Subpialne dostarczanie genów w rdzeniu kręgowym myszy w celu oceny ekspresji genów

Weź znieczuloną mysz, ogol jej grzbiet i zdezynfekuj skórę.

Naciąć skórę, odłączyć mięśnie od kręgów i wycofać je za pomocą zacisków.

Wwiercić się w blaszki kręgowe, aby utworzyć pęknięcia, a następnie usuń fragmenty kości, aby odsłonić oponę twardą, zewnętrzną błonę rdzenia kręgowego.

Za pomocą igły utwórz otwór opony twardej i nakłuj leżącą pod nim pia mater, aby wejść do przestrzeni podskórnej w celu bezpośredniego dostępu do tkanki rdzenia.

Pobrać igłę do podawania zawierającą zawiesinę rekombinowanego wirusa związanego z adenowirusem zawierającym gen wykazujący ekspresję białka fluorescencyjnego i wstrzyknąć zawiesinę.

Wyjmij igłę, zszyj mięśnie i skórę i pozwól myszy dojść do siebie.

Wirus wiąże się z receptorami na neuronach i komórkach glejowych i ulega endocytozy.

Po dostaniu się do jądra wirus wyzwala ekspresję genów w celu wytworzenia białek fluorescencyjnych.

Model dostarczania genów subpialnych jest teraz gotowy do oceny ekspresji genów docelowych w rdzeniu kręgowym.

Zacznij od odpowiedniego znieczulenia zwierzęcia do operacji. Stosuje się tutaj izofluran. Przed kontynuowaniem upewnij się, że nie ma reakcji na uszczypnięcie łapy. Następnie zakryj oczy maścią okulistyczną. Nast