Wstrzyknięcia domięśniowe wzdłuż płytek końcowych silnika w celu transportu znaczników bezpośrednio do neuronów ruchowych szczura

Weź znieczulonego szczura i nałóż smar do oczu.

Ogol docelową kończynę, wysterylizuj skórę i ustaw szczura tak, aby zapewnić optymalny dostęp do docelowego mięśnia.

Podnieś i nacinaj skórę, aby odsłonić mięsień.

Zapoznaj się ze zdjęciami płyt końcowych silnika lub MEP, regionów, w których zakończenia aksonów neuronów ruchowych łączą się z włóknami mięśniowymi, tworząc połączenia nerwowo-mięśniowe.

Mentalnie zmapuj obszar MEP na odsłonięty mięsień.

Weź szklaną mikropipetę zawierającą znacznik fluorescencyjny.

Wstrzyknąć znacznik domięśniowo w wiele punktów wzdłuż obszaru MEP.

Usuń nadmiar śladu, zamknij nacięcie i podaj środek przeciwbólowy.

Wstrzyknięcie zwiększa dostępność znacznika w połączeniach nerwowo-mięśniowych, ułatwiając jego endocytozę na końcach aksonów.

Znaczniki zamknięte w pęcherzykach są następnie transportowane wstecznie do ciał komórek neuronu ruchowego w rdzeniu kręgowym.

Obecność znakowanych znacznikiem neuronów ruchowych w rdzeniu kręgowym sugeruje neuroterapeutyczny potencjał dostarczania ukierunkowanego na MEP.

Aby wstrzyknąć żywy mięsień na płytki końcowe silnika, należy najpierw użyć ściągacza do mikropipet, aby wyciągnąć mikropipety szklane z graded wyposażone w tłok