Name: Nieinwazyjna metoda generowania modelu uszkodzenia chrząstki stawowej w kolanie szczura wywołanego cyklicznym obciążeniem (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-05T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 4 s
Description: Poznaj nieinwazyjną metodę indukcji uszkodzenia chrząstki stawowej w kolanie szczura przy użyciu cyklicznego obciążenia 60 cyklami siłą 20 N. Ta technika umożliwia powtarzalne badanie wpływu obciążenia mechanicznego na zdrowie stawów bez interwencji chirurgicznej.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było częściowo wspierane przez grant JSPS KAKENHI (numery JP18H03129 i JP18K19739). 
Badania te otrzymały również finansowanie od Alliance for Regenerative Rehabilitation Research & Training (AR3T), który jest wspierany przez Narodowy Instytut Zdrowia Dziecka i Rozwoju Człowieka im. Eunice Kennedy Shriver (NICHD), Narodowy Instytut Zaburzeń Neurologicznych i Udaru Mózgu (NINDS) oraz Narodowy Instytut Obrazowania Biomedycznego i Bioinżynierii (NIBIB) Narodowych Instytutów Zdrowia w ramach nagrody numer P2CHD086843. Wyłączną odpowiedzialność za treść ponoszą autorzy i nie muszą one reprezentować oficjalnych poglądów National Institutes of Health.

Protokół został zatwierdzony przez Komitet Badań nad Zwierzętami Uniwersytetu w Kioto (numer zatwierdzenia: Med kyo 17616).
1. Wykonaj in vivo cykliczne uciskanie kolana szczura
<ol>
	<li>Wywołaj eksperymentalne znieczulenie zwierząt
	<ol>
		<li>Wywołać znieczulenie u 12-tygodniowego szczura rasy Wistar (256,8 ± 8,7 g) poprzez inhalację 5% roztworu izofluranu w pudełku anestezjologicznym.</li>
		<li>Dootrzewnowo wstrzyknąć mieszaninę trzech środków znieczulających9, w tym medetomidynę, midazolam i butorfanol, w dawce 2 mg/kg masy ciała szczura i ogolić obszar wokół prawego stawu kolanowego. Potwierdź wystarczające znieczulenie przez brak odruchu pedałowania do uszczypnięcia palca.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zamontuj znieczulonego szczura na urządzeniu mocującym.
	<ol>
		<li>Umieść znieczulonego szczura leżącego na brzuchu na płytce podstawy (<silna klasa="xfig">Rysunek 1), z prawym kolanem przymocowanym do małego kawałka żywicy z wklęsłym rowkiem. Umieść prawą tylną kończynę w pozycji wyprostu bioder, zgięcia kolana i wyprostu kostki, z kolanem zgiętym pod kątem około 140°. Dopasuj piętę szczura do rowka w kształcie klina na ruchomym uchwycie.</li>
		<li>Przesunąć urządzenie mocujące do przyrządu do prób naprężeń/rozciągania (patrz Tabela materiałów). Po upewnieniu się, że nie ma styków z ogniwem obciążnikowym, otwórz oprogramowanie sterujące przyrządu do prób naprężeniowych/rozciągania (Tabela materiałów) i kliknij przycisk Kalibracja. Po kalibracji ostrożnie przymocuj górną część ramy do ogniwa obciążnikowego. Aby staw kolanowy był ściśle przymocowany do ramy, powoli włączaj pokrętło na ruchomym głównym panelu operacyjnym, aż obciążenie wstępne osiągnie 5 N.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zbuduj metodę ładowania i skonfiguruj test ściskania.
	<ol>
		<li>W menu głównym kliknij Utwórz nową metodę | Etykieta systemu. Ustaw Tryb testowy na Cykl, a Typ testu na Kompresja. Kliknij etykietę czujnika i wybierz zakładkę Test, aby sprawdzić, czy limit mieści się w granicach 60 N. Ponadto wybierz kartę Skok i sprawdź, czy limit mieści się w zakresie 500 mm. 
		UWAGA: Powyższy krok spowoduje natychmiastowe zatrzymanie operacji, jeśli w punkcie naprężenia występuje duże przemieszczenie.</li>
		<li>Pod etykietą Testowanie kontrolki wybierz Pochodzenie wzrostu, aby uruchomić program główny z 0,3%/pełną skalą. Spośród czterech sekcji w cyklu ładowania, ustaw kontrolowaną prędkość skoku w sekcjach 1i 3 na 1 mm/s. Ustaw maksymalną siłę testową w 2. sekcji na 20 N, a minimalną siłę testową w 4. sekcji na 5 N. Ustaw "Czas utrzymywania" na 0,5 s dla obciążenia szczytowego i 10 s dla minimalnego obciążenia (<silna klasa="xfig">Rysunek 2). 
		UWAGA: Ponieważ ten krok definiuje każdy cykl, upewnij się, że powierzchnie stawów stykają się ze sobą i poruszają się z rozsądną prędkością oraz że ruch jest utrzymany.</li>
		<li>Na karcie Wstępne ładowanie u dołu strony upewnij się, że zaznaczona jest opcja Włącz, prędkość usuwania ugięcia jest ustawiona na 100 mm/min, a maksymalna siła to 5 N. Na etykiecie Próbka ustaw Materiał jako Metal. 
		UWAGA: Te szczegółowe ustawienia mogą być specyficzne dla każdego producenta.</li>
		<li>W menu głównym, w sekcji Wybierz metodę i test, wybierz metodę, która została właśnie utworzona, a następnie kliknij Start, aby rozpocząć test. 
		UWAGA: Tabela na dole przedstawia rzeczywiste pomiary obciążenia szczytowego i przemieszczenia.</li>
		<li>Ustaw liczbę cykli na 60. 
		UWAGA: Cała sesja ładowania obejmuje 60 cykli, które trwają około 12 minut. W grupie kontrolnej szczury były poddawane wstępnemu obciążeniu 5 N przez 12 minut wstępnego obciążenia w tych samych warunkach.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Po załadowaniu włóż szczura z powrotem do klatki i monitoruj, aż do pełnego wyzdrowienia. Utrzymuj 12-12 godzin światła i ciemności w klatce z wystarczającą ilością miejsca i pokarmem ad libitum. Po wymaganych okresach doświadczalnych należy złożyć szczury w ofierze z przedawkowaniem mieszaniny trzech środków znieczulających wstrzykniętych dootrzewnowo lub inhalacji dwutlenkiem węgla w celu analizy (1 godzina-8 tygodni).</li>
</ol>

<ol><li>De Souza, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+axial+loading+of+mouse+tibiae+increases+cortical+bone+formation+and+modifies+trabecular+organization%3A+a+new+model+to+study+cortical+and+cancellous+compartments+in+a+single+loaded+element%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Non-invasive axial loading of mouse tibiae increases cortical bone formation and modifies trabecular organization: a new model to study cortical and cancellous compartments in a single loaded element.</a> Bone. 37 (6), 810-818 (2005).</li>
<li>Poulet, B., Hamilton, R. W., Shefelbine, S., Pitsillides, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+a+novel+and+adjustable+noninvasive+murine+joint+loading+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">Characterizing a novel and adjustable noninvasive murine joint loading model.</a> Arthritis and Rheumatism. 63 (1), 137-147 (2011).</li>
<li>Wu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+response+of+mouse+joint+tissue+to+noninvasive+knee+injury+suggests+treatment+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">Early response of mouse joint tissue to noninvasive knee injury suggests treatment targets.</a> Arthritis and Rheumatism. 66 (5), 1256-1265 (2014).</li>
<li>Poulet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+applied+mechanical+loading+induces+subchondral+bone+thickening+that+may+be+intensified+locally+by+contiguous+articular+cartilage+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Intermittent applied mechanical loading induces subchondral bone thickening that may be intensified locally by contiguous articular cartilage lesions.</a> Osteoarthritis Cartilage. 23 (6), 940-948 (2015).</li>
<li>Ko, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+cell-mediated+changes+in+articular+cartilage+and+bone+in+mice+are+initiated+by+a+single+session+of+controlled+cyclic+compressive+loading%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Progressive cell-mediated changes in articular cartilage and bone in mice are initiated by a single session of controlled cyclic compressive loading.</a> Journal of Orthopaedic Research. 34 (11), 1941-1949 (2016).</li>
<li>Adebayo, O. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+subchondral+bone+properties+and+changes+in+development+of+load-induced+osteoarthritis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Role of subchondral bone properties and changes in development of load-induced osteoarthritis in mice.</a> Osteoarthritis Cartilage. 25 (12), 2108-2118 (2017).</li>
<li>Ko, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+cyclic+compression+causes+cartilage+degeneration+and+subchondral+bone+changes+in+mouse+tibiae%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">In vivo cyclic compression causes cartilage degeneration and subchondral bone changes in mouse tibiae.</a> Arthritis and Rheumatism. 65 (6), 1569-1578 (2013).</li>
<li>Ji, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+in+vivo+cyclic+compressive+loading+on+the+distribution+of+local+Col2+and+superficial+lubricin+in+rat+knee+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of in vivo cyclic compressive loading on the distribution of local Col2 and superficial lubricin in rat knee cartilage.</a> Journal of Orthopaedic Research. 39 (3), 543-552 (2021).</li>
<li>Kawai, S., Takagi, Y., Kaneko, S., Kurosawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+three+types+of+mixed+anesthetic+agents+alternate+to+ketamine+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Animals%22%5BJournal%5D)">Effect of three types of mixed anesthetic agents alternate to ketamine in mice.</a> Experimental Animals. 60 (5), 481-487 (2011).</li>
<li>Iijima, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Destabilization+of+the+medial+meniscus+leads+to+subchondral+bone+defects+and+site-specific+cartilage+degeneration+in+an+experimental+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Destabilization of the medial meniscus leads to subchondral bone defects and site-specific cartilage degeneration in an experimental rat model.</a> Osteoarthritis Cartilage. 22 (7), 1036-1043 (2014).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Po raz pierwszy obecny protokół pokazuje, jak ustalić model uszkodzenia chrząstki wywołanej obciążeniem na bocznym kłykciu kości udowej u szczurów, podobny do modelu uszkodzenia śródstawowego u mniejszych gryzoni, takich jak mysz2. Jednak protokół ładowania u myszy spowodował poważne tworzenie się osteofitów i uszkodzenia więzadła krzyżowego, co nie było idealne do oceny skutków cyklicznej kompresji. Obecny protokół stworzył ogniskową zmianę chrząstki u szczurów o znacznie mniejszej sile obciążeni...

Tradycyjnie, przecięcie więzadła krzyżowego przedniego (ACL) lub destabilizacja łąkotki przyśrodkowej była uważana za optymalną do badania pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów (PTOA) u małych zwierząt. W ostatnich latach do badania PTOA wykorzystano nieinwazyjne modele kompresji cyklicznej. Model ten został pierwotnie zaprojektowany do zbadania reakcji kości gąbczastej na obciążenie mechaniczne1, a następnie został zmodyfikowany jako niechirurgiczny model zwierzęcy do badań PTOA2,3,4,5,6. Uzasadnieniem jest zderzenie chrząstki stawowej poprzez zastosowanie okresowej siły zewnętrznej, która wyzwala szereg reakcji zapalnych. Jednak model ten został zastosowany tylko do myszy, a odpowiednia wielkość obciążenia większych zwierząt nie została omówiona.
Innym problemem poprzedniego modelu jest to, że protokół dużej objętości zawierał zbyt wiele cykli, co powodowało nadmierne pogrubienie kości podchrzęstnej, co było niepożądanym efektem ubocznym, w kilku próbkach7. W związku z tym opracowano nowatorską metodę cyklicznej kompresji o odpowiedniej wielkości dla dużych zwierząt i niższym obciążeniu efektu ubocznego8. Ogólnym celem niniejszego artykułu jest opisanie protokołu nieinwazyjnego modelu cyklicznej kompresji u szczurów oraz obserwacja reprezentatywnych wyników degeneracji chrząstki. Obecny protokół pomógłby czytelnikom zainteresowanym zastosowaniem nieinwazyjnego modelu kompresji cyklicznej na szczurach.

<table><tbody><tr><td>Aparatura anestezjologiczna dla małych zwierząt</td><td>SHINANO MFG CO., LTD.</td><td>SN-487-0T</td><td></td></tr><tr><td>Autograph AG-X</td><td>Shimadzu Corp</td><td>N.A.</td><td>Precyzyjny tester uniwersalny / rozciągający</td></tr><tr><td>Mikroskop Fluoview FV10i</td><td>Olympus Corp</td><td>N.A.</td><td>W pełni zautomatyzowany konfokalny laserowo-skaningowy mikroskop</td></tr><tr><td>ISOFLURAN roztwór do inhalacji</td><td>Pfizer Japan Inc.</td><td>(01)14987114133400</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEA Viability/Cytotoxicity Kit</td><td>Thermo Fisher Scientific Japan Inc</td><td>L3224</td><td>Szybki i łatwy dwukolorowy test do określania żywotności komórek</td></tr><tr><td>Oprogramowanie TRAPEZIUM X</td><td>Shimadzu Corp</td><td>N.A.</td><td>Oprogramowanie do przetwarzania danych dla Autograph AG-X</td></tr></tbody></table>

nieinwazyjna metoda generowania modelu uszkodzenia chrząstki stawowej w kolanie szczura wywołanego cyklicznym obciążeniem

