Waiting
Processando Login

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

أسلوب مبسط لإنتاج نموذج الجرح الدماغية

Published: May 2, 2012 doi: 10.3791/3341

Summary

قمنا بتطوير تقنية مينيملي لخلق أرنب جرح الأذن الدماغية نموذج بقسمة الشريان المركزي والأعصاب والحزمة الوعائية العصبية في الجمجمة. نفق تحت الجلد ثم يقطع كل الأنسجة تحت الجلد. هذا الإجراء يتسبب في تعطيل الحد الأدنى من الجلد ويمكن استخدامها بأمان في الحيوانات بداء السكري.

Abstract

واحد عقبة رئيسية في الأبحاث الحالية جرح السكري هو عدم وجود نموذج جرح الدماغية التي يمكن استخدامها بأمان في الحيوانات بداء السكري. قد الأدوية التي تعمل بشكل جيد في عدم نقص تروية الجروح لا تعمل في الجروح السكري الانسان بسبب اعتلال وعائي هو أحد العوامل الرئيسية التي تحول دون التئام هذه الجروح. نشرنا مقالا في عام 2007 واصفا أرنب نموذج الأذن الجروح الدماغية الناجمة عن تقنية جراحية مينيملي. منذ ذلك الحين، ونحن كذلك تبسيط الإجراءات لتسهيل عملية. في أذن واحدة، وقدمت ثلاثة شقوق صغيرة في الجلد في السويقات الأوعية الدموية، 1-2 سم من قاعدة الأذن. وكان ligated الشريان المركزي وخفض جنبا إلى جنب مع العصب. تم قطع حزمة كاملة في الجمجمة وligated، ولم يتبق سوى فرع الذيلية سليمة. وقدم نفق تحت الجلد كفافي من خلال الشقوق، لقطع الأنسجة تحت الجلد والعضلات والأعصاب، والسفن الصغيرة. تم استخدام الأذن الأخرى كعنصر تحكم غير الدماغية. وأدلى أربعة بجروح في الجانب يا بطنيو كل أذن. هذه التقنية تنتج 4 الجروح الدماغية و 4 غير الدماغية الجروح في حيوان واحد لإجراء المقارنات المقترنة. بعد الجراحة، وكان الأذن الدماغية بارد ومزرقة، وأظهرت حركة انخفاض وعدم وجود نبض في الشريان الأذن. وكانت درجة حرارة الجلد في الأذن الدماغية 1-10 درجة مئوية أقل من ذلك على الأذن طبيعي والحفاظ على هذا الفارق لأكثر من شهر واحد. وكانت الأذن محتويات الأنسجة الفوسفات عالية الطاقة أقل في الأذن من نقص تروية الأذن السيطرة. وكانت الأوقات التئام الجروح تعد في الأذن من نقص تروية في الأذن غير الدماغية عندما استخدمت نفس المعاملة. وقد تم الآن والتقنية المستخدمة في أكثر من 80 في الأرانب التي كانت 23 السكري (داء السكري بدءا من الساعة 2 أسابيع إلى 2 سنة). وقد وضعت لا أرنب واحد أي مضاعفات جراحية مثل النزيف، العدوى، أو تمزق في شقوق الجلد. هذا النموذج العديد من المزايا، مثل اضطراب الجلد قليلا، وقتا أطول الدماغية، وارتفاع معدل النجاح، وبالمقارنة مع العديد من النماذج الأخرى. كاليفورنيا أنهن استخدامها بأمان في الحيوانات مع انخفاض المقاومة، ويمكن أيضا أن يتم تعديل لتلبية متطلبات الاختبار المختلفة.

