Generowanie mysiego modelu urazowego uszkodzenia mózgu za pomocą urządzenia do bocznego płynu udarowego

Weź znieczuloną mysz i nałóż maść do oczu, aby zapobiec wysuszeniu oczu.

Ogol głowę, zdezynfekuj skórę głowy i naciąć w płaszczyźnie strzałkowej, aby odsłonić czaszkę.

Usuń warstwę tkanki łącznej i zaznacz obszar docelowy do urazu.

Wywierć, aby utworzyć płat kostny, a następnie usuń go, aby odsłonić oponę twardą, zewnętrzną powłokę mózgu.

Umieść kaniulę na oponie twardej i zabezpiecz ją cementem dentystycznym.

Napełnij kaniulę solą fizjologiczną, upewniając się, że nie tworzą się pęcherzyki powietrza, i podłącz ją do rurki bocznego urządzenia udarowego do płynu, zawierającego wahadło i zbiornik wypełniony płynem.

Zwolnij wahadło pod skalibrowanym kątem, aby uderzyć w zbiornik, generując impuls ciśnienia, który przechodzi przez płyn i dociera do mózgu.

Naprężenie mechaniczne uszkadza neurony, powodując urazowe uszkodzenie mózgu.

Usuń kaniulę, zszyj nacięcie i pozwól myszy dojść do siebie w celu dalszej analizy.

W przypadku indukcji urazowego uszkodzenia mózgu potwierdź brak reakcji na uszczypnięcie palca u znieczulonej myszy i nałóż maść na oczy zwierzęcia. Po goleniu zdezynfekuj odsłoniętą skórę głowy 70% etanolem, a następnie nacinaj skórę głowy w płaszczyźnie strzałkowej. Za pomocą kleszczy cofnij nacięcie po obu stronach i lekko oddziel okostną.

Użyj markera, aby narysować okrąg o średnicy 3 milimetrów w prawej okolicy ciemieniowej czaszki, w odległości 2 milimetrów od linii środkowej. Użyj wiertarki elektrycznej, aby ostrożnie przebić czaszkę, nie uszkadzając opony twardej. Usuń płat kostny, aby odsłonić 3-milimetrowe okienko kostne i umieść plastikową kaniulę na kraniotomii.

Po przyklejeniu kaniuli do czaszki za pomocą akrylu dentystycznego, użyj strzykawki o pojemności 5 mililitrów, aby napełnić kaniulę sterylnym 0,9% soli fizjologicznej, uważając, aby uniknąć pęcherzyków. Włącz oscyloskop i amplifier. Upewnij się, że rurka wysokociśnieniowa bocznego urządzenia udarowego do wchodzenia płynu jest wolna od pęcherzyków powietrza i dostarczaj około 10 impulsów testowych, aż urządzenie wyda stały sygnał.

Dostosuj kąt pozycji początkowej wahadła, aby osiągnąć intensywność impulsu około dwóch standardowych atmosfer, a następnie podłącz kaniulę wejściową do bocznego urządzenia do uszkadzania płynu udarowego. Pociągnij za spust, aby zwolnić wahadło, wywołując uszkodzenie mózgu. Następnie uzyskaj i prześlij impuls do opony twardej przez cały zamknięty system rurek wypełnionych płynem.

Po indukcji urazu mózgu usuń kaniulę i zszyj nacięcie. Następnie umieść mysz na poduszce grzewczej z monitorowaniem, aż zacznie chodzić, zanim zwierzę wróci do klatki domowej z dostępem ad libitum do jedzenia i wody.