Obrazowanie bioluminescencyjne in vivo ludzkich nerwowych komórek progenitorowych w mózgu myszy

Zacznij od myszy z niedoborem odporności, której wstrzyknięto genetycznie zmodyfikowane ludzkie neuronalne komórki progenitorowe lub NPC do mózgu.

Komórki te wyrażają lucyferazę, enzym wytwarzający światło.

Wstrzyknąć lucyferynę, substrat lucyferazy, dootrzewnowo do myszy.

Znieczul mysz, a następnie nałóż lubrykant okulistyczny na oczy, aby zapobiec wysuszeniu i ogol głowę w celu obrazowania.

Ustaw mysz w pozycji leżącej w komorze obrazowania z zaprogramowanymi warunkami obrazowania.

Lucyferyna krąży w krwiobiegu i wnika do tkanki mózgowej, przechodząc przez komórki śródbłonka, docierając do przeszczepionych NPC.

Wewnątrz komórek lucyferyna reaguje z lucyferazy i wytwarza światło bioluminescencyjne.

System obrazowania wychwytuje te sygnały bioluminescencyjne emitowane z miejsca przeszczepu NPC.

Te bioluminescencyjne sygnały potwierdzają udane przeszczepienie ludzkich NPC do mózgu myszy.

Wstrzyknij lucyferynę dootrzewnowo, a po pięciu minutach znieczulij zwierzęta ciągłym dopływem izofluranu. Ogol uspokojone zwierzęta w okolicy głowy za pomocą konwencjonalnej golarki do włosów. Umieść zwierzę w komorze obrazowania i rozpocznij obrazowanie 15 minut po wstrzyknięciu lucyferyny, klikając przycisk Acquire (Uzyskaj) w panelu sterowania.