Protocol

1. تشريحي الأساس

وكانت الأذن أرنب المواد الدراسية المفضلة لعلاج الجروح منذ أوائل القرن ال 20. ويتم تزويد الأذن من ثلاثة الحزم الوعائية (المركزية، والجمجمة، والذيلية)، وحزمة المركزي هو أكبر، في حين أن السفن في حزم الجمجمة والذيلية تختلف في الحجم. أحيانا، قد تكون غائبة الشريان الذيلية. 1 جميع هذه السفن يتم التعرف بسهولة على الجانب الظهري بعد حلق الأذن (الشكل 1). على الجانب البطني، والجلد البعيدة لا يتلقى إمدادات الدم من الأوعية الدموية القريبة. الحزم السفينة الثلاثة على الأذن ظهري لها فروع عديدة أن تخترق من خلال غضروف لتوفير امدادات الدم الى الجلد البطني البعيدة (الشكل 2). في بعض الأرانب، وسفينة صغيرة جدا تحت الجلد كما يحدث في الجانب البطني، التي تمد الدم إلى ما لا يزيد على 1/3 من الجلد البطني. في شق الجلد كفافي مفتوحة، وهناك ايسنtially عدم وجود نزيف من شق بطني.

2. إجراء العمليات الجراحية

  1. يتم وزن الأرنب وحلق الأذنين، جنبا إلى جنب مع الجزء الخلفي من الرقبة.
  2. ويرد تخدير من البوبرينورفين (0.01 ملغ / كلغ) IM ساعة واحدة قبل الجراحة.
  3. هو فعل التخدير بواسطة خليط من الكيتامين (50 ملغ / كلغ)، وزيلازين (5 ملغ / كلغ) IM.
  4. محمية الأرنب مع وسادة التدفئة أثناء الجراحة، ويتم حماية العينين مع مرهم، ويتم رصد العلامات الحيوية خلال عملية جراحية.
  5. وقد أعد هذا المجال الجراحي جو معقم و مطهر مع فرك الجراحية ورايات بحيث يتعرض لها آذان اثنين.
  6. يتم تقديم أذن واحدة الدماغية، في حين أن الأذن الأخرى بمثابة سيطرة غير مقترن الدماغية.
  7. ويتم تحديد العنيقات 3 الأوعية الدموية من الشرايين والأوردة.
  8. باستخدام شفرة # 15، يتم إجراء ثلاثة شقوق عمودية صغيرة (1-1.5 سم) في العنيقات الأوعية الدموية، وحوالي 1-2 سم من قاعدة الأذن.
  9. الوريد المركزيمعزولة عن الأنسجة المحيطة بها ويتم استخدام الخيط لتطويق ذلك لتراجع. وligated الشريان المركزي مع خيوط 4-0 و المقسمة.
  10. وأيضا قطع العصب المرافق المركزية.
  11. وligated في عنيق كامل في الجمجمة، والمنقسمة على نفسها.
  12. يتم الاحتفاظ عنيق الذيلية.
  13. يتم إجراء نفق تحت الجلد من خلال الشقوق 3. يتم ذلك عن طريق تشريح حادة مع المشبك وتشريح حاد مع سكين ومقص. وتوقف كل من الأنسجة تحت الجلد والعضلات والأعصاب، وفروع الأوعية الدموية الصغيرة. وتنقسم تماما vasculatures صغير تحت الأدمة. يتم قطع جميع الأنسجة تحت الجلد على مستوى الغضروف مع النصل.
  14. وتستخدم المزيد من تشريح حادة وصريحة لتنظيف قاعدة، وترك غضروف عارية عن 5-10 مم واسعة.
  15. هذا الإجراء يقطع كل فرع من فروع الأوعية الدموية تحت الجلد لمنعهم من إقامة بسرعة الضمانات.
  16. النزيفالحد الأدنى. إذا كان هناك أي، يتم السيطرة عليها بسهولة عن طريق ضغط الشاش، من دون الحاجة إلى كاو كهربي.
  17. الجلد داخل الأذن لا يحمل الكثير من الدم، وبالتالي هو ليس قطعي.
  18. وتغلق فيه شقوق الجلد 3 باستخدام الخيوط الجراحية 4-0 أو 5-0، ومغطاة شاش معقم.
  19. نتائج الإجراء في 3 شقوق الجلد الصغيرة ويتحمل أقل من ذلك بكثير تلف الجلد من عملية جراحية مفتوحة.
  20. يتم إنشاء أربعة دائري الجروح الجلدية كامل سماكة على الجانب البطني من كل أذن مع لكمة 6 ملم الفولاذ المقاوم للصدأ. المسافة بين الجروح ما لا يقل عن 20-30 ملم. تتم إزالة الجلد داخل الجرح لكمة من الغضروف. وأيضا إزالة perichondrium، مع الجلد أو على حدة. الأساس الذي التحبيب والاندمال بتشكل النسيج الظهاري سيجري في الغضروف، ولكن ليس من غضروف مثقب (الشكل 3).
  21. عندما يتم الانتهاء من الجروح في كلتا الأذنين، يتم تطبيق اختبار المخدرات إلى جانب واحد من اثنين بجروح في حين أن مكافحة المخدرات هي APPLالعبوات الناسفة على الجراح على الجانب الآخر. يتم استخدام ضماد مسد (TegaDerm، 3M) لتغطية موقع الجرح. وهذا ما يمنع من أن تصبح الجراح المجفف.
  22. جراح في الجزء السفلي من الأذن تشفى عادة أسرع من الجروح في الجزء العلوي من الأذن. لالتئام الجروح دراسة مقارنة، فمن المستحسن للمقارنة بين جروح اثنين على جانب واحد مع جراح اثنين على الجانب الآخر، أو للمقارنة بين أعلى وأسفل الجروح بشكل منفصل.

3. بعد العملية الجراحية العناية

  1. وترفق بهذا التصحيح Duragesic على الجلد مرة أخرى للافراج عن الفنتانيل (25 ميكروغرام / ساعة) لمدة 2-3 أيام للحد من الألم ممكن.
  2. ويسمح للأرانب حرية الوصول إلى الطعام والشراب.
  3. وتجرى التغييرات التصافي يوميا. يتم إزالة الضمادات القديمة ويتم تنظيف الجروح مع قطعة قطن معقم. يتم أخذ الصور الرقمية للمقارنة. يتم تطبيق الضمادات الجديدة، ويتم تغطية الجراح مرة اخرى من قبل TegaDerm. ليس هناك حاجة إلى مخدر أثناء خلع الملابس CHفي نفس الفئة.
  4. ويتم قياس درجة حرارة الجلد يوميا في كل أذن للمقارنة.
  5. ويمكن قياس إضافية الدورة الدموية الأذن مع متر توتر الأكسجين عبر الجلد أو مقياس الجريان دوبلر الليزر.
  6. ويمكن إزالة الغرز بعد أسبوع واحد.
  7. بالنسبة لغير مرضى السكري الحيوانات، ومعظم الجروح الأذن تشفى عادة خلال 2-3 أسابيع.

4. إمكانية المضاعفات وكيفية تجنبها

هذه الجراحات هي آمنة ومضاعفات نادرة. باستثناء الانتقالية ما بعد الجراحة وذمة خفيفة الأذن، فإن أيا من الأرانب لدينا زارها أي مضاعفات شديدة الجراحية. ومع ذلك، هناك العديد من المضاعفات المحتملة لهذا الإجراء:

