JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:11 min. • May 29th, 2025
Weź znieczulonego szczura z odsłoniętą czaszką pokrytą zasłoną.
Wywierć otwór, aby odsłonić oponę twardą, najbardziej zewnętrzną warstwę mózgu, unerwioną przez wrażliwe na ból neurony czuciowe pochodzące ze zwoju nerwu trójdzielnego i zwojów korzenia grzbietowego szyjki macicy.
Zbuduj barierę, aby zapobiec wyciekom, wprowadź znacznik wsteczny i uszczelnij otwór.
Zszyj ranę i pozwól szczurowi dojść do siebie.
Znacznik dostaje się do aksonów neuronów czuciowych, przemieszcza się wstecz do ich zwojów i dostaje się do ciał komórek nerwowych.
Poddaj szczura eutanazji i wypreparuj zwoje.
Przygotuj odcinki zwojów nerwowych i zamontuj je na szkiełkach.
Dodaj roztwór, aby przepuszczalnie błony komórkowe i zamaskować niespecyficzne miejsca wiązania.
Inkubować z pierwszorzędowymi przeciwciałami skierowanymi do znacznika i neuropeptydów specyficznych dla neuronów czuciowych.
Dodaj znakowane fluorescencyjnie przeciwciała drugorzędowe specyficzne dla przeciwciał pierwszorzędowych.
Za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej obserwuj kolokalizację neuropeptydów i znaczników w ciałach komórkowych, potwierdzając ganglionowe pochodzenie neuronów czuciowych.
Ogol głowę szczura elektryczną maszynką do golenia. Nast
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych