Ustalenie modelu szczurzego krwotoku podpajęczynówkowego wywołanego przez autologiczne wstrzyknięcie krwi

Weźmy znieczulonego szczura z odsłoniętą czaszką i wszczepioną sondą do pomiaru ciśnienia śródczaszkowego.

Korzystając z punktu odniesienia na czaszce, zaznacz miejsce docelowe i wywierć otwór.

Usuń fragmenty kości i wypełnij otwór woskiem kostnym.

Wywierć kolejny otwór. Zlokalizuj naczynie krwionośne i zabezpiecz sondę, aby zmierzyć przepływ krwi w mózgu.

Weź igłę i wbij ją do mózgu, aż czaszka będzie wyczuwalna.

Cofnij się nieznacznie, aby zapewnić jego umieszczenie przed skrzyżowaniem wzrokowym, gdzie znajdują się główne naczynia krwionośne.

Napełnić komorę igły świeżą krwią pobraną z ogona szczura i podłączyć strzykawkę zawierającą krew.

Wstrzyknij krew do wypełnionej płynem przestrzeni podpajęczynówkowej między zewnętrzną i wewnętrzną błoną mózgową, co zwiększa ciśnienie śródczaszkowe, powodując zwężenie naczyń krwionośnych.

Prowadzi to do zmniejszonego przepływu krwi w mózgu, ustanawiając model krwotoku podpajęczynówkowego.

Aby umieścić laserową sondę dopplerowską, wykonaj 15-milimetrowe nacięcie doogonowo w linii środkowej, zaczynając tuż przed oczami. Po usunięciu tkanki łącznej i mięśni za pomocą kleszczy, użyj końcówki sterylnego bawełnianego wacika jako reżimu do identyfikacji bregmy i szwów koronalnych.

Po umieszczeniu uzbrojonego retraktora umieść igłę rdzeniową o rozmiarze 25 w ramie stereotaktycznej dokładnie na bregmie i zanotuj pozycję. Następnie wyjmij igłę z bregmy. Przesuń ramkę do przodu o 6,5 milimetra, a następnie umieść igłę na linii środkowej, aby zaznaczyć bok wiercenia.

Wiercić, aż opona twarda zostanie zidentyfikowana poniżej kości. Za pomocą prostych kleszczy delikatnie usuń fragmenty kości, a następnie wypełnij ubytek woskiem kostnym. Następnie, 3 do 4 milimetrów w bok po prawej stronie bregmy i tuż przed szwem koronalnym dla laserowego Dopplera, wywierć kolejny otwór, uważając, aby nie przebić opony twardej.

Poszukaj naczyń, w których laserowy Doppler może zmierzyć przepływ krwi. Umieść laserowy Doppler i sprawdź wartości. Wymagana jest minimalna wartość 100 jednostek strumienia. Jeśli wartości pozostają akceptowalne po wyjęciu mikroskopu, dodaj 1 kroplę kleju, aby zamocować sondę. Sprawdź ponownie, aby potwierdzić, czy wartość przekracza 80 jednostek strumienia.

Aby wywołać krwotok podpajęczynówkowy, delikatnie wbij igłę przez czaszkę w linii środkowej między półkulami, aż poczujesz opór ze względu na podstawę czaszki. Cofnij igłę o 1 milimetr, aby zapewnić prawidłowe umieszczenie tuż przed skrzyżowaniem wzrokowym. Aby zapewnić najbardziej jednorodny wynik podczas wstrzykiwania krwi, należy obrócić igłę o 90 stopni zgodnie z ruchem wskazówek zegara, tak aby końcówka igły była skierowana w prawo. Następnie zdejmij szpilkę.

Po 15-minutowej równowadze dostosuj poziom znieczulenia, aby uzyskać średnie ciśnienie tętnicze krwi w zakresie od 80 do 100 milimetrów słupa rtęci. Następnie wykonaj analizę gazometrii krwi, aby potwierdzić, że pH, ciśnienie parcjalne dwutlenku węgla i ciśnienie parcjalne tlenu mieszczą się w parametrach fizjologicznych.

Następnie za pomocą 1-mililitrowej strzykawki z igłą o rozmiarze 23 należy pobrać 500 mikrolitrów krwi z cewnika ogonowego. Aby uniknąć wstrzyknięcia powietrza, należy wypełnić martwą przestrzeń komory igieł rdzenia krwią. Po dostosowaniu objętości krwi w strzykawce do 300 mikrolitrów, podłączyć strzykawkę do igły rdzeniowej. Następnie, mocno chwytając za strzykawkę, wstrzyknąć krew ręcznie, aby przekroczyć średnie ciśnienie tętnicze. Obserwuj gwałtowny wzrost ciśnienia śródmózgowego i jednoczesny gwałtowny spadek przepływu krwi w mózgu.