  1. نزيف. قد يحدث نزف بسيط في شقوق إذا الإرقاء غير كاملة أو في حالة تلف سفينة أكبر في الدم (مثل واحدة من السفن عنيق الرئيسي). يتم تجنبها بسهولة عن طريق تشريح دقيق. بالإضافة إلى حزم 3 الأوعية الدموية الرئيسية، وهناكإعادة العديد من فروع ثانوية تحت الجلد الوعائية. عندما يتم إجراء نفق تحت الجلد، ويتم قطع هذه السفن لكن لا يوجد ربط ضروري. ويمكن تحقيق الإرقاء ببساطة عن طريق الضغط على الشاش. ويتم ذلك بسهولة عن طريق إدراج هذه الزاوية من الشاش داخل النفق لمدة بضع دقائق. قبل أن يغلق شق، تأكد من عدم وجود نزيف موجودا.
  2. عدوى شق وتفزر: قد تكون هذه المضاعفات تحدث في حالة تكون ملوثة الشقوق. ويمكن تجنب ذلك عن طريق استخدام تقنية العقيم صارمة وليس هناك حاجة للمضادات الحيوية. ومع ذلك، هناك حاجة إلى إصابة إذا لم يحدث، الصرف الصحي المناسبة والتغييرات خلع الملابس.
  3. وذمة الأذن: نتيجة لعمليات ربط الأوعية الدموية واضطراب الدورة الدموية اللمفية، وذمة خفيفة الأذن قد تعرض لبضعة أيام. ومع ذلك، فإنه يختفي في حد ذاته وليس العلاج الضروري.

5. ممثل النتائج

منذ عام 2007، وقد استخدمنا هذا الإجراء في أكثر من 70 الأرانب، بما في ذلك 23 السكري 1imals. في المجموعة السكري، وأجريت عملية جراحية في أوقات مختلفة السكري: سبعة أرانب كان اسبوعين من وقت السكري، وأربعة منهم كان من شهرين، 10 وكان 12 شهرا، و 2 لديها 24 شهرا من وقت السكري.

فورا بعد الجراحة، ويبدو أن الأذن الدماغية بارد ومزرقة، مع وذمة خفيفة. الأذن أهم الشرايين في الشريان المركزي، كان له نبض قوي في الأذن العادية، ولكن هذا النبض لم يكن موجودا في الأذن الدماغية. تم تخفيض حركة الأذن، ولكن لم تختف تماما. وأظهرت الجلد المنخفضات واضحة فوق النفق، ولكن لم يتم العثور على نقص تروية أو نخر في أي حيوان (الشكل 4).

تم قياس درجات حرارة الجلد في آذان طبيعية ونقص تروية مع ميزان الحرارة الرقمي (اومرون من قبل الرعاية الصحية اومرون، بانوكبورن، IL، أو نوع K ميزان الحرارة بالأشعة تحت الحمراء بقعة من العلم فيشر، بيتسبرغ، بنسلفانيا). وتراوحت درجات الحرارة بين الاختلافات في الأذن غير الدماغية ونقص تروية 1-10 درجة مئوية، ثإيث معظم الأرانب التي تدخل في نطاق من 2-6 درجة مئوية. الشكل. 5 يبين الاختلافات متوسط ​​درجة الحرارة في الفترة من 30 الأرانب. وكان الفرق في درجة الحرارة أعلى في الأيام الأولى بعد الجراحة، وانخفضت تدريجيا بعد 15 يوما، ولكن لا تزال تحتفظ في نهاية شهر واحد.

وتم قياس محتويات الأنسجة الفوسفات عالية الطاقة في بعض الحيوانات بعد أن تم التضحية بهم. وتم أخذ عينات الأنسجة ستة من كل أذن، وجرى قياس محتويات الفوسفات عالية الطاقة بواسطة HPLC. وكانت كل من ATP وتركيزات أعلى مجموع الطاقة في آذان طبيعية مما كانت عليه في آذان الدماغية. الشكل. 6 يبين مثال على التضحية أرنب 23 يوما بعد الجراحة. وكان متوسط ​​الأنسجة محتويات ATP 0.349 ± 0.047 μMol / ز (يعني ± SD) في الأذن العادية مقابل 0.237 ± 0.059 μMol / ز في الأذن الدماغية (P <0.005). وكان يعني مجموع الطاقة (ATP ADP + + AMP) 0.882 ± 0.137 μMol / ز في الأذن العادية مقابل 0.556 ± 0.115 μMol / غ في ische هيئة التصنيع العسكري والأذن (P <0.001).