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

Patofizjologia pierwotnej choroby zwyrodnieniowej stawów (OA) pozostaje niejasna. Jednak specyficzna podklasyfikacja choroby zwyrodnieniowej stawów w stosunkowo młodszych grupach wiekowych jest prawdopodobnie skorelowana z historią uszkodzenia chrząstki stawowej i zwichnięcia więzadła. Chirurgiczne modele zwierzęce choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego odgrywają ważną rolę w zrozumieniu początku i postępu pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów oraz pomagają w opracowywaniu nowych terapii tej choroby. Jednak ostatnio rozważano modele niechirurgiczne, aby uniknąć urazowego stanu zapalnego, który mógłby wpłynąć na ocenę interwencji. 
W tym badaniu opracowano model szczura uszkodzenia chrząstki wewnątrzstawowej wywołany cyklicznym obciążeniem kompresyjnym in vivo, co pozwoliło badaczom (1) określić optymalną wielkość, prędkość i czas trwania obciążenia, które mogłoby spowodować ogniskowe uszkodzenie chrząstki; (2) ocenić pourazowe czasoprzestrzenno-patologiczne zmiany w żywotności chondrocytów; oraz (3) ocenić ekspresję histologiczną destrukcyjnych lub ochronnych cząsteczek, które biorą udział w mechanizmach adaptacji i naprawy przeciwko obciążeniom ściskającym stawy. W niniejszym raporcie opisano protokół eksperymentalny dla tej nowej zmiany chrząstki w modelu szczurzym.

Otrzymano reprezentacyjny wynik krótkoterminowych zmian (1 h i 12 h) przeżywalności chondrocytów w próbkach poddanych cyklicznemu obciążeniu 20 N. Jak pokazano na Rysunku 3, liczba martwych chondrocytów (czerwona fluorescencja) wzrosła w 12 h po urazie. Odwrotnie, liczba żyjących chondrocytów (zielona fluorescencja) nadal spadała, a w niektórych próbkach w obszarze objętym urazem nie stwierdzono obecności żywych chondrocytów.
Badania histologiczne wykazały, że chr...

Tutaj prezentujemy model uszkodzenia chrząstki śródstawowej w kolanie szczura wywołany cyklicznym obciążeniem, generowany przez 60 cyklicznych uciśnięć powyżej 20 N, skutkujących uszkodzeniem chrząstki kłykciowej kości udowej u szczurów.

Nieinwazyjna metoda generowania modelu uszkodzenia chrząstki stawowej w kolanie szczura wywołanego cyklicznym obciążeniem

