Localização, identificação e excisão de Depots Murino adiposo

Resumo

Devido à conexão drástica e negativa entre a obesidade e outras comorbidades, a investigação sobre o papel adiposo desempenha na doença e na saúde global é garantido. Apresenta-se um protocolo para o isolamento e a excisão de depósitos adiposos que permitam o estudo de tecido adiposo usando in situ e in vitro.

Resumo

A obesidade aumentou dramaticamente nas últimas décadas e afeta mais de um terço da população adulta dos EUA. O efeito econômico da obesidade em 2005 atingiu uma soma impressionante de US $ 190,2 bilhões apenas em custos médicos diretos. A obesidade é um importante fator de risco para uma ampla gama de doenças. Historicamente, pouco se sabia sobre o tecido adiposo e suas principais e essenciais funções no organismo. O tecido adiposo marrom e branco são os dois principais tipos de tecido adiposo, mas a literatura atual identificou um novo tipo de gordura chamada gordura brite ou bege. A pesquisa mostrou que os depósitos adiposos têm perfis metabólicos específicos e certos depósitos permitem uma propensão à obesidade e outros distúrbios relacionados. O objetivo deste protocolo é fornecer aos pesquisadores a capacidade de identificar e extirpar depósitos adiposos que permitirão a análise de diferentes efeitos fatoriais sobre o tecido adiposo; bem como o papel benéfico ou prejudicial que o tecido adiposo desempenha na doença e na saúde geral. O isolamento e a excisão dos depósitos adiposos permitem que os investigadores observem as alterações morfológicas macroscópicas, bem como as alterações histológicas. O isolado adiposo também pode ser usado para estudos moleculares para avaliar alterações transcricionais e translacionais ou para experimentação in vitro para descobrir alvos de interesse e mecanismos de ação. Esta técnica é superior a outras técnicas publicadas devido ao design que permite o isolamento de vários depósitos com simplicidade e contaminação mínima.

Introdução

Adiposo fez uma aparição notável nos holofotes da mídia, devido ao aumento dramático da obesidade durante as últimas décadas do século 20. Obesidade afeta atualmente mais de um terço dos adultos e 17% das crianças e adolescentes nos Estados Unidos (EUA) ^1. Abrangendo todos os grupos étnicos, a pesquisa estatística em torno da epidemia de obesidade tem mostrado que os negros não-hispânicos têm a maior taxa ajustada por idade de obesidade (49,5%) em comparação com os mexicanos-americanos (40,4%), todos os hispânicos (39,1%) e não- hispânicos (34,3%) ^2. O efeito econômico da obesidade também é uma preocupação crescente para o sistema de saúde. Em 2....

Protocolo

NOTA: Todos os procedimentos com animais foram realizados com a aprovação do Comitê de Cuidados e Uso Animal Institucional (IACUC) da Universidade de Cincinnati, e de acordo com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório do National Institutes of Health (NIH Publication Nenhum . 85-23, revista em 1996).

1. Eutanásia e esterilizar o mouse

1. Posicione o mouse em um dropbox contendo uma dose supratheraputic de isoflurano e permitir a inalar para o efeito. Uma vez que o rato é sacrificado, retirar da caixa.
2. Cervicalmente deslocar como um segundo meio de eutanásia.
3. Esteriliza-se a superfície externa do r....

Resultados

Identificação e localização de tecido adiposo subcutâneo inguinal, adiposo castanho interescapular, adiposo epididimal visceral (Figura 1), bem como o tecido adiposo arco aórtico perivascular, adiposo da aorta torácica, adiposo supra-renal da aorta e do tecido adiposo da aorta infra-renal (Figura 2) foi alcançada com sucesso usando o método cirúrgico descrito. O exame histológico e diferenciação entre amostras MTD e Wat foram avaliados positivamente com Hematoxilina e Eosina (H & E).......

Discussão

A obesidade pode levar a uma grande série de morbidades e o pleno entendimento do papel que desempenha adiposo não é totalmente compreendido; Por conseguinte, continua a pesquisa no campo da adiposo é necessário. Os modelos animais, especificamente modelos murinos são ideais para a pesquisa inicial na progressão de doenças e ensaios de tratamentos farmacêuticos potenciais. Na utilização destes modelos, o isolamento e a excisão precisa de depósitos de tecido adiposo é uma ferramenta extremamente importante e necessário n.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Isoflurano	Med-Vet International	#RXISO-250
70% Etanol	Fisher	07-678-001
DMEF-12	Sigma Aldrich	D-6421	Aqueça em banho-maria antes de colocar o lenço de papel.
Tubos de microcentrífuga de 2 ml	Midsci	MCT-200-CS
Solução salina tamponada com fosfato	Sigma Aldrich	P5368-10PAK