Monitorowanie glutaminianu w czasie rzeczywistym in vivo za pomocą układu mikroelektrod pokrytych enzymem
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:34 min. • July 8th, 2025
Zacznij od znieczulonej myszy zabezpieczonej na stereotaktycznej ramie, z odsłoniętą czaszką.
Zidentyfikuj punkty odniesienia czaszki, a następnie zaznacz współrzędne celu.
Wywierć wokół znaku, usuń płat kostny, aby odsłonić tkankę mózgową i oczyść powierzchnię.
Podłącz matrycę wieloelektrodową lub MEA pokrytą enzymem oksydazy glutaminianu i mikropipetę do ramy stereotaktycznej.
Umieść elektrodę odniesienia z dala od MEA, utrzymując kontakt cieczy z mózgiem, aby zakończyć obwód.
Napełnij mikropipetę roztworem glutaminianu.
Teraz opuść MEA i mikropipetę do tkanki mózgowej bogatej w neurony i astrocyty. Nagraj podstawowy sygnał elektryczny z MEA.
Wstrzyknąć roztwór glutaminianu, aby szybko zwiększyć poziom glutaminianu w przestrzeni zewnątrzkomórkowej zawierającej MEA.
Oksydaza glutaminianu na MEA utlenia glutaminian, generując sygnał elektryczny.
Gdy astrocyty wychwytują glutaminian, zewnątrzkomórkowy poziom glutaminianu spada, zmniejszając sygnał i umożliwiając monitorowanie glutaminianu w czasie rzeczywistym.
W tej procedurze umieść zwierzę w urządzeniu stereotaktycznym i użyj prętów powietrznych, aby ustabilizować jego głowę. Upewnij się, że zwierzę jest zabezpieczone, a głowa si
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych