Generowanie mysiego modelu urazowego uszkodzenia mózgu za pomocą urządzenia impaktorowego

Weź znieczuloną mysz z odsłoniętą czaszką.

Zidentyfikuj szwy strzałkowe i koronalne, które są stawami czaszki, aby zlokalizować miejsce docelowe urazu.

Przewiercić czaszkę i usunąć płat kostny, aby odsłonić oponę twardą, warstwę ochronną nad korą mózgu.

Zabezpiecz mysz w ramce stereotaktycznej za pomocą dołączonego urządzenia udarowego.

Umieść końcówkę impaktora nad odsłoniętym obszarem, aby spowodować urazowe uszkodzenie mózgu.

Opuść końcówkę, aby zetknęła się z oponą twardą, wsuń ją, aby ustawić głębokość uderzenia i załóż uraz.

Wyjmij impaktor i wyjmij mysz z ramy.

Zatamuj krwawienie z miejsca urazu, a następnie zamknij skórę głowy za pomocą kleju chirurgicznego.

Podawaj środek przeciwbólowy podskórnie, aby złagodzić ból i umożliwić myszowi powrót do zdrowia.

Uraz powoduje postępujące uszkodzenie kory mózgowej i leżących poniżej obszarów hipokampa i wzgórza, a także gromadzenie się płynów, upośledzając funkcje poznawcze i koordynację ruchową.

Aby wywołać kontrolowane korowe urazowe uszkodzenie mózgu, najpierw użyj skalpela, aby wykonać 1-centymetrowe nacięcie wzdłuż linii środkowej skóry głowy, aby odsłonić czaszkę. Wycofaj skórę głowy z miejsca operacji i zidentyfikuj szwy strzałkowe i koronalne na odsłoniętej czaszce.

Aby wykonać kraniektomię, wyposaż mikrowiertło w wiertło trepanacyjne o średnicy 5 milimetrów, aby aktywować wiertło z maksymalną prędkością i przyłożyć wiertło prostopadle do czaszki, 2 milimetry na lewo od szwu strzałkowego i 2 milimetry rostralnie do szwu koronalnego z delikatnym, równomiernym naciskiem. Lekkie ugięcie będzie odczuwalne, gdy wiertło wbije się w czaszkę.

Użyj kleszczy i igły podskórnej o małej średnicy, aby usunąć płat kostny, całkowicie odsłaniając leżącą pod spodem oponę twardą, i obróć końcówkę impaktora w pole operacyjne. Zabezpiecz obustronne kości skroniowe między miniaturowymi listwami usznymi ramy stereotaktycznej i zablokuj siekacze w zacisku siekacza, aby zapewnić stabilny trzypunktowy chwyt na głowie myszy. Opuść końcówkę, aż zetknie się z odsłoniętą oponą twardą. Czujnik kontaktowy przyrządu wyda sygnał dźwiękowy, aby zaalarmować, że kontakt został nawiązany.

Cofnij końcówkę udarową od punktu zerowego i opuść pozycję impaktora na ramie stereotaktycznej, aby ustawić żądaną głębokość uderzenia. Następnie aktywuj impaktor na urządzeniu uruchamiającym przed obróceniem urządzenia z powrotem poza pole, aby umożliwić usunięcie zwierzęcia z ramy.

Natychmiast po urazie należy bezpośrednio wycisnąć sterylny aplikator z bawełnianą końcówką na czaszkę i zranioną powierzchnię kory mózgowej, aby zatamować krwawienie, a następnie użyć nowego aplikatora do wysuszenia czaszki. Zamknij skórę głowy nad kraniektomią zgodnie ze standardowymi technikami i zastosuj znieczulenie pooperacyjne. Następnie umieść zwierzę w bocznej pozycji wyjściowej do odpoczynku po odleżynie w czystej, wstępnie ogrzanej klatce z monitorowaniem aż do pełnego leżenia i mierz masę ciała co trzy dni przez cały czas trwania eksperymentu.