Opracowanie modelu ciśnienia translaminarnego przy użyciu translaminarnego systemu autonomicznego

Zacznij od ludzkiego oka. Zdejmij osłonkę, aby odsłonić nerw wzrokowy.

Przetnij oko, a następnie usuń ciało szkliste z tylnego segmentu.

Przytnij twardówkę, zewnętrzną warstwę, i rozłóż siatkówkę zawierającą komórki zwojowe siatkówki połączone z nerwem wzrokowym za pomocą blaszki cribrosa, struktury przypominającej siatkę.

Umieść ten segment nad kopułą dolnej komory translaminarnego systemu autonomicznego, z nerwem wzrokowym skierowanym do góry, a następnie uszczelnij go.

Podłącz rurkę i przepuść medium perfuzyjne.

Ruch cieczy powoduje wzrost ciśnienia wewnątrz muszli ocznej, przypominającego ciśnienie wewnątrzgałkowe.

Następnie ustaw górną komorę zakrywającą nerw wzrokowy i uszczelnij ją.

Podłącz rurkę, aby przepłynąć medium wokół nerwu, przypominając ciśnienie śródczaszkowe.

Różnica ciśnień między tymi komorami ustanawia ciśnienie translaminarne w poprzek blaszki cribrosa, umożliwiając badanie transmisji sygnału komórek zwojowych siatkówki do nerwu wzrokowego w tych warunkach ciśnienia.

Aby przygotować próbkę całej gałki oka ludzkiego, należy usunąć osłonkę nerwu wzrokowego i usunąć ciało szkliste z tylnego segmentu. Aby zapewnić dobre dopasowanie do okrągłej kopuły komory IOP, w razie potrzeby przytnij dodatkową twardówkę z tylnego segmentu i użyj kleszczy, aby upewnić się, że siatkówka jest równomiernie rozłożona na ludzkiej tylnej części segmentu. Następnie umieść segment w komorze IOP TAS nad okrągłą kopułą, z nerwem wzrokowym skierowanym do góry i użyj O-ringu z żywicy epoksydowej i 4, aby uszczelnić tylny segment.

Aby skonfigurować komorę IOP, włóż rurkę do portów wejściowych i wyjściowych komory, a następnie włóż strzykawkę wlotową IOP do portu wejściowego. Włóż pustą strzykawkę odpływową IOP do portu wyjściowego i użyj metody push-pull, aby powoli wlać medium perfuzyjne do portu dopływowego, aby napełnić tylną muszlę oczną, jednocześnie powoli wyciągając medium perfuzyjne przez strzykawkę odpływową, aby usunąć wszelkie pęcherzyki powietrza z przewodów. Gdy zarówno rurki wlotowe, jak i wyjściowe są pozbawione pęcherzyków powietrza, należy zatrzymać infuzję i zablokować kurki w pozycji wyłączonej.

Wyjąć strzykawkę z zespołu filtra importu IOP i napełnić strzykawkę dodatkowymi 30 mililitrami pożywki. Następnie ponownie włożyć zestaw strzykawki do zespołu filtra. Aby ustawić komorę ICP, umieść komorę z tyłu tylnego segmentu, uważając, aby nerw wzrokowy znajdował się w górnej komorze i uszczelnij górną komorę 4.

Następnie włóż rurkę do portów wejściowych i wyjściowych komory ICP - strzykawkę wejściową ICP do portu wejściowego, a pustą strzykawkę odpływową ICP do portu wyjściowego, aby przepłukać system medium, jak właśnie pokazano.