3 października 2016
Chociaż badacze są ogólnie zaznajomieni z procedurami i środkami ostrożności wymaganymi do eksperymentów na poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1 lub 2 (BSL-1/2), mogą nie być zaznajomieni z procedurami eksperymentalnymi w laboratoriach kombinezonów BSL-4. Ten artykuł zawiera szczegółową wizualną demonstrację systemów laboratoryjnych kombinezonu BSL-4 sprawdzania, procedur wejścia, przemieszczania i wychodzenia z laboratorium.
Ogólnym celem niniejszej procedury jest zademonstrowanie prawidłowego sposobu zakładania i zdejmowania kombinezonu z nadciśnieniem oraz zasad wchodzenia i wychodzenia z laboratorium o czwartym poziomie bezpieczeństwa biologicznego (BSL-4) z wykorzystaniem kombinezonów. Dla personelu rozpoczynającego pracę w badaniach o wysokim stopniu izolacji procedura ta opisuje kroki związane z zakładaniem kombinezonu z nadciśnieniem i wejściem do laboratorium BSL-4. Zastosowanie tej techniki pozwala zwiększyć bezpieczeństwo personelu w Integrated Research Facility NIH w Fort Detrick poprzez inspekcję środków ochrony indywidualnej oraz odpowiednią dekontaminację kombinezonu.
Procedurę zaprezentuje Ricky Adams, technik z NIH Integrated Research Facility w Fort Detrick. W dzienniku wejść i wyjść personelu należy wpisać imię i nazwisko pracownika, godzinę wejścia, lokalizację laboratorium oraz badane patogeny. Należy wskazać lokalizację laboratorium i sprawdzić, czy laboratoria zostały zwolnione do wejścia.
Aby upewnić się, że ciśnienie w pomieszczeniu laboratoryjnym mieści się w zakresach podciśnienia zapewniających właściwy kierunek przepływu powietrza, należy zapoznać się z wypełnionym arkuszem kontrolnym systemów. Należy pobrać odzież ochronną, skarpetki i ręczniki z magazynu z zapasami placówki, znajdującego się w pobliżu dziennika wejść i wyjść personelu. Po przejściu przez punkty kontroli dostępu do zewnętrznej szatni należy zdjąć odzież cywilną, bieliznę, biżuterię oraz zegarki.
Załóż odzież operacyjną i udaj się do pomieszczenia z kombinezonami. Wybierz kombinezon ochronny z nadciśnieniem i dokonaj oględzin pod kątem dziur, rozdarć, miejsc przebicia, pęknięć szwów lub słabych punktów. Dokładnie sprawdź zewnętrzne rękawice kombinezonu, ponieważ są one elementem najbardziej narażonym na uszkodzenia.
Wymieniaj rękawiczki co najmniej raz na siedem dni kalendarzowych lub w przypadku stwierdzenia ich uszkodzenia. Aby wymienić zewnętrzne rękawiczki w tym modelu kombinezonu, usuń taśmę uszczelniającą z obecnej rękawiczki, zsuń pierścień O-ring na rękaw i zdejmij starą rękawiczkę. Załóż nową rękawiczkę na mankiet kombinezonu, upewniając się, że całkowicie zakrywa ona mankiet, a kciuk znajduje się w odpowiedniej pozycji.
Nałóż uszczelkę typu o-ring na rękawiczkę, osadź ją w rowku na mankiecie i użyj taśmy klejącej, aby zabezpieczyć zewnętrzną rękawiczkę kombinezonu. Zawiń mankiet rękawiczki na taśmie i uszczelce, zamocuj rękawiczkę ostatnim kawałkiem taśmy klejącej i ponownie sprawdź nowo zamocowaną rękawiczkę. Co najmniej raz w tygodniu nałóż cienką warstwę smaru do zamków na zamek błyskawiczny.
Następnie zaklej każdy z zaworów wylotowych wewnątrz kombinezonu taśmą naprawczą lub zamknij go aluminiową zaślepką do prób ciśnieniowych, a następnie zapnij kombinezon suwakiem. Podłącz szybkozłączki znajdujące się na końcach każdej linii oddechowej do przyłączy węży w kombinezonie. Napompuj kombinezon, aż rękawy i nogawki staną się sztywne, a następnie ustaw go w pozycji pionowej.
Odłącz zasilanie powietrzem. Nie doprowadzaj do nadmiernego nadciśnienia w kombinezonie, ponieważ zbyt wysokie ciśnienie może spowodować poważne uszkodzenia sprzętu. Przez około pięć minut dokładnie sprawdzaj kombinezon pod kątem wszelkich oznak wycieku powietrza oraz monitoruj go pod kątem oznak utraty ciśnienia.
Jeśli kombinezon straci sztywność, należy sprawdzić go pod kątem nieszczelności, ponownie go napompowując. Należy nasłuchiwać i badać dotykiem ewentualne wycieki powietrza, które mogą występować w okolicach szwów, zamka błyskawicznego oraz miejsca łączenia wizjera z kombinezonem. W razie potrzeby można spryskać kombinezon roztworem mydła, aby ułatwić wizualizację miejsca nieszczelności.
Monitoruj powstawanie pęcherzyków powietrza świadczących o nieszczelności, zwracając szczególną uwagę na szwy w wizjerze. Sprawdź, czy zawory wylotowe są całkowicie szczelne. Rozepnij zamek w kombinezonie i zdejmij osłony z zaworów wylotowych.
Niezdemontowanie osłon wylotowych uniemożliwi ucieczkę powietrza i spowoduje poważne uszkodzenie kombinezonu. Wpisz informacje o testowaniu i naprawach do dziennika testów szczelności kombinezonu z nadciśnieniem. Następnie przyklej skarpetki taśmą do nogawek odzieży operacyjnej.
Założyć wewnętrzne rękawiczki nitrylowe i przytwierdzić je taśmą klejącą do mankietów odzieży operacyjnej. Założyć drugą parę rękawiczek nitrylowych na rękawiczki wewnętrzne. W razie potrzeby oczyścić wewnętrzną stronę przyłbicy płynem do szyb w celu poprawy widoczności.
Załóż kombinezon z nadciśnieniem, zapnij go całkowicie i podłącz wąż doprowadzający powietrze. Przed wejściem do laboratorium BSL-4 upewnij się, że system automatyki budynkowej wskazuje prawidłowe ciśnienie w strefie. Aby wejść do laboratoriów wymagających kombinezonów BSL-4, odłącz się od węża doprowadzającego powietrze w pomieszczeniu przebranym i naciśnij przycisk prośby o dostęp do prysznica chemicznego.
Aby przejść przez śluzę z prysznicem chemicznym, należy zamknąć drzwi odporne na ciśnienie powietrza (APR) prowadzące do pomieszczenia z kombinezonami i poczekać, aż uszczelka całkowicie zamknie ramę drzwi. Następnie należy aktywować drugie drzwi APR, prowadzące do laboratorium. Wejdź do laboratorium BSL-4 i podłącz kombinezon do linii doprowadzającej powietrze.
Zamknij drzwi APR prowadzące do laboratorium. Upewnij się, że prysznic chemiczny został aktywowany automatycznie. Po zakończeniu cyklu prysznica drzwi APR mogą zostać ponownie otwarte z pomieszczenia do przebierania w kombinezony.
Poruszaj się swobodnie po laboratorium, zmieniając podłączenia do linii doprowadzających sprężone powietrze. Pozostawaj podłączony do linii tak długo, jak to możliwe, nawet podczas pochylania się. Obserwuj monitory, poszczególne alarmy oraz aktualny status zestawu.
Aby opuścić laboratorium BSL-4, należy zdezynfekować dłonie w rękawiczkach oraz mankiety w plastikowych zbiornikach z detergentem dezynfekującym. W przypadku braku zbiornika, należy dokładnie spryskać dłonie w rękawiczkach środkiem dezynfekującym. Odłącz się od linii doprowadzającej powietrze do oddychania i udaj się pod prysznic chemiczny.
Wejdź do prysznica chemicznego, naciskając przycisk prośby o dostęp, aby otworzyć drzwi APR od strony laboratorium, a następnie zamknij drzwi. Ponownie podłącz kombinezon do linii doprowadzającej powietrze wewnątrz prysznica. Po zamknięciu drzwi APR cykl prysznica chemicznego powinien rozpocząć się automatycznie.
Sprawdzić szczelność rękawic i butów, umieszczając dłonie w rękawicach oraz stopy w plastikowej kuwecie z roztworem detergentu i środka dezynfekującego, znajdującej się w prysznicu chemicznym. Sprawdzić, czy na zewnętrznej rękawicy nie ma pęknięć, rozdarć lub miejsc osłabionych i poszukać cieczy uwięzionej pod zewnętrzną rękawicą. W przypadku wykrycia nieszczelności należy poczekać do zakończenia cyklu prysznica, zdjąć zewnętrzną rękawicę kombinezonu i pozostawić ją w plastikowej kuwecie.