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

Protokół ten pokazuje, że możliwe jest spowodowanie uszkodzenia chrząstki u zwierząt, większych zwierząt, bez żadnej interwencji chirurgicznej lub strukturalnego zniszczenia kolana zwierzęcia. Największą zaletą jest to, że okazuje się powtarzalny u operatorów nawet bez doświadczenia, co jest trudne do osiągnięcia przy użyciu jakiejkolwiek metody chirurgicznej. Zacznij od zamontowania znieczulonego szczura na urządzeniu mocującym.Umieść znieczulonego szczura leżącego na brzuchu na płycie podstawy z prawym kolanem przymocowanym do małego kawałka żywicy z wklęsłym rowkiem. Umieść prawą tylną kończynę w pozycji wyprostu bioder, zgięcia kolana i wyprostu kostki z kolanem zgiętym pod kątem około 140 stopni. Dopasuj piętę szczura do rowka w kształcie klina na ruchomym uchwycie.Przenieś urządzenie mocujące do przyrządu do prób naprężeń i rozciągania i upewnij się, że nie ma kontaktu z ogniwem obciążnikowym. Otwórz oprogramowanie sterujące przyrządem do prób naprężeń i rozciągania i kliknij przycisk kalibracji. Po kalibracji ostrożnie przymocuj górną część ramy do ogniwa obciążnikowego.Powoli włączaj pokrętło na ruchomym głównym panelu operacyjnym, aż napięcie wstępne osiągnie pięć niutonów, aby staw kolanowy był ściśle przymocowany do ramy. W menu głównym kliknij utwórz nową metodę i etykietę systemową. Ustaw tryb testowy na cykliczny, a typ testu na kompresję.Kliknij etykietę czujnika i wybierz zakładkę testu, aby sprawdzić, czy limit mieści się w zakresie 60 niutonów. Następnie wybierz zakładkę obrysu i sprawdź, czy limit mieści się w granicach 500 milimetrów. Pod etykietą kontrolną testowania wybierz pochodzenie wzrostu, aby rozpocząć program główny z 0,3% lub pełną skalą.Ustaw kontrolowaną prędkość skoku w pierwszej i trzeciej sekcji na jeden milimetr na sekundę, a następnie ustaw maksymalną siłę testową w drugiej sekcji na 20 niutonów, a minimalną siłę testową w czwartej sekcji na pięć niutonów. Ustaw czas trwania całości na 0,5 sekundy dla obciążenia szczytowego i 10 sekundy dla obciążenia minimalnego. Na karcie ładowania wstępnego u dołu strony upewnij się, że opcja włączone jest zaznaczona, prędkość usuwania ugięcia jest ustawiona na 100 milimetrów na minutę, a maksymalna siła to pięć niutonów.Ustaw materiał jako metal na etykiecie próbki. W menu głównym, w sekcji wyboru metody i testu, wybierz metodę, która została właśnie zbudowana i kliknij start, aby rozpocząć test. Ustaw liczbę cykli na 60.Po załadowaniu szczura należy umieścić z powrotem w klatce i utrzymywać 12-12-godzinny harmonogram działania w stanie jasno-ciemnym w klatce z wystarczającą ilością miejsca i pożywienia ad libitum, aż nadejdzie czas na analizę. Badano krótkoterminowe zmiany żywotności chondrocytów w próbkach poddanych cyklicznemu obciążeniu o sile 20 niutonów. Liczba martwych chondrocytów wzrosła po 12 godzinach od urazu.I odwrotnie, liczba żywych chondrocytów nadal spadała. Chrząstka stawowa kolan szczura, która została poddana obciążeniu dynamicznemu o sile 20 niutonów, została uszkodzona, a we wszystkich próbkach potwierdzono jedną ogniskową strefę zmiany w kłykciu bocznym kości udowej. Wielkość zmiany nie zwiększała się stopniowo w ciągu ośmiotygodniowego okresu obserwacji.W dotkniętym obszarze można było zaobserwować granicę odpowiadającą granicy między zmianą a niezmienioną chrząstką. Najważniejsze jest odpowiednie ustawienie siły testowej i ilości cykli. Dzięki tej technice można kontrolować obciążenie mechaniczne stawowego pokrycia krwi, torując drogę do zbadania, w jaki sposób obciążenie mechaniczne wpływa na rozwój lub zapobieganie chorobie zwyrodnieniowej stawów.

a-non-invasive-method-for-generating-cyclic-loading-induced-intra

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Modele zwierzęce są ważnymi narzędziami do oceny przeszczepów wytwarzanych metodą inżynierii tkankowej. W pracy przedstawiono protokół przygotowania elektroprzędzonego biodegradowalnego przeszczepu polimerowego do zastosowania w inżynierii tkankowej więzadła krzyżowego przedniego, a także protokół chirurgiczny implantacji w modelu szczurzym.

Atymiczny model szczura do oceny zmodyfikowanych przeszczepów więzadła krzyżowego przedniego

Przedstawiamy metodę oceny przestrzennego zasięgu uszkodzenia/śmierci komórek na powierzchni stawowej nienaruszonych stawów mysich po zastosowaniu kontrolowanych obciążeń mechanicznych lub uderzeń. Metoda ta może być wykorzystana do zbadania, w jaki sposób choroba zwyrodnieniowa stawów, czynniki genetyczne i/lub różne schematy obciążenia wpływają na podatność chondrocytów in situ.

Wizualizacja i analiza w czasie rzeczywistym uszkodzeń chondrocytów spowodowanych obciążeniem mechanicznym w całkowicie nienaruszonych eksplantatach chrząstki myszy

Obecny protokół opisuje kontrolowane zadrapania mikroostrza na powierzchni chrząstki stawowej po destabilizacji kolana myszy poprzez przecięcie przyśrodkowego więzadła minipiszczelowego. Ten model zwierzęcy przedstawia przyspieszoną postać choroby zwyrodnieniowej stawów (OA) odpowiednią do badania tworzenia osteofitów, osteosklerozy i bólu we wczesnym stadium.

Destabilizacja przyśrodkowego łąkotki i chrząstki rys mysiego modelu przyspieszonej choroby zwyrodnieniowej stawów

Model otwartego wpływu kłykcia kości udowej przyśrodkowej u królików jest wiarygodny do badania pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów (PTOA) i nowych strategii terapeutycznych mających na celu złagodzenie progresji PTOA. Protokół ten generuje izolowany ubytek chrząstki tylnego przyśrodkowego kłykcia kości udowej u królików za pomocą wieży zrzutowej opartej na wózku z głowicą impaktora.

Powtarzalny model wpływu chrząstki w celu wygenerowania pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów u królika

Ten protokół ustanawia model pełnogrubych wad chrząstki (FTCD) poprzez wiercenie otworów w rowku bloczkowym kości udowej szczurów i mierzenie późniejszego zachowania bólowego i zmian histopatologicznych.

Opracowanie i ocena szczurzego modelu ubytków chrząstki pełnej grubości

Nieinwazyjne uszkodzenie ACL jest niezawodną i klinicznie istotną metodą inicjowania pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów (PTOA) u myszy. Ta metoda uszkodzeń pozwala również na ilościowe określenie in vivo aktywności proteazy w stawie we wczesnych punktach po urazie przy użyciu aktywowanych proteazą sond bliskiej podczerwieni i fluorescencyjnego obrazowania odbicia.

Nieinwazyjne uszkodzenie więzadła krzyżowego przedniego (ACL) wywołane kompresją i obrazowanie in vivo aktywności proteazy u myszy

W niniejszym artykule opisujemy chirurgiczną metodę transekcji więzadła krzyżowego przedniego (ACL) jako wiarygodny model wywoływania choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego u gryzoni oraz metody pobierania płynu maziowego kolana, pomiaru obrzęku kolana i oceny ciężkości choroby zwyrodnieniowej stawów.

Przecięcie więzadła krzyżowego przedniego i płukanie płynu maziowego w modelu gryzoni w celu zbadania zapalenia stawów i pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów

Przedstawiamy tutaj zintegrowany protokół generowania kontrolowanych zmian kostnych-chondralnych u kolan owiec, aby ustanowić eksperymentalny model odpowiedni do badań regeneracji tkanek kości i chrząstki. Protokół określa metodę wywołania pełnogrubego ubytku kości kostnodzielnej w kłykciu udowym, wykorzystując techniki minimalizujące wpływ na dobrostan zwierząt oraz zmienność wyników.

Ustanowienie i ocena modelu owiec o pełnej grubości ubytku kości kościowego

Perfuzja płuc Ex-Vivo (EVLP) umożliwiła przeszczep płuc u ludzi dzięki umożliwieniu oceny narządów i rozszerzeniu puli dawców. W tym miejscu opisujemy rozwój programu EVLP dla szczurów i udoskonalenia, które pozwalają na stworzenie powtarzalnego modelu do przyszłej rozbudowy.

Metoda izolowanej perfuzji płuc ex vivo w modelu szczurzym: wnioski wyciągnięte z opracowania programu EVLP dla szczurów

Opisujemy metody długotrwałego monitorowania skuteczności terapii w leczeniu patologii jelita grubego u myszy za pomocą sztywnego endoskopu. Protokół ten może być z łatwością wykorzystany do scharakteryzowania odpowiedzi terapeutycznej pojedynczego guza u żywych myszy, a także do monitorowania potencjalnego nawrotu choroby.

Nieinwazyjna ocena skuteczności nowych terapii patologii jelitowych za pomocą seryjnego obrazowania endoskopowego żywych myszy

Poznaj nieinwazyjną metodę indukcji uszkodzenia chrząstki stawowej w kolanie szczura przy użyciu cyklicznego obciążenia 60 cyklami siłą 20 N. Ta technika umożliwia powtarzalne badanie wpływu obciążenia mechanicznego na zdrowie stawów bez interwencji chirurgicznej.

Nieinwazyjna metoda generowania modelu uszkodzenia chrząstki stawowej w kolanie szczura wywołanego cyklicznym obciążeniem

Przeglądaj więcej filmów