JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:18 min. • April 28th, 2025
Weźmy aparat do perfuzji serca podłączony do systemu akwizycji danych.
Umieść cewnik wieloelektrodowy zarówno do stymulacji elektrycznej, jak i monitorowania rytmu serca.
Weź serce myszy z kaniulą włożoną do aorty i podłącz je do aparatu.
Perfować serce za pomocą natlenionego buforu perfuzyjnego, aby naśladować krążenie fizjologiczne.
Wprowadzić cewnik do prawego przedsionka i komory.
System przewodnictwa serca, składający się z komórek rozrusznika serca i włókien przewodzących, koordynuje zsynchronizowane skurcze komór serca.
Zastosuj stymulację elektryczną przez cewnik, aby ustabilizować warunki elektrofizjologiczne serca.
Zamknij komorę, aby utrzymać stabilną temperaturę.
Zastosuj kontrolowaną stymulację, aby zmierzyć wyjściową aktywność serca.
Następnie zwiększ częstotliwość stymulacji, aby zastąpić normalny rytm serca, wywołując nieregularne rytmy pochodzące z komór, znane jako arytmia komorowa.
Po stymulacji, powrót serca do normalnego rytmu sugeruje odporność na arytmię, podczas gdy utrzymujące się nieprawidłowe rytmy wskazują na podatność.
Zacznij od uruchomienia łaźni wodnej i umieszczenia w niej roztworu perfuzyjnego zawierającego mieszaninę 95% tlenu i 5% dwutlenku węgla. Następnie wyreguluj szybkość pompy przed podłączeniem serca, aby podczas montażu do kaniuli nie pozostały żadne pęcherzyki powietrza w kaniuli. Ustaw docelowe ciśnienie perfuzji na 80 milimetrów słupa rtęci w ustawieniach ogólnych i rozpocznij nagrywanie.
Do rejestrowania danych i stymulacji za pomocą dedykowanego cyfrowego generatora bodźców należy używać cewnika elektromedycznego z elektrodami platynowymi o powierzchni 0,5 milimetra i powierzchni elektrody 0,5 milimetra. Następnie umieść cewnik blisko obszaru, w którym będzie umieszczone serce po podłączeniu do aparatu. Następnie szybko przymocuj kaniulę do aparatu Langendorffa i upewnij się, że w kaniuli nie pozostały żadne pęcherzyki. Zmień ciśnienie perfuzji na 80 milimetrów słupa rtęci, umożliwiając perfuzję o stałym ciśnieniu.
Ostrożnie włóż cewnik do prawego przedsionka i prawej komory, nie dotykając ani nie uszkadzając serca, a następnie przymocuj cewnik do kaniuli za pomocą taśmy. Następnie rozpocznij stymulację z przygotowaną długością cyklu 100 milisekund przez początkowy 20-minutowy okres równowagi. Na koniec zamknij komorę, aby zapewnić stabilną temperaturę.
Rozpocznij od zastosowania zaprogramowanej stymulacji za pomocą dystalnych lub proksymalnych elektrod cewnika przy dwukrotności progu stymulacji przedsionkowej lub komorowej w celu oceny parametrów elektrofizjologicznych. Następnie wykonaj zaprogramowane protokoły dodatkowej stymulacji lub stymulacji serii zgodnie z konwencją Lambeth, aby ocenić genezę arytmii komorowej.