Cromatografia em camada fina

A cromatografia em camada fina, ou TLC, é uma técnica usada para separar compostos orgânicos com base nas diferenças em suas polaridades. Existem três componentes de um sistema TLC: a fase estacionária, o soluto e o solvente de revelação.

A fase estacionária é a superfície na qual os compostos serão separados, que geralmente é composta de sílica gel extremamente polar. Os compostos ou misturas que estão sendo analisados são os solutos. Soluções diluídas dos solutos são localizadas em uma borda da placa usando capilares finos.

O fundo da placa é então imerso no solvente de revelação, que geralmente é um solvente orgânico menos polar do que a fase estacionária. O solvente sobe pela placa por ação capilar. À medida que o solvente passa pelos pontos de soluto, ele carrega um pouco de cada soluto com ele. Esta mistura soluto-solvente é a fase móvel.

O topo da fase móvel é chamado de frente de solvente. À medida que a fase móvel sobe pela placa, as moléculas de soluto e solvente aderem temporariamente à fase estacionária com base em sua polaridade.

Mais solutos polares são fortemente atraídos para a fase estacionária, então eles grudam com mais frequência e permanecem presos por um tempo. Menos solutos polares aderem com menos frequência e não ficam presos por muito tempo. Isso significa que menos solutos polares passam mais tempo na fase móvel do que mais solutos polares. Em outras palavras, menos solutos polares viajam mais rápido do que mais solutos polares.

Para obter uma boa separação entre os compostos, o solvente deve ser polar o suficiente para mover o soluto mais polar. Aqui estão alguns solventes comuns em ordem crescente de polaridade. Às vezes, dois solventes são combinados para atingir a polaridade desejada.

Como a maioria dos compostos orgânicos são brancos ou incolores, as placas TLC geralmente contêm um composto fluorescente. Sob luz ultravioleta, os compostos orgânicos aparecerão como manchas escuras na placa brilhante.

Uma vez que os compostos são visualizados, você pode medir a distância que eles percorreram e calcular o fator de retardo, ou_{R f}, para cada um. Este valor é a distância percorrida pelo soluto dividida pela distância total percorrida pela fase móvel.

Se o solvente for escolhido corretamente, cada soluto terá um R_f distintamente diferente. Isso nos permite identificar os compostos componentes em misturas, combinando os valores de R_f com os compostos conhecidos.

Neste laboratório, você usará o TLC para determinar o R_f de vários compostos conhecidos e, em seguida, usará esses valores de R_f para determinar a identidade de um composto desconhecido.