JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:56 min. • August 7th, 2025
Weźmy znieczuloną mysz z odsłoniętymi zwojami korzenia grzbietowego L4 i L5 zawierającymi ciała komórek neuronów czuciowych.
Załaduj pipetę do mikroiniekcji znakowanymi fluoroforem konstruktami RNA, które regulują regenerację aksonów, oraz barwnikiem znacznikowym.
Wstrzyknąć mieszaninę do DRG.
Za pomocą elektrod elektroporacyjnych przyłóż impulsy elektryczne do DRG.
Powoduje to rozerwanie błon ciał komórkowych neuronów czuciowych, tworząc pory, które umożliwiają konstruktom wejście do cytoplazmy, ułatwiając transfekcję.
Zszyj nacięcie i pozwól myszy dojść do siebie.
Po kilku dniach ponownie znieczul i zabezpiecz mysz.
Wykonaj nacięcie boczne do linii środkowej po lewej stronie. Wypreparuj mięśnie, aby odsłonić nerw kulszowy.
Zmiażdż nerw, aby uszkodzić aksony neuronów czuciowych. Zaznacz miejsce węzłem szwowym.
Zszyj nacięcie i pozwól myszy dojść do siebie.
Transfekowane konstrukty docelowe mRNA w ciałach komórek neuronów czuciowych DRG, przejściowo modulując produkcję białek w celu poprawy regeneracji aksonów czuciowych po urazie.
W celu wstrzyknięcia DRG należy załadować plazmidy DNA lub oligonukleotydy RNA do szklanej pipety kapilarnej. Następnie ostrożnie włóż końcówkę szklanej pipety ka
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych