Kompletna i zaktualizowana "metoda polikultury wrotka" do hodowli danio pręgowanego po raz pierwszy

Ogólnym celem metody polikultury wrotka jest wykorzystanie naturalnej produktywności i cech biologicznych wrotków słonowodnych w celu stworzenia środowiska sprzyjającego szybkiemu wzrostowi i maksymalnej przeżywalności larw danio pręgowanego po raz pierwszy. Główną zaletą tej techniki jest to, że radykalnie zmniejsza ilość czasu i przestrzeni potrzebnej do pomyślnego wyhodowania dużej liczby larw danio pręgowanego do wykorzystania w eksperymentach badawczych. Rozpocznij konserwację kultur wrotka, napełniając naczynie hodowlane lub FCV do 90 procent pojemności czystą, odchlorowaną słodką wodą z dozownikiem 10 gramów na litr soli akwariowych.

Upewnij się, że woda jest dokładnie wymieszana i że cała sól jest całkowicie rozpuszczona. Następnie ustaw przepływ powietrza do naczynia tak, aby utrzymywało wrzenie. Zmierz zasolenie cieczy za pomocą refraktometru.

Następnie należy pobrać próbki wrotków w naczyniu hodowlanym lub CV. Upewnij się, że kultura jest dobrze wymieszana. Następnie zbierz trzy dwu- lub trzymililitrowe próbki za pomocą pipety transferowej z różnych części kultury i połącz próbki w probówce. Przenieść od jednego do dwóch mililitrów połączonej próbki na szalkę Petriego.

Wizualizuj próbkę pod mikroskopem preparacyjnym i sprawdź jakość hodowli. Dodaj 100 mikrolitrów 50-procentowego roztworu jodu Lugola do próbki, aby unieruchomić wrotki i policzyć je. Natychmiast pobrać dwumililitrową podpróbkę za pomocą plastikowej pipety i dozować jeden mililitr do szkiełka do liczenia krokwi Sedgewick

Za pomocą mikroskopu preparacyjnego policz tyle powierzchni szkiełka, ile potrzeba, aby policzyć do 100 nienaruszonych wrotków i całkowitą liczbę jaj przyczepionych do wrotków. Następnie oblicz liczbę wrotków na mililitr do późniejszego wykorzystania. Rozpocznij zbiory, wyjmując dopływ powietrza i filtr nici dentystycznej.

Powoli otwórz zawór w dolnej części CV i pozwól, aby woda delikatnie spłynęła do kolektora planktonu z siatką o oczkach 53 mikronów. Zbierz wodę wypływającą z dna kolektora po przefiltrowaniu do wiadra lub spuszczeniu. Następnie napełnij butelkę 10 do 15 gramami na litr czystej słonej wody.

Odwróć sitko nad FCV i umyj wrotki w FCV delikatnym strumieniem słonej wody. Uruchom programowalny timer dozowania lub PMT, aby dostarczyć paszę do FCV. Następnie wyszoruj całe wnętrze CV czystym padem do szorowania.

Utwórz nową mieszankę 15 gramów na litr w wiadrze o pojemności pięciu galonów, aby zastąpić objętość wody utraconej podczas zbiorów. Energicznie mieszaj roztwór, aż mieszanina całkowicie się rozpuści. Następnie dodaj roztwór do CV. Następnie przepłucz filtr nici dentystycznej sprayem pod wysokim ciśnieniem.

Gdy filtr nici dentystycznej jest wolny od zanieczyszczeń, należy go umieścić z powrotem w CV.Dostosuj dawki podawania glonów dostarczanych do CV, zmieniając czas trwania każdego dozowania. Po 24 godzinach powtórz proces, rozpoczynając zbiór wrotków pozostających w FCV. Skoncentruj wrotki w dwóch litrach świeżej, czystej, odchlorowanej wody z pięcioma gramami soli na litr.

Mogą one być przechowywane w temperaturze czterech stopni Celsjusza jako zapas lub wykorzystywane do karmienia ryb w późniejszych stadiach poza tym, co opisano w tym protokole. Zbierz zarodki danio pręgowanego z tarła, przelewając zarodki z tarła przez sitko do herbaty. A następnie delikatnie spłukując sterylną wodą rybną z butelki do mycia na szalki Petriego.

Po zebraniu wszystkich zarodków należy je wysiadywać. Rozpocznij fazę polikultury, gdy ponad 90 procent wyklutych larw aktywnie pływa w słupie wody. Dodaj 500 mililitrów kultury wrotka bezpośrednio z FCV do 3,5-litrowego zbiornika szkółkarskiego.

Następnie delikatnie wlej larwy z jednej szalki Petriego do zbiornika szkółkarskiego. Upewnij się, że w naczyniu nie pozostały żadne larwy. Dodaj 500 mililitrów czystej, kondycjonowanej wody dla ryb z dedykowanego źródła wody do zbiornika do końcowej objętości jednego litra i 5 gramów na litr końcowego zasolenia.

Obserwuj zbiornik polikulturowy co najmniej raz dziennie, aby upewnić się, że wrotki i ryby są obecne i rosną. Sprawdź, czy wrotki są widoczne w całym słupie wody. Upewnij się, że ryby są również widoczne w słupie wody i że pływają wśród wrotków.

Bardzo ważne jest, aby codziennie oceniać stan każdego zbiornika, aby upewnić się, że żyją i pływają z wrotkami dostępnymi dla wszystkich larw ryb. Po upewnieniu się, że wrotki i ryby rosną, rozpocznij normalny przepływ wody przez zbiornik. Na koniec umieść sitko nad otworem spustowym, aby upewnić się, że larwy nie zostaną wypłukane ze zbiornika.

Typowa wydajność hodowli wrotków była monitorowana przez okres 30 dni i uzyskała średnią gęstość hodowli 932 wrotki na mililitr. I maksymalnie 1 330 wrotków na mililitr. Populacja wrotka w zbiorniku polikulturowym z danio pręgowanym ma średnią gęstość wrotka wynoszącą 589,4 wrotka na mililitr.

Minimalna wartość 481 wrotków na mililitr jest 10 razy lepsza niż wcześniej opublikowane prace. Danio pręgowany wykazywał stały wzrost każdego dnia przez okres pięciu dni od średniej całkowitej długości 3,9 milimetra do 5,4 milimetra. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak hodować wrotki do użytku w systemie polikultury, który został opracowany w celu spełnienia wymagań żywieniowych danio pręgowanego karmionego po raz pierwszy.