وكانت الأوقات التئام الجروح دائما وقتا أطول للالأذن من نقص تروية للأذن غير الدماغية في جميع الفئات (غير المصابين بالبول السكري أو مرض السكري). الشكل. 7 يبين مقارنة بين شفاء ما بين 26 زوجا من الجروح على آذان الدماغية وغير الدماغية. وتراوحت مرات الشفاء 13-18 يوما (المتوسط ​​14.9 ± 1.6 يوما) على آذان طبيعية مقابل 17-27 يوما (المتوسط ​​20.5 ± 3.4 يوما) على أذنيه الدماغية (P = 0.001). وكانت الأوقات التئام الجروح في الأرانب المسنين ومرضى السكري وقتا أطول، وخصوصا عندما كان وقت السكري أكثر من 12 شهرا.

في هذه الأرانب، وجميع الشقوق تلتئم عادة دون أي مضاعفات، بما في ذلك الأرانب مع 24 شهرا من وقت السكري. الشكل 8 عينة الأنسجة تبين نفق تحت الجلد تلتئم في العضلات التي تغيب ويحل محله أنسجة ليفية. ومع ذلك، فإن الجلد سليمة.

/ 3341fig1.jpg "/>
الشكل 1. يتم توفير الأذن أرنب من قبل ثلاثة الحزم الوعائية. المركزي هو أكبر، والجمجمة أصغر، وربطة الذيلية هو أصغر. وتعتبر هذه السفن بسهولة على السطح بعد أن يتم حلق الأذن.

الشكل 2
الشكل 2. وحزم السفينة ثلاثة على الدم الأذن العرض ظهري ليس فقط للجلد ظهري، ولكن أيضا على الجلد البطني من خلال اختراق السفن. السهم يظهر الأوعية اختراق من خلال الغضروف. يظهر أقحم عبور قسم من هذه السفن.

الشكل (3)
الشكل 3. يتم إنشاء أربعة 6 ملم الجراح على الجانب البطني من الأذن، ويتم أيضا إزالة perichondrium. الأساس الذي التحبيب والاندمال بتشكل النسيج الظهاري سيجري في الغضروف، ولكن ليس من غضروف مثقبة. واألصغر 3 يتم إغلاق شقوق الجلد لتر مع اضطراب الجلد ضئيل جدا.

الشكل 4
الشكل 4. بعد أن يتم إغلاق شقوق الجلد، وينظر بشكل واضح تثليم فوق النفق تحت الجلد.

الشكل 5
الشكل 5. درجة حرارة الجلد متوسط ​​الفرق بين الأذن العادية والدماغية في 30 الأرانب. ويتراوح الفرق في وقت مبكر من 7 درجات مئوية إلى 10 درجة مئوية بعد الجراحة. الفرق يتناقص تدريجيا ولكن لا تزال تحتفظ في نهاية شهر واحد.

الشكل (6)
يتم خفض الرقم 6. الأذن محتويات الأنسجة الفوسفات عالية الطاقة في الأذن الدماغية بالمقارنة مع عدم نقص تروية الأذن على 23 يوما بعد عملية جراحية (P <0.001).

41/3341fig7.jpg "/>
الشكل 7. وقت التئام الجروح أطول في آذان الدماغية من الأذنين غير الدماغية (26 الجروح لكل منهما). ويعرف الشفاء كما هو استعادة للوحدة إلى الأنسجة المصابة، أي عودة التظهرن كاملة من المواقع الجرح.

