Artigo de método
Íleo pós-operatório (POI) é uma complicação da cirurgia abdominal levando a um aumento da morbidade e permanência hospitalar prolongada. Porque estratégias profiláticas e terapêuticas faltam pesquisa intensificada é necessário. Por isso, estabeleceu um modelo de mouse padronizada e viável para o entendimento da fisiopatologia POI e estudar potenciais opções terapêuticas.
Inflamação do tracto gastrointestinal é um motivo comum para uma grande variedade de doenças humanas. Modelos de pesquisa com animais são fundamentais na investigação do complexo celular e molecular da patologia intestinal. Embora a túnica mucosa é frequentemente o órgão de interesse em muitas doenças inflamatórias, trabalhos recentes demonstraram que a muscularis externa (ME) também é um órgão altamente imunocompetente que abriga uma densa rede de imunócitos residentes. 1,2 Estes trabalhos foram realizados dentro do padronizada modelo de manipulação intestinal (GI) que conduz à inflamação da parede do intestino, principalmente limitada à ME. Clinicamente isto leva a inflamação dismotilidade intestinal prolongada, conhecido como íleo pós-operatório (POI) que é uma complicação frequente e inevitável após cirurgia abdominal. 3 A inflamação é caracterizada pela libertação de mediadores pró-inflamatórios tais como IL-6, 4 ou IL-1β neurotransmissores ou inibitória como Nitric óxido (NO). 5 Posteriormente, os números enormes de imunócitos extravasate no ME, dominado por neutrófilos (PMN) e monócitos e, finalmente, manter POI. 2 com duração de dias, esta paralisia intestinal leva a um aumento do risco de aspiração, a translocação bacteriana infecciosas e complicações até sepsis e falência de órgãos múltiplos e causa um grande fardo econômico. 6
Neste artigo, demonstramos o modelo padronizado de mensagens instantâneas e avaliação in vivo do trânsito gastrointestinal (TGI) e colônico. Além disso, demonstramos um método para a separação do ME da túnica mucosa seguida de análise imunológica, que é crucial para distinguir entre as respostas inflamatórias nestes dois compartimentos de parede altamente Imunoactivas intestinais. Todas as análises são facilmente transferíveis para todos os modelos de outras pesquisas, afetando a função gastrointestinal.
1. Animais
Machos C57BL6 / J ratos com um peso médio de 25 g foram obtidos de Harlan Winkelmann (Borchen, Alemanha). Todos os experimentos foram realizados em conformidade com a lei federal sobre a protecção dos animais. Os princípios de cuidados com animais de laboratório foram seguidas. Os animais foram mantidos com uma luz de 12 h / ciclo escuro e desde com comercialmente disponível para roedores e água da torneira ad libitum. Os animais devem ser alojados pelo menos 7 dias após a chegada a sua instalação para animais antes de experimentos. Note-se que todas as experiências pode ser facilmente adaptada a ratos ou outras espé....
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Um estudo comparativo analisando diferentes níveis de IM (eventração intestino delgado por 10 min versus suavemente inspeção do intestino delgado através de dois aplicadores de algodão contra o IM com a evacuação do conteúdo do intestino delgado para o ceco) revelou uma correlação entre a extensão da manipulação cirúrgica e POI. Em comparação com os outros grupos IM apresentaram maior quantidade de leucócitos no ME (PNMS, macrófagos e mastócitos), resultando em POI prolongada e severa. 8.
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Não há conflitos de interesse declarados.
Este trabalho foi financiado por doações do Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) e BONFOR (O-112,0040).
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Nome do reagente / Equipamentos | Companhia | Número de catálogo | |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H | |
| Aplicadores de algodão | Mutilados | 71010 | |
| cateter arterial | Vygon | 115-798 | |
| Placa de 96 poços (preto) | Greiner Bio One | 655096 | |
| bola de vidro (2 mm de diâmetro) | Worf | disponível a pedido | |
| Pinos de insetos | Belas Science Tools | 26000-25 | |
| Hanker Reagente Yates | Polyscience | 560694 | |
| Aquatek | Merck | HC109850 | |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F | |
| FITC-dextrano (PM 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500 mg-F |
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