Indukowanie miejscowej demielinizacji w nerwie wzrokowym za pomocą lizolecytyny

Zacznij od znieczulonego szczura i wykonaj nacięcie nad oczodołem.

Wypreparuj tkankę podskórną, aby uzyskać dostęp do jamy oczodołu, która zawiera nerw wzrokowy.

Pod mikroskopem wypreparuj spojówkę, a następnie leżącą poniżej tkankę łączną.

Następnie wycofaj otaczające mięśnie i gruczoł. Przetnij warstwy ochronne, aby odsłonić nerw wzrokowy.

Nerw wzrokowy składa się z bogatych w lipidy mielinowych włókien nerwowych, które przekazują sygnały elektryczne.

Następnie weź wstępnie zmontowaną szklaną mikropipetę wypełnioną lizolecytyną, środkiem zaburzającym gospodarkę lipidową i barwnikiem do śledzenia wizualnego.

Wprowadzić mikropipetę do odsłoniętego nerwu wzrokowego i wstrzyknąć lizolecytynę.

Zszyj nacięcie skóry i nałóż maść z antybiotykiem, aby zapobiec infekcji, a następnie pozwól szczurowi wyzdrowieć.

W nerwie wzrokowym wstrzyknięta lizolecytyna narusza integralność osłonki mielinowej otaczającej włókna nerwowe.

Powoduje to miejscową demielinizację, zmniejszającą transmisję sygnału przez nerw wzrokowy.

Przygotuj zwierzę do operacji, jak opisano wcześniej, i wykonaj nacięcie skóry o długości od 1 do 1,5 centymetra powyżej oczodołu któregokolwiek oka. Za pomocą cienkich nożyczek do tęczówki otwórz tkankę podskórną i uzyskaj dostęp do jamy oczodołu. Następnie pod stereoskopem otwórz spojówkę i przednią torebkę czopowa.

Następnie cofnij mięśnie zewnątrzgałkowe i gruczoły łzowe wewnątrzoczodołowe, aby odsłonić około 3 milimetry nerwu wzrokowego. Wokół nerwu wzrokowego użyj ostrza okulistycznego, aby otworzyć warstwy opony twardej i pajęczynówki wzdłużnie, a następnie włóż szklaną mikropipetę przymocowaną do strzykawki Hamiltona do nerwu 2 milimetry za gałką oczną.

W ciągu 30 sekund wstrzyknij bolus lizolecytyny z barwnikiem. Aby zakończyć procedurę, zszyj nacięcie skóry, nałóż maść z antybiotykiem, aby zapobiec infekcji, przenieś zwierzę do podkładki rozgrzewającej i monitoruj je, aż wyzdrowieje.