Célula inteira correntes induzidas pela aplicação de Puff de GABA no cérebro fatias

Yangjian Feng; Binliang Tang; Ming Chen; Li Yang

doi:10.3791/56387

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Artigo de método

Célula inteira correntes induzidas pela aplicação de Puff de GABA no cérebro fatias

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DOI:

10.3791/56387

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12 de outubro de 2017

Yangjian Feng^*¹^,² , Binliang Tang^*¹^,² , Ming Chen² , Li Yang¹^,³^,⁴^,⁵

¹School of Psychology, South China Normal University, ²School of Life Sciences, South China Normal University, ³Brain Science Institute, South China Normal University, ⁴Center for Studies of Psychological Application, South China Normal University, ⁵Guangdong Key Laboratory of Mental Health and Cognitive Science, South China Normal University

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Descrevemos a técnica de sopro, pelo qual reagentes farmacológicos podem ser administrados durante a gravação de células inteiras remendo-braçadeira e destacam vários aspectos dos recursos que são cruciais para seu sucesso.

Resumo

Administração farmacológica é comumente usada quando conduzindo a célula inteira remendo-braçadeira gravação em fatias de cérebro. Um dos melhores métodos de aplicação da droga durante a gravação eletrofisiológica é a técnica de sopro, que pode ser usada para estudar o efeito dos reagentes farmacológicos na actividade neuronal em fatias de cérebro. A maior vantagem do aplicativo de sopro é que a concentração do fármaco em torno do local de gravação aumenta rapidamente, evitando assim a dessensibilização de receptores de membrana. Envolve a utilização bem sucedida da aplicação de sopro cuidadosa atenção aos seguintes elementos: a concentração da droga, os parâmetros da micropipeta de sopro, a distância entre a ponta de uma micropipeta de sopro e o neurônio gravada e a duração e pressão dirigindo o puff (libras por polegada quadrada, psi). Este artigo descreve um procedimento passo a passo para a gravação de células inteiras correntes induzidas pelo ácido gama - aminobutírico (GABA) para um neurônio de uma fatia de cortical pré-frontal de sopro. Notavelmente, o mesmo procedimento pode ser aplicado com pequenas modificações para outras áreas do cérebro como o hipocampo e o corpo estriado e diferentes preparações, tais como culturas de células.

Introdução

A técnica da remendo-braçadeira, uma ferramenta principal para investigar sinais elétricos nos neurônios, foi desenvolvida na década de 1970,¹^,². Uma grande vantagem desta técnica é que ele fornece conhecimento sobre tratamentos específicos como (por exemplo, farmacológico) podem alterar funções neuronais ou canais em tempo real³. Avaliação farmacológica da função neuronal durante a gravação em uma fatia do cérebro células inteiras requer a aplicação de drogas, tais como agonistas ou antagonistas dos receptores específicos, para os neurônios sendo gravada. Este método permite a identifi....