Obrazowanie bioluminescencyjne w celu oceny wzrostu guza w organotypowym wycinku mózgu myszy

Weź płytkę wielodołkową zawierającą organotypowy wycinek mózgu myszy z komórkami nowotworowymi. Komórki te wyrażają enzym lucyferazę.

Podnieś wkładkę, aby dodać roztwór lucyferyny do pożywki i dobrze wymieszaj. Umieść wkładkę z powrotem w studzience.

Lucyferyna dostaje się do komórki nowotworowej i zostaje utleniona przez lucyferazy, emitując bioluminescencję.

Umieść płytkę w komorze obrazowania systemu obrazowania in vivo, który może uchwycić bioluminescencję emitowaną z próbki.

Zablokuj komorę, aby zapobiec zakłóceniom światła zewnętrznego.

Dostosuj ustawienia aparatu, aby uchwycić pojedynczy studzienkę na obraz.

Przesuń stolik, aby ustawić studnię bezpośrednio pod kamerą.

Zoptymalizuj czas akwizycji w oparciu o intensywność emitowanej bioluminescencji.

Określ kształt guza, a następnie rozpocznij obrazowanie bioluminescencyjne.

Określ ilościowo sygnał bioluminescencyjny, aby ocenić wzrost guza na wycinku mózgu.

Odpipetować 5 mikrolitrów po 30 miligramów na mililitr roztworu lucyferyny do podłoża znajdującego się pod wkładkami wewnątrz sterylnego kaptura. Umieść sześciodołkową płytkę z pokrywką w komorze obrazowania instrumentu pod nieruchomą kamerą i zablokuj drzwiczki komory.

Otwórz oprog