Name: Czerwiec 2012: W tym miesiącu w JoVE (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Poznaj innowacyjne metody przygotowania przeszczepów rogówki w okulistyce. Badacze z Włoch i Michigan prezentują techniki poprawiające skuteczność keratoplastyki i przywracające wzrok pacjentom.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3709">Hybrydyzacja in situ gruczołów ślinowych, jajników i zarodków komarów-wektorów</a></h2>
Jennifer Juhn1, Anthony A. James2, 1 1Wydział Biologii Molekularnej i Biochemii, Uniwersytet Kalifornijski, Irvine , 2Wydział Mikrobiologii i Genetyki Molekularnej, Uniwersytet Kalifornijski, Irvine 
Czasowe i przestrzenne analizy ekspresji genów odgrywają kluczową rolę w genomice funkcjonalnej. Hybrydyzacja całomocowana in situ jest przydatna do określania lokalizacji transkryptów w tkankach i przedziałach subkomórkowych. W tym miejscu przedstawiamy protokół hybrydyzacji in situ z modyfikacjami dla określonych tkanek docelowych u komarów.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3763">Badanie mitotycznego punktu kontrolnego poprzez zilustrowanie dynamicznego zachowania białek kinetochorowych i ruchu chromosomów w żywych zarodkach syncytialnych Drosophila</a></h2>
Maureen Sinclair1, Jun-Yong Huang2, 1 1Institute for Cell and Molecular Biosciences, University of Newcastle, Wielka Brytania, 2Instytut Nauk Komórkowych i Molekularnych, Uniwersytet w Newcastle
Kinetochor to miejsce, w którym SAC inicjuje swój sygnał, monitorując mitotyczną segregację chromatyd siostrzanych. Opisano metodę wizualizacji rekrutacji i obrotu jednego z białek kinetochoru oraz jego koordynacji z ruchem chromosomów w zarodkach Drosophila za pomocą laserowego skaningowego systemu konfokalnego Leica.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3765">Uproszczona technika wycinania in situ rogówki i patroszenia tkanki siatkówki z gałki ocznej człowieka</a></h2>
Mohit Parekh1, Stefano Ferrari1, Enzo Di Iorio1, Vanessa Barbaro1, Davide Camposampiero1, Marianthi Karali2, Diego Ponzin1, Gianni Salvalaio3, 1 1Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto O.N.L.U.S. , 2Telethon Institute for Genetics & Medicine (T.I.G.E.M.), 3Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto, O.N.L.U.S.
Artykuł opisuje uproszczoną technikę wycinania rogówki i patroszenia tkanek siatkówki z gałki ocznej ludzkich dawców zwłok. Opisana tu technika pomoże w wycięciu dobrej jakości tkanek do wykorzystania do celów transplantacyjnych, chirurgicznych lub badawczych bez uszkadzania innych tkanek gałki ocznej.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3813">Efektywne różnicowanie embrionalnych komórek macierzystych myszy w neurony ruchowe</a></h2>
Chia-Yen Wu1, Dosh Whye2, 1, Robert W. Mason1, Wenlan Wang1 1Nemours Biomedical Research, Alfred I. duPont Hospital for Children, 2Department of Pediatrics, Columbia University Medical Center
