JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:15 min. • April 28th, 2025
Weźmy tabliczkę inwazji i migracji komórek zawierającą górne i dolne komory.
Górna komora zawiera mikroporowatą membranę z układem mikroelektrod złotych mierzących impedancję na dole. Pokryj błonę macierzą zewnątrzkomórkową lub roztworem ECM.
Wypełnij dolną komorę podłożem o wysokiej zawartości surowicy.
Następnie dodaj pożywkę o niskiej surowicy do górnej komory i inkubuj, aby zaaklimatyzować się do warunków hodowli.
Zastosuj słaby potencjał elektryczny na mikroelektrodach, aby zmierzyć impedancję linii bazowej.
Umieść komórki raka mózgu w górnej komorze i pozwól im osiąść na ECM.
Pożywka o wysokiej zawartości surowicy działa jak chemoattractant, kierując ruch komórek w jego kierunku.
Komórki wydzielają proteazy, które degradują ECM, umożliwiając im ruch przez pory błony w kierunku chemoatraktantu.
Gdy komórki migrują, przylegają do mikroelektrod, zwiększając impedancję komórkową.
Z biegiem czasu więcej komórek migruje i przyłącza się do mikroelektrod, co jeszcze bardziej zwiększa impedancję komórkową, co odzwierciedla inwazyjny potencjał tych komórek.
Pięć do sześciu godzin przed analizą komórek w czasie rzeczywistym umieść system analizy komórek w czasie rzeczywistym w inkubatorze hod
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych