Um sistema simples de pontuação Composite Fenótipo para avaliar modelos de ratos de ataxia cerebelar

Summary

Nós descrevemos um protocolo para a quantificação rápida e sensível da gravidade da doença em ratos de ataxia cerebelar. Medidas incluem membro posterior segurando, borda teste de marcha, e cifose. Este protocolo efetivamente discrimina entre os indivíduos afetados e não afetados, e detecta a progressão dos indivíduos afetados ao longo do tempo.

Abstract

Nós descrevemos um protocolo para a quantificação rápida e sensível da gravidade da doença em ratos de cerebelos ataxia. É derivado do fenótipo avaliações anteriormente publicados em diversos modelos de doenças, incluindo ataxias espinocerebelares, a doença de Huntington s e atrofia muscular spinobulbar. Medidas incluem membro posterior segurando, borda teste de marcha, e cifose. Cada medida é registrada em uma escala de 0-3, com um total combinado de 0-12 para todas as quatro medidas. Os resultados efetivamente discriminar entre indivíduos afetados e não afetados, ao mesmo tempo, quantificar a progressão temporal de fenótipos da doença neurodegenerativa. Medidas podem ser analisados ​​individualmente ou combinadas em uma pontuação fenótipo composto de maior poder estatístico. A combinação ideal das quatro medidas descritas dependerá do distúrbio em questão. Nós apresentamos um exemplo do protocolo utilizado para avaliar a gravidade da doença em um modelo de camundongo transgênico do tipo ataxia espinocerebelar 7 (SCA7).

Albert R. La Spada e Gwenn A. Jardim contribuíram para este manuscrito de forma igual.

Protocol

Para evitar viés, o experimentador realizar as avaliações não devem ter conhecimento do genótipo do animal. Medidas individuais são pontuados em uma escala de 0-3, com 0 representando uma ausência do fenótipo relevantes e 3 representa a manifestação mais grave. Cada teste é realizado várias vezes para garantir que a pontuação é reproduzível. A obesidade vai complicar a interpretação de todas as medidas descritas. O investigador pode querer pesar camundongos após marcar fenótipo para avaliar o possível papel de adiposidade nos resultados.

Teste Ledge

O teste de borda é uma medida direta da coordenação, que é prej....

Discussion

Este protocolo é projetado para ser uma avaliação sensível e de fácil realização da gravidade da doença em ratos de ataxia cerebelar. Componentes individuais do sistema de pontuação será mais ou menos eficaz em modelos de ratos diferentes de neurodegeneração.

Elementos deste sistema de pontuação foram efetivamente utilizados para avaliar uma variedade de modelos do rato da doença neurodegenerativa humanos, incluindo ataxias cerebelar, doença de Huntington s e atrofia muscular spinobulbar [1-.......