwania dwóch trzonowców soli fizjologicznej. Konieczne jest blanszowanie w naczyniach krwionośnych, aby zapewnić pomyślny wynik. Utrzymanie stabilnej igły pod kątem 20 stopni ma kluczowe znaczenie dla tej procedury.
Następnie należy wykonać drugie wstrzyknięcie do żyły, aby zapewnić dokładne uszkodzenie warstwy komórek zwojowych siatkówki. W ciągu kilku minut należy zobaczyć wyraźny mętny wygląd przez tęczówkę oka, ponieważ sól krąży w układzie naczyniowym.