Wyszoruj kombinezon oraz zintegrowane obuwie za pomocą szczotki z długim uchwytem lub dłońmi, aby rozprowadzić środek dezynfekujący na powierzchni kombinezonu. Podczas cyklu wodnego prysznica dokładnie wypłucz z kombinezonu detergent i środek dezynfekujący. Odłącz wąż doprowadzający powietrze, a następnie zdezynfekuj i wypłucz złącze w kombinezonie podczas cyklu chemicznego i wodnego prysznica.
Po zakończeniu otwórz drzwi APR prowadzące do pomieszczenia z kombinezonami i zamknij je po wyjściu. Osusz zewnętrzną stronę kombinezonu dużym ręcznikiem. Rozepnij suwak kombinezonu z nadciśnieniem.
Wyjmij jedną dłoń z rękawicy kombinezonu zewnętrznego i dokładnie sprawdź zewnętrzną stronę zewnętrznej rękawicy nitrylowej pod kątem obecności wilgoci. Wyjmij drugą dłoń i powtórz czynność. Zdejmij kombinezon, powieś go i kontynuuj suszenie jego zewnętrznej strony, aby zapobiec uszkodzeniom wynikającym z tzw. suchej zgnilizny.
Spryskać wnętrze przyłbicy środkiem do mycia szyb i wytrzeć do sucha. Po powieszeniu kombinezonu do wyschnięcia usunąć taśmę klejącą i wewnętrzne rękawiczki nitrylowe z odzieży ochronnej, a następnie wyrzucić te elementy do pojemnika na odpady biologiczne. Udać się do szatni, zdjąć odzież ochronną oraz skarpetki i wejść pod prysznic osobisty.
Po prysznicu osobistym należy wpisać godzinę wyjścia do dziennika wejść i wyjść personelu oraz zaznaczyć wyjście z laboratorium na tablicy lokalizacji. Personel został starannie i szczegółowo przeszkolony w zakresie tych technik, aby zapewnić bezpieczne i spójne praktyki wewnątrz obiektu o czwartym poziomie bezpieczeństwa biologicznego. Dzięki weryfikacji prawidłowego funkcjonowania obiektu zgodnie z codzienną listą kontrolną, wszystkie niezbędne środki administracyjne i techniczne są wdrożone w celu utrzymania bezpiecznego środowiska.
Kombinezon z nadciśnieniem zapewnia dodatkową warstwę ochrony dla personelu. Prawidłowa konserwacja i użytkowanie tych kombinezonów są niezbędne dla zapewnienia tej ochrony. Ścisłe przestrzeganie opisanych procedur i praktyk oraz właściwe stosowanie zabezpieczeń technicznych pomagają zapobiegać zakażeniom nabytym w laboratorium i zapewniają szczelne zabezpieczenie materiałów zakaźnych.
W zintegrowanym ośrodku badawczym NIH NIAID w Fort Detrick do chwili obecnej nie odnotowano żadnej laboratoryjnej infekcji nabytej. Po obejrzeniu tego filmu powinni Państwo posiadać dobrą wiedzę na temat tego, jak zakładać i zdejmować kombinezon z nadciśnieniem oraz jak wchodzić do laboratorium o czwartym poziomie bezpieczeństwa biologicznego i z niego wychodzić. Przedstawione procedury są ogólnie stosowane w IRF i mogą nie być reprezentatywne dla procedur obowiązujących w innych laboratoriach BSL-4.
Podczas pracy w innych laboratoriach poziomu bezpieczeństwa biologicznego 4 należy przestrzegać protokołu właściwego dla danego laboratorium.
Niniejszy artykuł przedstawia szczegółową demonstrację wizualną procedur wchodzenia i wychodzenia z laboratorium poziomu bezpieczeństwa biologicznego 4 (BSL-4). Opisano w nim kroki związane z zakładaniem i zdejmowaniem kombinezonu z nadciśnieniem, co zapewnia bezpieczeństwo personelu podczas prowadzenia badań w warunkach wysokiej izolacji.
Procedury laboratoryjne z wykorzystaniem kombinezonów BSL-4 są kluczowe dla umożliwienia bezpiecznych badań nad patogenami o wysokim stopniu zagrożenia, w przypadku których nie istnieje dostępna profilaktyka ani leczenie. Protokoły te wspierają walidację celu oraz ograniczanie ryzyka mechanistycznego, zapewniając bezpieczeństwo personelu podczas badań nad chorobami zakaźnymi. Przestrzeganie ustandaryzowanych procedur wejścia i wyjścia pozwala zachować szczelność strefy izolacji i redukuje ryzyko operacyjne w początkowych etapach procesów odkrywania leków.
Procesy laboratoryjne w kombinezonach BSL-4 integrują się z continuum odkryć naukowych, umożliwiając bezpieczną pracę z patogenami podczas etapów testowania hipotez oraz identyfikacji wiodących związków.