Artigo de método

Precauções de segurança e Procedimentos Operacionais em um (A) BSL-4 laboratoriais: 3. aerobiologia

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DOI:

10.3791/53602

3 de outubro de 2016

Neste artigo

Resumo

Como patógenos de alta consequência podem potencialmente infectar indivíduos por meio de partículas transportadas pelo ar, a aerobiologia tem sido cada vez mais aplicada na pesquisa de patogênese e no desenvolvimento de contramedidas médicas. Apresentamos uma demonstração visual detalhada dos procedimentos aerobiológicos durante um desafio de aerossol em primatas não humanos em um ambiente de contenção máxima de nível 4 de biossegurança animal.

Resumo

Estudos de aerossóis ou inalações de patógenos de alta consequência têm aumentado recentemente em número devido à ameaça percebida de liberações intencionais de aerossóis ou transmissão inesperada de aerossóis naturais. Laboratórios específicos projetados para realizar esses experimentos exigem tremendos controles de engenharia para fornecer um ambiente de trabalho seguro e manutenção constante dos sistemas para sustentar a funcionalidade. Os armários de biossegurança classe III, também conhecidos como porta-luvas, são gabinetes à prova de gás com janelas que não abrem. Esses gabinetes são mantidos sob pressão negativa por sistemas de exaustão duplos com filtro de ar particulado de alta eficiência (HEPA) e são a contenção primária ideal para abrigar equipamentos de aerossolização. Um fluxo de trabalho bem planejado entre os membros da equipe em alta contenção, por exemplo, de um laboratório de trajes de nível 4 de biossegurança animal (ABSL-4) para o laboratório de gabinete ABSL-4 é um componente crucial para uma experimentação bem-sucedida. Para uma execução tranquila do estudo, estabelecer uma rede de comunicação, mover equipamentos e sujeitos e configurar e colocar equipamentos exige que os membros da equipe planejem meticulosamente os procedimentos antes do início do estudo. Aqui, fornecemos uma visão geral e uma representação visual de como a pesquisa em aerobiologia é conduzida nos Institutos Nacionais de Saúde, Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas Centro de Pesquisa Integrada em Fort Detrick, Maryland, EUA, dentro de um ambiente ABSL-4.

Introdução

Transmissão de vírus ocorre geralmente por doenças direta ou contato físico, mas muitos importantes virais (por exemplo, sarampo, varicela, gripe) são causadas por patógenos que são transmitidos por aerossol ou gotículas respiratórias. Tais patógenos têm o potencial de causar uma pandemia com consequências que vão desde a doença leve generalizada associada à perda de trabalho (por exemplo, o frio comum) para mais rara doença grave com alta letalidade (por exemplo, a varíola). Patógenos de alta-consequência que se espalham naturalmente por aerossol ou por libertação de aerossol intencional (armas biológicas) são de particular interesse para ....

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Protocolo

Este protocolo segue as seguintes orientações de cuidados de animais. Os animais foram alojados em uma instalação credenciada pela Associação de Avaliação e Acreditação do Laboratório de Animal Care International. Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas, da Divisão de Investigação Clínica, Animal Care e do Comitê Use e estavam em conformidade com os regulamentos Animal Welfare Act, política de Serviço de Saúde Pública, e o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de laboratório recomendações.

1. Aerobiologia: Biossegurança animal Nível 4 (NBA-4) Laboratory Suit

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Resultados

A Classe III cabine de segurança biológica (BSC) é um armário de aço inoxidável hermeticamente selada que contém um ambiente NBA-4 sob pressão negativa dentro de um laboratório gabinete NBA-4 (Figura 1). Os materiais podem ser introduzidos no BSC pelo pessoal que trabalha no laboratório gabinete NBA-4 através de um tanque de aço inoxidável sob-armário montado (comumente referido como um "tanque d'água" na NBA-4 ou BSL-4 definições) contendo a 5 dupla de amó.......

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Discussão

Nós delinear os procedimentos aerobiologia utilizados na IRF-Frederick para trabalhar com altamente perigosos (Grupo de Risco 4) patógenos. Uma finalidade de visualizar os procedimentos biolicas de aerosss é enfatizar a segurança do pessoal ao usar um BSC Classe III durante a experimentação com esses patógenos para evitar infecções adquiridas em laboratório. BSCs Classe III manter um fluxo de ar para dentro direccional que esgota em filtros HEPA duplos para garantir que os agentes patogênicos são contidos dentro do labo.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

O conteúdo desta publicação não reflete necessariamente as opiniões ou políticas do Departamento de Saúde e Serviços Humanos dos EUA (DHHS) ou das instituições e empresas afiliadas aos autores. Este trabalho foi financiado em parte pelo contrato principal do Battelle Memorial Institute com o Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas dos EUA (NIAID) sob o Contrato No. HHSN272200700016I. J.K.B., K.J., M.R.H., D.P., L.B. e J.W. realizaram este trabalho como funcionários do Battelle Memorial Institute. Os subcontratados do Battelle Memorial Institute que realizaram este trabalho são: J.H.K., funcionário da Tunnell Government Services, Inc.; e M.G.L., funcionário....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Micro-Chem PlusNational Chemical Laboratories255
Etanol Fisher
ParaformaldeídoSigma-Aldrich441244
Classe III BSCGermfreeDGB-10
Luvas BSC integradasPiercan10UY2032-9
Plataforma de gerenciamento de aerossóis (AeroMP)Biaera TechnologiesNA
Pletismografia head-outBuxco/Data Sciences InternationalNA
Pletismografia indutiva repritóriaData Sciences InternationalNA
Gerador de aerossol tangencial de fluxo centrado (CenTAG)CH TechnologiesNA
Nebulizador CollisonBGI Inc. CN25
AutoclaveGetingeGEB 2404 AMB-2
Sperian terno de pressão positivaHoneywell Safety ProductsBSL 4-2
Luvas de terno externo (látex, Ansell Canners and Handlers)Fisher19-019-601
Luvas de terno externo (nitrilo/borracha, MAPA)Fisher2MYU1
ScrubsCintas60975/60976
MeiasCintas944
Fita adesivaPack-N-Tape51131069695
ToalhasCintas2720
O-ringsO-ring warehouseAS568-343
Tapas honográficasAmazonB0034KZE22
Lubrificante com zíperAmazonB000GKBEJA
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Referências

  1. Alibek, K., Handelman, S. The chilling true story of the largest covert biological weapons program in the world-told from inside by the man who ran it. , Random House. New York, NY. (1999).
  2. Roy, C. J., Pitt, L. M. Infectious disease aerobiology: aerosol challenge methods. Biodefens....

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