Opracowaliśmy nowy protokół, aby poprawić efektywność różnicowania in vitro embrionalnych komórek macierzystych myszy w neurony ruchowe. Zróżnicowane komórki ES nabyły cechy neuronów ruchowych, o czym świadczy ekspresja markerów neuronów i neuronów ruchowych przy użyciu technik immunohistochemicznych.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3847">Przygotowanie tkanki dawcy rogówki do keratoplastyki śródbłonka</a></h2>
Maria A. Woodward1, Michael Titus2, Kyle Mavin2, Roni M. Shtein1 1Wydział Okulistyki, Uniwersytet Michigan, 2MidWest Eye Banks
Przeszczep śródbłonka rogówki jest techniką chirurgiczną stosowaną w leczeniu chorób tylnej części rogówki. Mechaniczna dyssekcja mikrokeratomu w celu przygotowania tkanki skutkuje cieńszymi, bardziej symetrycznymi przeszczepami z mniejszą utratą komórek śródbłonka i lepszymi wynikami. Sekcje można wykonać w banku oka przed operacją przeszczepu rogówki.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3958">Mikrofluidyka śródbłonkowa do badania interakcji mikronaczyniowych w chorobach hematologicznych</a></h2>
David R. Myers1, 2, 3, 4,*, Yumiko Sakurai1, 2, 3, 4,*, Reginald Tran1, 2, 3, 4, Byungwook Ahn1, 2, 3, 4, Elaissa Trybus Hardy1, 2, 3, 4, Robert Mannino1, 2, 3, 4, Ashley Kita1, 2, 3, 4, Michelle Tsai1, 2, 3, 4, Wilbur A. Lam1, 2, 3, 4 1Wydział Pediatrii, Emory University School of Medicine, 2Wallace H. Coulter Department of Biomedical Engineering, Georgia Institute of Technology i Emory University, 3Aflac Cancer Center and Blood Disorders Service of Children's Healthcare of Atlanta , 4Winship Cancer Institute Uniwersytetu Emory * Autorzy ci przyczynili się w równym stopniu
Opisano metodę hodowli monowarstwy komórek śródbłonka na całej wewnętrznej powierzchni 3D urządzenia mikroprzepływowego z kanałami o rozmiarach mikrokrążeniowych (<30 μm). Ten model mikrokrążenia in vitro umożliwia badanie biofizycznych interakcji między komórkami krwi, komórkami śródbłonka i czynnikami rozpuszczalnymi w chorobach hematologicznych.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3993">Rejestrowanie ludzkich sygnałów elektrokortykograficznych (ECoG) do badań neuronaukowych i funkcjonalnego mapowania kory mózgowej w czasie rzeczywistym</a></h2>
N. Jeremy Hill1, Disha Gupta2, 1, Peter Brunner2, 1, Aysegul Gunduz2, 1, Matthew A. Adamo3, Anthony Ritaccio2, Gerwin Schalk1, 2, 4, 5, 6, 7 1Wadsworth Center, Departament Zdrowia Stanu Nowy Jork, 2Wydział Neurologii, Albany Medical College, 3Wydział Neurochirurgii, Albany Medical College, 4Wydział Neurochirurgii, Uniwersytet Waszyngtoński, 5Wydział Biomed. inż., Rensselaer Polytechnic Institute, 6Zakład Biomed. Sci., UNIWERSYTET STANOWY NOWEGO JORKU W ALBANY, 7Wydział Elektryczności i Inżynierii, Uniwersytet Teksański w El Paso 
Prezentujemy metodę zbierania sygnałów elektrokortykograficznych do celów badawczych od ludzi, którzy są poddawani inwazyjnemu monitorowaniu padaczki. Pokazujemy, jak wykorzystać platformę programową BCI2000 do zbierania danych, przetwarzania sygnałów i prezentacji bodźców. W szczególności demonstrujemy SIGFRIED, oparte na BCI2000 narzędzie do funkcjonalnego mapowania mózgu w czasie rzeczywistym.

