Modelowanie powtarzających się wstrząsowych urazów głowy w modelu mysim

Zacznij od przymocowania końcówki udarowej i końcówki sondy do urządzenia udarowego.

Następnie zabezpiecz znieczuloną mysz w stereotaktycznej ramce.

Umieść końcówkę uderzenia między szwami międzyczołowymi i lambdoidalnymi, pionowo wyrównaną z wyimaginowaną poziomą linią między uszami.

Wyzeruj kanały X i Y na stereotaktycznym panelu sterowania, aby zapobiec przesunięciu środka uderzenia podczas przełączania końcówek.

Ręcznie przesuń końcówkę sondy do środka uderzenia i opuść ją, aby dotknąć miejsca uderzenia. Przypnij czujnik kontaktowy do ogona myszy.

Wyzeruj kanał Z, a następnie zmień położenie końcówki uderzenia, aż X i Y zrównają się z zerem, a Z odczyta minus cztery.

Zastosuj uderzenie z określoną prędkością.

Zmierz bezdech - czas od uderzenia do pierwszego oddechu myszy - aby określić stopień urazu.

Pozwól myszy na odzyskanie sprawności.

Powtórz uderzenie w określonych odstępach czasu. Powtarzające się uderzenia powodują pęknięcie naczyń krwionośnych w mózgu, powodując mikrokrwawienia i wyzwalając aktywację astrocytów, naśladując łagodne wstrząs mózgu podobny do ludzkiego.

Zacznij od przymocowania wykonanej na zamówienie metalowej końcówki pokrytej gumą silikonową do elektromagnetycznego stereotaktycznego urządzenia udarowego. Zwracając uwagę, aby płaskie dno powlekanej końcówki było równoległe do powierzchni końcówki sondy urządzenia udarowego. Następnie umieść znieczuloną mysz w pozycji leżącej na poduszce grzewczej i potwierdź brak reakcji na szczypanie palców.

Następnie użyj maszynki do strzyżenia włosów, aby całkowicie ogolić głowę i nałóż maść na oczy zwierzęcia. Gdy zwierzę jest gotowe, ustaw prędkość urządzenia udarowego na 4 metry na sekundę, a czas przebywania na 240 milisekund na skrzynce sterowniczej. Umieść miękką poduszkę grzewczą pod ciałem zwierzęcia, aby utrzymać temperaturę ciała w pobliżu 39 stopni Celsjusza.

Następnie użyj listew dousznych, aby zamontować mysz w ramie stereotaktycznej, w pozycji leżącej. Użyj sterownika z, aby opuścić końcówkę udarową, blisko głowy myszy. Przesuń przetworniki x i y, w połowie drogi do współrzędnych celu, powyżej szwu strzałkowego, aby wyregulować płaską końcówkę o średnicy 9 milimetrów.

Uważaj, aby jedna krawędź końcówki uderzeniowej była pionowo równoległa do wyimaginowanej poziomej linii, narysowanej między dwoma uszami. Aby poprawnie ustawić głębokość uderzenia, najpierw ustaw kanały x i y na cyfrowym stereotaktycznym panelu sterowania na zero, aby upewnić się, że po przełączeniu końcówek nie nastąpi przesunięcie środka uderzenia.

Następnie przesuń dodatkową końcówkę sondy do miejsca uderzenia mózgu myszy. Ręcznie wyreguluj sterowniki x i y, aby przesunąć końcówkę sondy do środka obszaru uderzenia i przypnij czujnik kontaktowy do ogona. Użyj sterownika z, aby przesunąć impaktor w dół, aż końcówka sondy dotknie powierzchni miejsca uderzenia, a następnie ustaw kanał z na stereotaktycznym panelu sterowania na zero.

Następnie użyj sterowników x i y, aby ręcznie przesunąć końcówkę udarową z powrotem do obszaru uderzenia, aż sterowniki x i y wyniosą zero. Następnie przesuń dysk z w dół, aż panel sterowania pokazujący sterownik z znajdzie się na minus 4.00. I przesuń przełącznik cofania na skrzynce sterowniczej, aby cofnąć siłownik.

Teraz kliknij przełącznik uderzenia na skrzynce kontrolnej, aby wywołać uderzenie o głębokości deformacji 4 milimetry i użyj timera, aby zmierzyć czas od uderzenia do pierwszego oddechu myszy. Następnie przenieś zwierzę do ciepłej podkładki, monitorując je do momentu całkowitego wyzdrowienia.