O objetivo deste protocolo é aplicar ressonância magnética com contraste dinâmico (DCE-MRI) para xenoenxertos de tumores pancreáticos ortotópicos em camundongos. A DCE-MRI é um método não invasivo para analisar a microvasculatura em um tecido-alvo e útil para avaliar a resposta vascular em um tumor após uma nova terapia.
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Artigo de método
Contraste Dinâmico aprimorada Ressonância Magnética de um Modelo de câncer de pâncreas Orthotopic Rato
Neste artigo
Resumo
Resumo
A ressonância magnética com contraste dinâmico (DCE-MRI) tem sido limitada Os modelos de tumores ortotópicos oferecem vantagens sobre os subcutâneos, pois podem refletir o microambiente do tumor primário que afeta o suprimento sanguíneo, a neovascularização e a invasão de células tumorais. Recentemente, estabelecemos um protocolo de DCE-MRI de xenoenxertos de tumores pancreáticos ortotópicos em modelos de camundongos, protegendo os tumores com uma placa plástica ortogonalmente dobrada para evitar a transferência de movimento da região torácica durante a imagem. A pressão por esta prancha foi localizada na região abdominal, e não resultou em dificuldade respiratória dos animais. Este artigo demonstra o procedimento detalhado de modelagem ortotópica de tumores pancreáticos usando pequenos animais e DCE-MRI dos xenoenxertos tumorais. O método de quantificação de parâmetros farmacocinéticos em DCE-MRI também é introduzido. O procedimento descrito neste artigo ajudará os investigadores a aplicar DCE-MRI para modelos ortotópicos de camundongos com câncer gastrointestinal.
Introdução
O objetivo geral deste método é a aplicação de contraste dinâmico aprimorado ressonância magnética (DCE-MRI) para ortotópicos xenografts tumor pancreático em camundongos. DCE-MRI é um método não-invasivo de avaliação da microvasculatura num tecido alvo por monitorização da alteração de contraste MR ao longo de um certo período de tempo após a injecção. DCE-MRI tem sido utilizada para diagnóstico de tumores malignos e para avaliar a resposta do tumor a várias terapias 1-4. Quantitative DCE-MRI apresentou alta reprodutibilidade 5. Para quantificar os parâmetros farmacocinéticos de um agente de contraste MR em um tecido alvo, todas as imagens DCE-M....
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Protocolo
Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal Institucional da Universidade do Alabama, em Birmingham.
1. Orthotopic pâncreas Tumor Rato Modeling
- Linhas de padrão de cultura de células humanas do pâncreas-cancro em meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado com 10% de soro fetal bovino. Mantenha todas as culturas a 37 ° C em atmosfera humidificada com 5% de CO 2.
- Use 8-10 semanas de idade, do sexo feminino graves ratos imunodeficientes combinados. Coloque as gaiolas dos animais em 12 horas de luz e escuridão ciclo de 12 horas à temperatura ambiente (21 ± 2 ° C) e ....
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Resultados
As células tumorais pancreáticas humanas crescer com sucesso em pâncreas de rato criando um tumor sólido. A Figura 1 apresenta fotografias de (A) um pâncreas normal onde a solução da célula de tumor é injectada, e (B) um ratinho representativo tendo um xenoenxerto de tumor pancreático ortotópico (MIA PaCa-2 ). Tumor está localizado no quadrante superior esquerdo do abdómen, ao lado do baço. Ele normalmente leva 2-4 semanas para que os tumores a crescer até 5-7 mm de diâmetro após o implante de células. .......
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Discussão
Nós introduzimos os métodos detalhados de modelagem de tumor pancreático orthotopic usando ratos imunodeficientes, DCE-MRI de tumores abdominais em ratos, e quantificação de seus parâmetros cinéticos. Na modelagem de tumor pancreático orthotopic, é preciso ter cuidado ao inserir uma agulha na cauda do pâncreas. Se for bem sucedido, as células serão transferidos para a cabeça do pâncreas criando uma pequena bolha. Ao aplicar-se uma placa de plástico orthogonally dobrado, é fundamental para confirmar que o tumor está loca.......
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Divulgações
Os autores não têm conflitos de interesse a declarar.
Agradecimentos
Os autores agradecem a Jeffrey Sellers por ajudar na modelagem ortotópica de camundongos com câncer de pâncreas. Este trabalho foi apoiado por Research Initiative Pilot Awards do Departamento de Radiologia da UAB e NIH concede 2P30CA013148 e P50CA101955.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | 11965-118 | |
| Soro bovino fetal | Harlan Laboratories | BT-9501 | |
| Betadine | Purdue produtos | 67618-153-01 | |
| 5-0 Suturas de Prolene | Ethicon | 8720H | |
| 9.4T MR scanner | Bruker Biospin Corporation | BioSpec 94/20 USR | |
| Gadoteridol | Bracco Diagnostics Inc | NDC 0270-1111-03 | |
| Tubo de micro-polietileno | Strategic Applications, Inc | #PE-10-25 | |
| Agulha de ponta romba de 30 G | Strategic Applications, Inc | 89134-194 | |
| Sistema de monitoramento e gating | SA instruments, Inc | Modelo 1030 | Este é um sistema compatível com MR para medir a classificação corretiva e a temperatura corporal de pequenos animais ao mesmo tempo. |
| Bomba de seringa | New Era Pump Systems, Inc. | NE-1600 |
Referências
- Ergul, N., et al. Assessment of multifocality and axillary nodal involvement in early-stage breast cancer patients using 18F-FDG PET/CT compared to contrast-enhanced and diffusion-weighted magnetic resonance imaging and sentinel node biopsy. Acta Radiol. , (2014).
- Park, J. J., et al.
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Reimpressões e permissões
