Cirurgia estereotáxica em roedores permite a administração alvo de drogas ou estimulação elétrica e gravações em despertos, comportando-se animais. Neste vídeo de apresentação iremos demonstrar recentes refinamentos processuais para este procedimento de longa data que a taxa de sobrevivência melhorou com sucesso e perda de peso reduzido pós-cirúrgico.
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Artigo de método
Cirurgia estereotáxica de roedores e animais Melhorias Resultado do Bem-Estar de Neurociência Comportamental
Neste artigo
Resumo
Resumo
Cirurgia estereotáxica para implantação de cânulas em regiões específicas do cérebro tem por muitas décadas foi uma técnica muito sucesso experimental para investigar os efeitos do neurotransmissor localmente manipulados e vias de sinalização em vigília, os animais se comportando. Além disso, a implantação estereotáxica de eletrodos para a estimulação eletrofisiológica e estudos de gravação tem sido fundamental para a nossa compreensão atual de neuroplasticidade e redes cerebrais no comportamento dos animais. Conhecimento cada vez maior sobre a otimização de técnicas cirúrgicas em roedores 1-4, conscientização pública sobre questões de bem-estar animal e legislação rigorosa (por exemplo, de 2010 a Directiva da União Europeia sobre o uso de animais de laboratório 5) nos levou a aperfeiçoar esses procedimentos cirúrgicos, particularmente com respeito a implementação de novos procedimentos para a suplementação de oxigênio e da monitorização contínua da oxigenação do sangue e os níveis de frequência cardíaca durante a cirurgia, bem comointrodução de um protocolo padronizado para atendimento pós-cirúrgico. Nossas observações indicam que essas modificações resultaram em uma taxa de aumento da sobrevida e uma melhora na condição geral dos animais após a cirurgia (por exemplo, perda de peso menor e um animal mais ativo). Esta apresentação de vídeo vai mostrar os procedimentos gerais envolvidos neste tipo de cirurgia estereotáxica com especial atenção para o nosso várias modificações. Vamos ilustrar esses procedimentos cirúrgicos em ratos, mas também é possível realizar este tipo de cirurgia em ratos ou outros animais de laboratório pequenos usando adaptadores especiais para o aparelho estereotáxico 6.
Protocolo
Nota: técnicas de anti-séptico deve ser empregado durante todo o procedimento. Todos os instrumentos e materiais (cotonetes, gazes, etc) que serão utilizados durante a cirurgia deve ser esterilizado em autoclave. A máscara cirúrgica, gorro cabelo e luvas estéreis devem ser usados. A área de trabalho e do aparelho estereotáxico deve ser cuidadosamente limpos e desinfetados com uma solução de etanol 70%.
1. Procedimentos pré-cirúrgicos
- Configurar o aparelho estereotáxico e todos os materiais necessários. Pré-aquecer a almofada de aquecimento.
- Coloque a cânula em seu apoio e verificar se ele é reto.
- Ligue o sis....
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Discussão
O principal objectivo desta apresentação de vídeo é familiarizar os neurocientistas comportamentais com os princípios básicos da cirurgia estereotáxica. Pesquisadores que já estão realizando a cirurgia estereotáxica pode também beneficiar deste vídeo e considerar alguns dos refinamentos processuais para o uso em seu próprio laboratório. Um conhecimento cada vez maior sobre a otimização de técnicas cirúrgicas 1-3, o desenvolvimento de novos anestésicos e analgésicos para uso em medicina humana e veterinária
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Os autores agradecem Gerrits Dr. Peter para os desenhos usados no vídeo.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Nome do reagente | Companhia | ||
| Álcool a 70% | VWR | ||
| Antisedan (atipamezole) | Orion | ||
| Sulfato de atropina 0,5 | Pharmachemie BV | ||
| Bulldog pinça hemostática | Aesculap | ||
| Cânulas | Component Supply Co. | ||
| Clorexidina 0,5% | AppepPharma | ||
| Limpeza em pó | Alconox | ||
| Varas de algodão | Hartmann BV | ||
| Dexdomitor (dexmedetomidina) | Orion | ||
| Broca | Dremel 8000 | ||
| Duratears Z | Alcon | ||
| Durogrip Naaldvoerder conversar 130 milímetros | Aesculap | ||
| Durotip Fijne schaar ret.sp / st 110 milímetros | Aesculap | ||
| Gaze | Medicomp (5x5) | ||
| Almofada de aquecimento | Harvard Apparatus | ||
| Pinos de insetos (estiletes) | Entosphinx (Czech Republik) | ||
| Ketamina 10% (ketamina) | Alfasan | ||
| Micro-Halsted ponta reta | Aesculap vet- | ||
| Molinea | Hartmann BV | ||
| NaCl 0,9% | Baxter | ||
| Agulhas (25G) | Terumo | ||
| Oxímetro | Edan Instruments, Inc. | ||
| Pentobarbital | Farmácia da UMCG | ||
| Rimadyl | Pfizer | ||
| Lâmina de bisturi n º 23 | Swann Morton | ||
| NR Scalpelholder. 4 133 milímetros | Aesculap | ||
| Chave de fenda | Loja Hardware convencionais | ||
| Simplex rápida (cimento dental) | Kemdent | ||
| Parafusos crânio | Component Supply Co. | ||
| Espátula | VWR | ||
| Spongestan especiais | Johnson & Johnson | ||
| Stereotacts | Kopf Instruments | ||
| Pinça cirúrgica 100 milímetros | Aesculap | ||
| Material de sutura Safil 5 / 0 | Aesculap | ||
| Seringa de 10 ml | Omnifix | ||
| Seringa de 1ml | Terumo | ||
| 5ml da seringa | Omnifix | ||
| Xilocaína (lidocaína / adrenalina) | Astra Zeneca |
Referências
- Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. , Methuen, London. (1959).
- Richardson, C. A., Flecknell, P. A. Anaesthesia and post-operative analgesia following experimental surgery in laboratory rodents: are we making progress? ....
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Reimpressões e permissões
