donosowe podawanie siRNA do mózgu myszy za pomocą urządzenia pozycjonującego

Zacznij od znieczulonych myszy umieszczonych na urządzeniu pozycjonującym plecami równolegle do oparcia krzesła i prostopadle do siedzenia.

Myszy są ustawione w pozycji z głową w dół i do przodu i zabezpieczone za pomocą pasów krzeseł.

Używając mikropipety wypełnionej ukierunkowanym na neurony kompleksem peptyd-siRNA, umieść kroplę w pobliżu jednego nozdrza, pozwalając myszy na naturalne wdychanie roztworu.

Podczas inhalacji delikatnie dociśnij głowę myszy w dół, aby zapobiec przedostawaniu się roztworu do płuc.

Zrób krótką przerwę, a następnie powtórz podanie do drugiego nozdrza.

Powtórz procedurę dla pozostałych myszy.

Kompleks przenika przez błonę śluzową nosa, skąd dostaje się do nerwu węchowego i trójdzielnego i przechodzi przez nie, aby dotrzeć do mózgu.

Wewnątrz mózgu kompleks wiąże się z receptorami neuronalnymi, ulega endocytozie i ułatwia wewnątrzkomórkowe dostarczanie siRNA.

SiRNA staje się częścią kompleksu RISC, który po związaniu się z docelowym mRNA indukuje wyciszanie genów.

Aby rozpocząć tę procedurę, oceń poziom znieczulenia odruchu dwunożnego myszy w celu utrzymania płaszczyzny operacyjnej. Następnie umieść urządzenie pozycjonujące w odpowiedniej odległości i na odpowied