Nie zadeklarowano konfliktów interesów.

czerwiec 2012: ten miesiąc w jove

June 2012: This Month in JoVE

W 1905 roku, na terenie dzisiejszej Republiki Czeskiej, Eduard Zirm przeprowadził pierwszą operację przeszczepu rogówki (keratoplastykę), która przywróciła wzrok pacjentowi oślepłemu w wyniku urazu rogówki. Obecnie banki tkanek oka na całym świecie przygotowują, przechowują i dystrybuują donacyjne rogówki do szpitali, dzięki czemu każdego roku można przeprowadzić tysiące ratujących wzrok keratoplastyk. W czerwcu 2012 roku JoVE przygląda się dwóm grupom badawczym, jednej z Włoch, a drugiej z Michigan, które prezentują dwie odrębne metody przygotowania przeszczepu rogówki przed transplantacją.
Nasi autorzy z Włoch prezentują technikę wycinania rogówki z gałki ocznej, która obejmuje najpierw zanurzenie jej w serii roztworów sterilizujących w celu przygotowania do sterylnej manipulacji, wykonanie nacięcia na powierzchni twardówki, a ostatecznie oddzielenie obrąbka rogówkowo-twardówkowego od gałki ocznej. Po usunięciu rogówki sprawdzana jest gęstość i żywotność komórek endotelialnych, a następnie preparat jest przygotowywany do długoterminowego przechowywania, podczas którego medium jest okresowo badane metodą wysokoprzepustową wraz z innymi przeszczepami zdeponowanymi w banku tkanek oka.
W zabiegach transplantacji rogówki stosuje się przeszczepy pełnej grubości w procedurze zwanej keratoplastyką penetrującą; JoVE wskazuje jednak, że w niektórych schorowanych rogówkach dotknięta jest jedynie warstwa śródbłonka. Autorzy z University of Michigan &amp; Midwest Eye Bank prezentują dalsze przetwarzanie rogówek donora za pomocą zautomatyzowanej keratoplastyki śródbłonka z usunięciem błony Descemeta (DSAEK), procedury polegającej na przeszczepieniu wyłącznie warstwy śródbłonka rogówki. Ta stosunkowo nowa metoda jest możliwa dzięki zastosowaniu mikrokeratomu – urządzenia, które pozwala na precyzyjne przecięcie rogówki w celu oddzielenia warstwy śródbłonka do transplantacji. Jednorodność i jakość tkanki donora są weryfikowane za pomocą lampy szczelinowej i mikroskopii zwierciadlanej, a następnie przeszczep jest przechowywany do czasu operacji transplantacji rogówki.
Dwie grupy autorów z różnych kontynentów udokumentowały wspólnie etapy usuwania całej rogówki z oka oraz izolowania warstwy tylnej do keratoplastyki śródbłonkowej — procesu, który zmniejsza ryzyko infekcji lub odrzucenia przeszczepu i poprawia zdolność widzenia pacjenta.
W JoVE Neuroscience wielodyscyplinarny zespół klinicystów i naukowców przedstawia nowe zastosowania badawcze elektrokortykografii (ECoG). ECoG jest procedurą inwazyjną, w której wykorzystuje się elektrody paskowe i siatkowe umieszczone bezpośrednio na mózgu w celu lokalizacji ognisk napadów u pacjentów z epilepsją. Procedura ta może być również stosowana do mapowania obszarów kory mózgowej, które muszą zostać oszczędzone podczas operacji resekcyjnej. Mapowanie kory odbywa się poprzez monitorowanie, czy stymulacja danej elektrody prowadzi do zaburzenia ruchu lub mowy. Pacjenci są zazwyczaj poddawani monitorowaniu wewnątrzczaszkowemu w celu zlokalizowania ognisk napadów przez około tydzień, a czas ten stanowi unikalną okazję dla badaczy do analizy pracy ludzkiego mózgu za pomocą ECoG, która charakteryzuje się lepszym stosunkiem sygnału do szumu i mniejszą podatnością na artefakty rejestracji niż nieinwazyjna elektroencefalografia (EEG).
Po ustaleniu aktywności bazowej w stanie spoczynku, autorzy rejestrują aktywność mózgu w wysokim zakresie częstotliwości gamma podczas prostych zadań poznawczych lub motorycznych. Następnie badacze ci demonstrują, jak wykorzystać system programistyczny SIGFRIED do szybkiego mapowania funkcjonalnego w czasie rzeczywistym w oparciu o sygnały ECoG, które są następnie analizowane w celu uzyskania informacji na temat obszarów mózgu powiązanych z konkretnymi zadaniami.
W sekcji Bioengineering JoVE przedstawia zespół naukowców, którzy wykazują, że mikrokrążenie można w przybliżeniu odtworzyć na chipie. Ten „chip” jest w rzeczywistości urządzeniem z kanałami mikroprzepływowymi pokrytymi komórkami śródbłonka. Do wytrawienia wzoru kanałów na waflu krzemowym, który służy jako forma dla PDMS, wykorzystuje się fotolitografię SU-8. Po wykonaniu urządzenia zostaje ono zasiane komórkami śródbłonka, które są hodowane w kanałach. Dzięki przejrzystości PDMS komórki można obrazować za pomocą mikroskopii. Ten model mikrokrążenia in vitro zapewnia kontrolowane mikrośrodowisko, które może być wykorzystywane do badania normalnych procesów hemodynamicznych, a także w chorobach hematologicznych.
To krótkie podsumowanie jest jedynie wglądem w część treści JoVE na czerwiec. Dalsza analiza może doprowadzić do zapoznania się z metodami hybrydyzacji in situ tkanek i embrionów dorosłych komarów, wizualizacji mitozy u drosofil oraz różnicowania embrionalnych komórek macierzystych w neurony ruchowe. Zapraszamy do śledzenia dalszych materiałów.

W 1905 roku, na terenie dzisiejszej Republiki Czeskiej, Eduard Zirm przeprowadził pierwszą operację przeszczepu rogówki (keratoplastykę), która przywróciła wzrok pacjentowi oślepłemu w wyniku urazu rogówki. Obecnie banki tkanek oka na całym świecie przygotowują, przechowują i dystrybuują darowane rogówki do szpitali, dzięki czemu każdego roku można przeprowadzić tysiące ratujących wzrok keratoplastyk. W czerwcu 2012 roku JoVE przybliża dwie grupy badawcze, jedną z Włoch, a drugą z Michigan, które prezentują dwie odrębne metody przygotowania przeszczepu rogówki przed transplantacją.