الشكل 8
الرقم 8. علم الأنسجة عينة تبين جزء الأذن التي تحتوي على نفق تحت الجلد. النسيج تلتئم هو أرق من الأذن العادية، والعضلات الهيكلية الأصلية غير موجودة، ويتم استبدال أنسجة ليفية. ومع ذلك، فإن الجلد سليمة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

ويصيب داء السكري 23600000 شخص في الولايات المتحدة، 2،3 و 15-20٪ من هؤلاء المرضى تطوير تقرحات القدم في حياتهم، 4،5 بتكلفة علاج سنوية قدرها أكثر من 25 مليار دولار. 3،6 ولكن، حتى في أفضل ما هو متاح العلاجات السبيل الوحيد لتحقيق معدل شفاء 50٪ وهذا غالبا ما يكون مؤقتا، 7 مع معدلات تكرار يصل إلى 66٪ في مرضى السكري. 3،6 وعندما يحدث تقرحات في مرضى السكري، مضاعفات كبرى مثل العدوى وزيادة بتر بشكل كبير. على الرغم من قرن تقريبا من الأبحاث المكثفة ووضع الآلاف من المنتجات خلع الملابس، وقد ثبت حتى الآن لا شيء فعال. في بيان ان "قرحة قديم في عام 1830 ستكون الأكبر قرحة في عام 1860،" صنع في إحدى الصحف تصف 1 المزمنة علاج الجرح، لا يزال ساريا اليوم. 8 العثور على نموذج حيواني المناسبة للدراسة الجرح وكان تحديا كبيرا للعلماء كما كذلك بالنسبة للأطباء. وقد تم إنشاء العديد من النماذج الحيوانيةأو مقترح لدراسة العناية بالجروح، ولكن نموذج مشابه إلى جرح بجرح مزمن غير تضميد الجراح، والإنسان هو غير موجود. 9،10 وذلك لأن كل الجروح السكري البشرية لديها مزيج من نقص تروية الأنسجة، وارتفاع السكر في الدم المزمن، والاكسدة، والاعتلال العصبي، و البكتيرية الاستعمار. قد لا يكون نقص التروية أقرب سبب تقرحات القدم السكري، ولكن هذا هو السبب الرئيسي لاستمرار وجود هذه الجروح، 11. وذلك لأن الجروح لا تلتئم في الأنسجة التي لا ينزف، في حين أنهم دائما تقريبا في شفاء الأنسجة التي ينزف على نطاق واسع. 12-15 لسوء الحظ، لم يتم حتى الآن أيا من النماذج الحيوانية جرح الدماغية المستخدمة حاليا تستخدم بنجاح في الحيوانات بداء السكري، وهذا وقد خلق عقبة رئيسية لاختبار العقاقير الجرح. وقد أظهرت التجارب السريرية على نطاق صغير من عوامل النمو، مثل bFGF، لها أن تكون فعالة للغاية، لكنها ليست فعالة في نقص الأوكسجين نماذج قرحة الجلد. 16،17

