Obrazowanie bioluminescencyjne zapalenia nerwów u myszy transgenicznej

Rozpocznij od znieczulonej transgenicznej myszy zawierającej patogenne agregaty białkowe, które powodują zapalenie nerwów i aktywację astrocytów, prowadząc do zwiększonej ekspresji lucyferazy.

Usuń futro z głowy, aby zapobiec rozpraszaniu światła podczas obrazowania.

Pokoloruj uszy niedrażniącym markerem, aby zablokować niespecyficzną bioluminescencję.

Weź odpowiednią objętość lucyferyny w zależności od masy ciała myszy i wstrzyknij ją dootrzewnowo.

Lucyferyna dostaje się do krwiobiegu, dociera do mózgu i jest pobierana przez aktywowane astrocyty.

W astrocytach lucyferazy utleniają lucyferynę, emitując sygnał bioluminescencyjny.

Ustaw parametry obrazowania i precyzyjnie ustaw kursor myszy na płycie grzewczej komory obrazowania bioluminescencyjnego.

Zapewnij prawidłowy przepływ znieczulenia i uchwyć sygnał bioluminescencyjny przez pożądany czas.

Następnie wybierz interesujący Cię obszar i określ ilościowo docelowy sygnał bioluminescencyjny.

Intensywność tego sygnału odpowiada aktywności lucyferazy, odzwierciedlając aktywację astrocytarną i zapewniając bezpośrednią miarę zapalenia nerwów.

Przed obrazowaniem należy ogolić i zdepilować głowy myszy znieczulonych izofluranem. Pokoloruj uszy na