Czerwiec 2012: Ten miesiąc w JoVE

W 1905 roku, na terenie dzisiejszej Republiki Czeskiej, Eduard Zirm przeprowadził pierwszą operację przeszczepu rogówki (keratoplastykę), która przywróciła wzrok pacjentowi oślepłemu w wyniku urazu rogówki. Obecnie banki tkanek oka na całym świecie przygotowują, przechowują i dystrybuują darowane rogówki do szpitali, dzięki czemu każdego roku można przeprowadzić tysiące ratujących wzrok keratoplastyk. W czerwcu 2012 roku JoVE przybliża działania dwóch grup badawczych, jednej z Włoch, a drugiej z Michigan, które demonstrują dwie odrębne metody przygotowania przeszczepu rogówki przed transplantacją. Autorzy z Włoch prezentują technikę wycięcia rogówki z gałki ocznej, która polega na uprzednim zanurzeniu jej w serii roztworów sterylizujących w celu przygotowania do sterylnej manipulacji, wykonaniu nacięcia na powierzchni twardówki, a następnie oddzieleniu pierścienia rogówkowo-twardówkowego od gałki ocznej. Po usunięciu rogówki sprawdzana jest gęstość i żywotność komórek śródbłonka, a następnie przygotowuje się ją do długoterminowego przechowywania, podczas którego medium jest okresowo badane metodą wysokoprzepustową wraz z innymi przeszczepami znajdującymi się w banku tkanek. W operacjach przeszczepiania rogówki stosuje się przeszczepy pełnej grubości w procedurze nazywanej keratoplastyką penetrującą; jednak JoVE informuje, że w przypadku niektórych schorzeń rogówki dotknięta jest jedynie warstwa śródbłonka. Autorzy z University of Michigan & Midwest Eye Bank demonstrują dalszą obróbkę rogówek donatorskich przy użyciu zautomatyzowanej keratoplastyki śródbłonka z usunięciem błony Descameta (DSAEK), czyli procedury polegającej na przeszczepieniu wyłącznie warstwy śródbłonka rogówki. Ta stosunkowo nowa procedura jest możliwa dzięki zastosowaniu mikrokeratomu – urządzenia, które pozwala na precyzyjne przecięcie rogówki w taki sposób, aby warstwa śródbłonka mogła zostać oddzielona do transplantacji. Jednorodność i jakość tkanki donatorskiej weryfikuje się za pomocą lampy szczelinowej oraz mikroskopii zwierciadlanej, a następnie przeszczep jest przechowywany do czasu operacji przeszczepienia rogówki. Wspólnie dwie grupy autorów z różnych kontynentów udokumentowały kolejne etapy usuwania całej rogówki z oka oraz izolowania warstwy tylnej do keratoplastyki śródbłonka – procesu, który zmniejsza ryzyko infekcji lub odrzucenia przeszczepu i poprawia zdolność widzenia pacjenta. W JoVE Neuroscience wielodyscyplinarny zespół klinicystów i naukowców przedstawia nowe zastosowania badawcze elektrokortykografii (ECoG). ECoG to inwazyjna procedura z wykorzystaniem elektrod paskowych i siatkowych umieszczanych bezpośrednio na mózgu w celu lokalizacji ognisk napadów u pacjentów z epilepsją. Procedura ta może być również wykorzystywana do mapowania obszarów kory mózgowej, których należy uniknąć podczas operacji resekcyjnej. Mapowanie kory odbywa się poprzez monitorowanie, czy stymulacja danej elektrody prowadzi do zaburzenia ruchu lub mowy. Pacjenci są zazwyczaj poddawani monitorowaniu wewnątrzczaszkowemu w celu zlokalizowania ognisk napadów przez około tydzień, a czas ten stanowi wyjątkową okazję dla badaczy do analizy pracy ludzkiego mózgu za pomocą ECoG, która charakteryzuje się lepszym stosunkiem sygnału do szumu i mniejszą podatnością na artefakty rejestracyjne niż nieinwazyjna elektroencefalografia (EEG). Po ustaleniu aktywności spoczynkowej autorzy rejestrują aktywność mózgu w zakresie wysokich częstotliwości gamma podczas prostych zadań poznawczych lub motorycznych. Następnie badacze demonstrują sposób wykorzystania systemu oprogramowania SIGFRIED do szybkiego, funkcjonalnego mapowania w czasie rzeczywistym w oparciu o sygnały ECoG, które są następnie analizowane w celu dostarczenia informacji o obszarach mózgu związanych z konkretnymi zadaniami. W sekcji Bioengineering JoVE prezentuje zespół naukowców, którzy wykazali, że mikrokrążenie można w przybliżeniu odtworzyć na chipie. Ten „chip” jest w rzeczywistości urządzeniem z kanałami mikrofluidycznymi pokrytymi komórkami śródbłonka. Do wytrawienia wzoru kanałów na waflu krzemowym, który służy jako forma dla PDMS, wykorzystano fotolitografię SU-8.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Czerwiec 2012: W tym miesiącu w JoVE

Poznaj innowacyjne metody przygotowania przeszczepów rogówki w okulistyce. Badacze z Włoch i Michigan prezentują techniki poprawiające skuteczność keratoplastyki i przywracające wzrok pacjentom.

Czerwiec 2012: W tym miesiącu w JoVE (Wideo) | JoVE Journal

Wendy Chao

Aaron Kolski-Andreaco

Czerwiec 2012: Ten miesiąc w JoVE

Przeglądaj więcej filmów