JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:13 min. • July 8th, 2025
Zacznij od probówki zawierającej ciemnoczerwone, fluorescencyjnie znakowane mitochondria dawcy.
Dodaj zimną pożywkę proliferacyjną, aby rozproszyć mitochondria.
Dozować roztwór mitochondrialny w pobliżu dna studzienki zawierającej zmodyfikowane komórki macierzyste glejaka wielopostaciowego lub GSC.
Te zmodyfikowane komórki raka mózgu są znakowane niebieskim barwnikiem fluorescencyjnym i zawierają endogenne mitochondria znakowane na czerwono.
Zawiesina pokrywa całą powierzchnię studni, równomiernie rozprowadzając mitochondria.
Odwiruj płytkę hodowlaną, aby zbliżyć mitochondria do komórek w celu ich interakcji.
Teraz inkubuj płytkę hodowlaną.
Błona komórkowa tworzy duże pęcherzyki, które pochłaniają materiał zewnątrzkomórkowy, w tym mitochondria dawcy.
Komórki następnie internalizują te pęcherzyki, uwalniając mitochondria dawcy do swojej cytoplazmy, potencjalnie zmieniając metabolizm i funkcje GSC.
Obserwuj komórki pod mikroskopem konfokalnym.
Po analizie obrazu obecność niebieskich krwinek zawierających zielone mitochondria dawcy wraz z czerwonymi endogennymi mitochondriami potwierdza udany transfer mitochondrialny.
Aby przenieść izolowane mitochondria MSC do GSC, dodaj 200 mikrolit
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych