Regularna pielęgnacja i konserwacja laboratorium rybek danio (Danio rerio): wprowadzenie

Niniejszy protokół opisuje regularną opiekę i konserwację laboratorium rybek danio. Ze względu na rosnące zainteresowanie badaniami nad rybkami danio, wzrasta również potrzeba tworzenia i utrzymywania placówek przeznaczonych do ich hodowli. Mimo że dostępna jest literatura dotycząca prowadzenia laboratorium rybek danio, brakuje zwięzłego protokołu w formie wideo.

W tym filmie wyjaśniono zasady konserwacji systemu, karmienia, rozrodu oraz hodowli larw danio pręgowanego. Witam, jestem ABH ze School of Medical Sciences na University. Witam, jestem Manchi z Thee Institution.

Dzisiaj zaprezentujemy standardową pielęgnację i konserwację laboratorium rybek danio. Rybki danio stają się popularne w badaniach genetycznych, farmakologicznych i behawioralnych. Ze względu na łatwość utrzymania i szybki rozwój, są one wysoce podatne na modulacje genetyczne i odpowiednie do wysokoprzepustowych badań przesiewowych leków.

Niniejszy materiał przedstawia zasady hodowli danio pręgowanego dla użytkowników oraz badaczy rozważających utworzenie nowej pracowni ichtiologicznej. Przejdźmy zatem do szczegółów. Istnieje kilka firm oferujących systemy dla ryb, jednak w naszym przypadku korzystamy z systemów firmy Aquatic Habitats.

W naszym laboratorium rybki danio są utrzymywane w temperaturze od 26 do 28.5 °C przy cyklu światło-ciemność wynoszącym od 14 do 10 godzin. Rybki danio są hodowane w systemie cyrkulacyjnym, który stale filtruje i napowietrza wodę w układzie. Aby utrzymać jakość wody niezbędną dla zdrowego środowiska wodnego, w naszym systemie wykorzystuje się zestaw filtrów różnych typów.

Woda ze zbiorników przechodzi przez wkład filtrujący, filtr kubełkowy, filtr biologiczny, filtr z węglem aktywnym oraz filtr UV, zanim zostanie ponownie wpompowana do zbiornika. W systemie dla danio pręgowanych stosuje się wodę dechlorowaną lub odstaną. Dechlorację wody można przeprowadzić poprzez jej odstawienie na co najmniej 48 h.

Codziennie sprawdzaj pH wody w systemie i utrzymuj je w zakresie od 6.8 do 7.5. Akwaria należy regularnie czyścić, używając wodorowęglanu sodu. Aby wyczyścić akwarium, zamknij dopływ wody do tego zbiornika, odlej nadmiar wody, przechylając akwarium do tyłu, a następnie ostrożnie wyjmij je z systemu.

Przygotuj czysty zbiornik i napełnij go wodą systemową. Ostrożnie przenieś ryby do tego zbiornika za pomocą siatki. Zamknij pokrywę i ostrożnie przytwierdź etykietę z nazwą zbiornika.

Umieść zbiornik w systemie. Włóż rurkę z powrotem do zbiornika i włącz dopływ wody. Zdezynfekuj siatkę do ryb oraz zbiornik 70% etanolem.

Opłukać w wodzie i pozostawić do wyschnięcia przed ponownym użyciem. Filtry układu obiegowego należy regularnie sprawdzać i wymieniać, aby zapewnić ich prawidłowe funkcjonowanie.

Wkład filtra o wielkości oczek 120 mikronów jest codziennie sprawdzany i ustawiany zgodnie z kierunkiem przepływu wody przed jego wymianą. Filtr kanistrowy należy wymieniać co tydzień. Aby wymienić filtr kanistrowy, należy go wykręcić za pomocą klucza lub ręką.

Pod spodem należy umieścić plastikową folię lub ręcznik, aby zapobiec rozlaniu wody. Włóż nowy kanister oraz filtr, a następnie zamontuj jednostkę z powrotem w systemie. Dokręć ostrożnie najpierw ręką, a następnie kluczem.

W razie potrzeby filtr węglowy należy wymieniać co dwa tygodnie. Aby wymienić filtr węglowy, należy go ostrożnie zdemontować. Za pomocą klucza usunąć węgiel aktywny z filtra i zastąpić go nowym węglem aktywnym.

Ponownie zamontuj uchwyt węglowy i umieść go z powrotem w jednostce filtrującej. Zamontuj jednostkę filtrującą z powrotem w systemie. Włącz system i sprawdź, czy woda przepływa do filtra.

Filtr biologiczny należy czyścić co sześć miesięcy. Aby wymienić filtr biologiczny, należy wyjąć go z systemu. Następnie należy zwolnić ciśnienie w filtrze, naciskając przycisk spustowy ciśnienia.

Odkręć filtr i zdejmij pokrywę. Przesyp zawartość do sita, aby oddzielić Cy Oex od wody. Jeśli Cy Oex jest bardzo zanieczyszczony, należy go wymienić.

Napełnij filtr nowym cy ax. Napełnij jednostkę wodą systemową. Zamknij pokrywę filtra, zamontuj ponownie jednostkę i włącz urządzenie.

Filtry UV są stosowane do kontroli zanieczyszczeń biologicznych i powinny być wymieniane co dziewięć do 10 miesięcy. Danio pręgowane można karmić pokarmem suchym lub żywym, takim jak artemia; jaja artemii są dostępne w lokalnych sklepach zoologicznych i mogą być wylęgane w laboratorium zgodnie z prostymi krokami opisanymi tutaj. Rozpuścić sól morską w wodzie systemowej, aby przygotować roztwór o stężeniu od 30 do 35 g/L.

Napełnij inkubator do wylęgu artemii wodą zasoloną i dodaj jaja artemii w stężeniu 1,2 łyżki stołowej na litr. Intensywnie napowietrzaj inkubator za pomocą pompy powietrznej i pozostaw jaja artemii do wylęgu na około 48 godzin. Wyjmij rurkę doprowadzającą powietrze i pozwól kulturze osiąść przez cztery do pięciu minut.

Zapłodnione artemie gromadzą się na dnie inkubatora. Korzystając z kranika znajdującego się na dole inkubatora, należy spuścić pierwszą partię cieczy, która zawiera niezapłodnione jaja. Następnie należy zebrać zapłodnione artemie i oddzielić je od słonej wody.

Użyj siatki do odławiania solankowców. Przepłucz solankowce do pojemnika. Przy użyciu wody systemowej solankowce gromadzą się w wysokim stężeniu na dnie pojemnika i są teraz gotowe do podania daniorkom zebra. Podaj solankowce rybom za pomocą pipety lub zakraplacza.

Ilość podawanego pokarmu zależy od liczebności populacji w poszczególnych zbiornikach. Po wprowadzeniu pokarmu do wody głodne ryby pływają, aby chwytać solniczki, co jest istotne dla ich regularnej aktywności fizycznej. Karmienie suchym pokarmem można przeprowadzić za pomocą dozownika pokarmu do środowisk wodnych lub zwykłej łyżki.

Danio pręgowane rozpoczynają tarło wraz z pojawieniem się światła. Ikrę można pozyskać poprzez hodowlę zbiorową lub parową. O ile hodowla zbiorowa jest bardziej wydajna pod względem nakładu pracy i stosuje się ją podczas rutynowego zbierania embrionów, o tyle hodowla parowa jest preferowana w przypadku konieczności przesiewania genów lub mutacji. Zmontuj urządzenie do tarła w akwarium i powoli zanurz je w zbiorniku.

Po włączeniu światła pozostaw zestaw do rozrodu w zbiorniku przez około 15 minut, aby ryby mogły się odbyć, a następnie wyjmij zestaw ze zbiornika i zbierz ikrę. Rozród w parach przygotowuje się późnym popołudniem poprzez złożenie zbiornika do rozrodu i napełnienie go wodą systemową. Przenieś jedną samicę i jednego samca na przeciwległe strony zbiornika.

Samice można odróżnić od samców po większym brzuchu. Następnego ranka należy usunąć przegrodę. Wkrótce po zapaleniu światła należy pozostawić ryby do rozrodu bez zakłóceń na 20 minut lub do momentu, aż na dnie zbiornika zostanie złożona odpowiednia liczba embrionów.

Po rozrodzie należy przenieść ryby z powrotem do zbiorników. Jaja należy zebrać za pomocą sitka. Następnie należy dokładnie wypłukać embriony.

Z wodą systemową. Przenieść zarodki do szalki Petriego, wypłukując sitko z medium do zarodków. Zarodki można obserwować pod mikroskopem.

Zarodki niezapłodnione należy oddzielić od zapłodnionych za pomocą igły i pipety. Po oddzieleniu jaj zapłodnionych od niezapłodnionych, przechowuje się je w inkubatorze w temperaturze około 28,5 °C przez 72 godziny, aż do wyklucia się larw. W tym momencie larwy opuszczają choriony i swobodnie pływają.

Larwy należy karmić od piątego dnia po zapłodnieniu i utrzymywać w wodzie stojącej przez kilka dni przed przeniesieniem ich do systemu. Ostrożnie przenieś larwy do zbiornika zawierającego sito o małej oczkowości, około 300 do 400 mikronów. Po 14 dniach zbiorniki z larwami można umieścić w systemie i zasilić niewielkim strumieniem wody w obiegu.

W zależności od wielkości larw i dorosłych ryb należy stosować przegrody o różnych rozmiarach. Zazwyczaj rozwój embrionów do stadium dojrzałych płciowo osobników trwa trzy miesiące. Dziękujemy za zapoznanie się z materiałem i życzymy powodzenia w prowadzeniu eksperymentów.