نشرنا فناICLE في عام 2007 يصف أذن الأرنب التروية نموذج الجرح الذي تم استخدامه بنجاح في الحيوانات بداء السكري. 18. هذا الاسلوب من الصعب بعض الشيء لأداء لأن هناك حاجة إلى تشريح دقيق للحزمة وعائية عصبية في الجمجمة. لأن هذه السفن الصغيرة، ومساهمتها في الانتعاش بعد العملية الجراحية لا يكاد يذكر. منذ ذلك الحين، ونحن تبسيط الإجراء الذي قطع كامل الحزمة الوعائية العصبية في الجمجمة. للمقارنة مع الإجراء الذى كان فى الحفاظ على حزمة الجمجمة، لم يكن هناك اختلاف في التئام الجروح أو مضاعفات الأذن. هذا الإجراء تعديل مينيملي والمزايا التالية: 1). انها بسيطة وآمنة، ولها نسبة نجاح عالية، مما يقلل من الألم والمعاناة للحيوانات. لم يحدث مضاعفات العمليات الجراحية في هذه الحيوانات، بما في ذلك بعض الأرانب مع 24 شهرا من وقت السكري، 2). لديه وقتا طويلا الدماغية. وأشارت قياسات لدينا فرق درجة حرارة الجلد في نهاية شهر واحد. فمن الممكن أن عشره النسيج تحت الجلد واسعة تشريح دون الحاجة إلى خياطة النتائج مرة أخرى في تشكيل النسيج الجانبية المتأخرة، 3). انها مرنة جدا. لأن حزم 3 الأوعية الدموية كلها تحت السيطرة الجراحية، ويمكن بسهولة أن يتم هذا النموذج لمحاكاة مختلف الجروح المزمنة (انظر أدناه)، 4). وخلافا للجلد في مواقع أخرى، هذه الجروح لا بصيلات الشعر في السرير الجرح. شفاء تماما من على حافة الجرح، 5). هذا الإجراء بإنشاء 4 الجروح الدماغية و 4 الجروح غير الدماغية في الأرنب نفسه للمقارنة الاقتران، وبالتالي تقليل الاختلافات الفردية؛ 6). انكماش الجلد هو الحد الأدنى. في حين أن جلد ظهري للأذن الأرنب لديه بعض الحراك، ومجبر على الجلد البطني بواسطة غضروف، مما يسمح للدراسة أكثر دقة لإعادة الاندمال بتشكل النسيج الظهاري، 19 7). الأرانب عموما خجول وعدائية. وهناك حاجة للتخدير فقط خلال عملية جراحية اصابة. وهذا يمكن الحد من أي التباس العوامل المحتملة التي قد تؤثر على عمليات التئام الجروح، 8). بل هو أيضا النسخةذ اقتصادية يمكن أن يصل إلى 8 بسبب الجروح تتم في واحدة أرنب. 9). وعلى النقيض من بعض التقارير السابقة، لم نر أي تشكيل ندبة ضخامية إما في الأرانب غير المصابين بالبول السكري أو مرض السكري لوحظ منذ أكثر من 24 شهرا بعد الجراحة. الآلية لا يزال غير واضح.

ويمكن اتخاذ العديد من الطرق لتعديل عملية لتلبية متطلبات الاختبار المختلفة. 1). مزيد من تمديد الوقت الدماغية. نتائجنا الحالية تظهر أن يتم الحفاظ على اختلاف درجة حرارة الجلد ما لا يقل عن شهر واحد. إذا تم استخدام بعض المواد الخاملة (مثل السيليكون) لملء النفق، إلى تأخير تشكيل الجانبية، يمكن تمديد الوقت الدماغية. حاولنا هذه التقنية في بعض الأرانب وجدت القليل جدا من رد فعل الأنسجة، 2). مجموع الأذن إزالة التعصيب. أسلوبنا يقطع الأعصاب في العنيقات 2 الأوعية الدموية (المركزية والجمجمة)، وترك فرع الذيلية سليمة. اذا كانت هناك حاجة مجموع إزالة التعصيب الجرح، ويمكن أيضا فرع العصبية في عنيق الذيلية وقطع ونحنليرة لبنانية، 3). اذا كانت هناك حاجة تلقيح جرح البكتيرية، ويمكن تطبيقه على الجرح. لأن قاعدة الجرح الأذن الغضروف، فمن لديه القدرة على الحصول على العدوى وثقب. لمنع المضاعفات الغضروف، ينبغي تطبيق التلقيح البكتيرى بعد يتم تغطية بواسطة غضروف النسيج الحبيبي. تجدر الإشارة إلى أن يتم بسهولة التلوث الجرثومي وأنها يمكن أن تمتد بشكل كبير من وقت الشفاء. ومع ذلك، وإنشاء بيوفيلم في الجروح الحادة هو أكثر صعوبة. استخدام المواد الطبية والتكنولوجيا للدولة من بين الفن، وقد تبين بيوفيلم التي ستنشأ في 6٪ فقط من جروح حادة، بينما في حالات الجروح المزمنة هي اعلى بعشر مرات (60٪)، و 20 لدينا التجربة أثبتت أنه عندما مرات السكري تصل إلى سنتين، يمكن أن معظم الجروح في الأذن الدماغية يصاب حتى مع تقنية العقيم صارمة. 4). قرحة الضغط وغالبا ما تحدث في المرضى الذين يعانون من تلف الأعصاب الطرفية المركزية أو بسبب فقدان الإحساس. باستخدام هذا النموذج، وهو pressuويمكن أيضا أن تنشأ قرحة اعادة بواسطة أساليب الضغط المختلفة. 21،22

