Wywoływanie ostrego zawału mostu w modelu szczurzym za pomocą stymulacji elektrycznej

Zabezpiecz znieczulonego szczura w jednostce stereotaktycznej.

Usuń sierść ze skóry głowy i zdezynfekuj miejsce nacięcia. Wykonaj nacięcie w linii środkowej i cofnij skórę, aby odsłonić czaszkę.

Usuń tkankę łączną, aby uniknąć ingerencji w wiertło. Zidentyfikuj bregmę jako punkt odniesienia do określenia współrzędnych mostu, struktury znajdującej się w pniu mózgu.

Wywierć otwór w czaszce.

Włóż sondę przez otwór, aby dotrzeć do mostu.

Następnie podłącz elektrody do stymulatora elektrycznego, mocując anodę do sondy w celu stymulacji mózgu, a katodę do ucha szczura, aby zakończyć obwód.

Dostarczyć impuls elektryczny do mostu, wywołując miejscowe uszkodzenie tkanek lub zawał.

Po stymulacji pozostaw sondę na krótko na miejscu, aby ustabilizować efekt stymulacji.

Następnie powoli wyjmij sondę i uszczelnij miejsce operowane cementem kostnym.

Zszyj nacięcie i wróć szczura do klatki w celu odzyskania zdrowia i analizy neurologicznej.

Rozgrzej poduszkę grzewczą do 37 stopni Celsjusza bezpośrednio przed znieczuleniem i przymocuj wiertło do czaszki do uchwytu na ramie stereotaktycznej. Potwierdź brak reakcji na odruch pedałowania u pierwszego znieczulonego szczura i zamontuj szczura na ramie stereotaktycznej w pozycji leżącej na poduszce grzewczej. Umieścić pręty douszne nad kanałem słuchowym, aby zabezpieczyć głowę, uważając, aby czaszka była utrzymywana w pozycji poziomej, aby uniknąć przekrzywienia wstrzyknięcia.

Nałóż maść na oczy zwierzęcia i użyj mikrogolarki, aby usunąć włosy z czaszki. Za pomocą markera narysuj 3-centymetrową linię wzdłuż linii środkowej czaszki od linii obustronnego bocznego canthus do 0,5 centymetra za tylnym ciemiączkiem i za pomocą skalpela wykonaj nacięcie w linii środkowej wzdłuż zaznaczonej linii. Użyj bawełnianego wacika, aby usunąć krew i umieść kawałek taśmy chirurgicznej po obu stronach płata skóry, aby odsłonić czaszkę.

Użyj nowego wacika nasączonego 0,9% chlorkiem sodu, aby delikatnie usunąć tkankę łączną z czaszki i zlokalizować bregmę. Użyj markera z cienką końcówką, aby wskazać centralny punkt bregmy jako punkt początkowy. Umieść wiertło na 6 milimetrach przednio-tylnych, 2 milimetrach przyśrodkowo-bocznych. Użyj wiertła, aby ostrożnie wykonać kraniotomię o średnicy 1 milimetra. Następnie wymień wiertło na sondę o rozmiarze 22 z izolowaną osłoną, z końcówką umieszczoną 2 milimetry nad bliższym końcem osłony.

Włóż osłonkę na 7 milimetrów do mózgu i przesuwaj sondę wzdłuż osłony, aż górna część sondy znajdzie się 9 milimetrów pod powierzchnią mózgu. Podłącz elektrody do stymulatora elektrycznego i podłącz anodę do sondy. Następnie podłącz katodę do ucha szczura. Następnie włącz stymulator elektryczny i ustaw szerokość pojedynczego impulsu na 4,050 milisekund, napięcie na 50 woltów, a prąd na 4 miliampery.

Pozostaw sondę na miejscu przez pięć minut po stymulacji, przed wyjęciem urządzenia z mózgu. Przykryj kraniotomię cementem kostnym i pozwól cementowi wyschnąć przed użyciem włókien poliamidowych 4-0 do zamknięcia rany. Po trzech lub czterech szwach zawiąż standardowe węzły chirurgiczne 2-1-1. Następnie wstrzyknij dootrzewnowo szczurowi 250 mikrolitrów penicyliny i monitoruj szczura co 15 minut, aż do pełnego wybudzenia przed powrotem zwierzęcia do klatki.