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

لا يوجد تعارض في المصالح المالية المشتركة في هذه الدراسة.

Acknowledgments

وأيد هذه الدراسة في جزء من المعاهد الوطنية للصحة منح 1RO1DK74566 و1RO1AM52984. فإن الكتاب أود أن أشكر السيدة جاكلين مكارتي في المؤتمر الإقليمي لمساعدتها خلال عملية جراحية، الدكاترة. Jianpu وانغ وساروجيني Harshini لمساعدتهم في رعاية عملية جراحية وبعد العملية الجراحية لبعض الأرانب، والدكتور رونغ وان لعمل الأنسجة لها، والسيدة لى مينغ لقياسات HPLC لها ذات الطاقة العالية الفوسفات.

Materials

For monitoring during surgery

  1. A heating pad to maintain normal temperature.
  2. A transcutaneous oxygen monitor.
  3. A temperature monitor.

For surgery

  1. A #3 knife with #15 blade.
  2. Two pairs of forceps (one for skin and another for other soft tissues).
  3. 2-3 pairs of small clamps.
  4. One or two pairs of micro scissors (for tissue cutting).
  5. One pair of small scissors (for cutting sutures).
  6. A needle holder.
  7. A few stainless steel punches (for making wounds).

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. American Diabetes Association: Diabetes statistics. , American Diabetes Association. Available from: http://www.diabetes.org/diabetes-basics/diabetes-statistics (2011).
  3. Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  4. Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. The global burden of diabetic foot disease. Lancet. 366, 1719-1724 (2005).
  5. Edwards, J., Stapley, S. Debridement of diabetic foot ulcers. Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).
  6. Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds. Eplasty. 9, 169-179 (2009).
  7. Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis. Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).
  8. Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion. Lancet. 1, 1153-1156 (1980).
  9. Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue. Wound Repair. 8, 83-96 (2000).
  10. Lindblad, W. J. Animal models in wound healing research: do we need more. Wound Repair. 8, 81-82 (2000).
  11. LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus. Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).
  12. Gottrup, F. Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status. Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).
  13. Niinikoski, J. The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair. , 56-71 (2002).
  14. Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. Models to study ischemia in chronic wounds. Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).
  15. Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. The role of oxygen in wound repair. , 165-174 (1991).
  16. Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. Science, medicine and the future: healing chronic wounds. BMJ. 324, 160-163 (2002).
  17. Lindblad, W. J. Editorial: How should one study wound healing. Wound Repair. 14, 515-515 (2007).
  18. Chien, S. Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery. Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).
  19. Joseph, J., Townsend, F. J. The healing of defects in immobile skin in rabbits. Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).
  20. James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. Biofilms in chronic wounds. Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).
  21. Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe. J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).
  22. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).

Tags

الطب، العدد 63، الجرح، ونقص التروية، أرنب، مينيملي، نموذج، والسكري، علم وظائف الأعضاء
أسلوب مبسط لإنتاج نموذج الجرح الدماغية
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chien, S., Wilhelmi, B. J. AMore

Chien, S., Wilhelmi, B. J. A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model. J. Vis. Exp. (63), e3341, doi:10.3791/3341 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter