Avaliação da Atividade Antitumoral In vivo de Nanopartículas de Polianidrido IL-1α

M. M. Hasibuzzaman; Kathleen A. Ross; Aliasger K. Salem; Balaji Narasimhan; Andrean L. Simons

doi:10.3791/62683

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Avaliação da Atividade Antitumoral In vivo de Nanopartículas de Polianidrido IL-1α

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DOI:

10.3791/62683

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28 de junho de 2021

M. M. Hasibuzzaman¹^,² , Kathleen A. Ross³^,⁴ , Aliasger K. Salem¹^,⁴^,⁵^,⁶ , Balaji Narasimhan³^,⁴ , Andrean L. Simons¹^,²^,³^,⁵^,⁶^,⁷

¹Interdisciplinary Graduate Program in Human Toxicology, University of Iowa, ²Department of Pathology, University of Iowa, ³Department of Chemical and Biological Engineering, College of Engineering, Iowa State University, ⁴Nanovaccine Institute, Iowa State University, ⁵Division of Pharmaceutics and Translational Therapeutics, College of Pharmacy, University of Iowa, ⁶Holden Comprehensive Cancer Center, University of Iowa, ⁷Department of Oral Pathology, Radiology and Medicine, College of Dentistry, University of Iowa

Neste artigo

Resumo

Um protocolo padrão é descrito para estudar a atividade antitumoral e a toxicidade associada da IL-1α em um modelo singênico de camundongo de HNSCC.

Resumo

A terapia com citocinas é uma estratégia imunoterapêutica promissora que pode produzir respostas imunes antitumorais robustas em pacientes com câncer. A citocina pró-inflamatória interleucina-1 alfa (IL-1α) tem sido avaliada como agente anticancerígeno em vários estudos pré-clínicos e clínicos. No entanto, toxicidades limitantes da dose, incluindo sintomas semelhantes aos da gripe e hipotensão, diminuíram o entusiasmo por essa estratégia terapêutica. A entrega de IL-1α baseada em nanopartículas de polianidrido (NP) representaria uma abordagem eficaz neste contexto, uma vez que isso pode permitir uma liberação lenta e controlada de IL-1α sistemicamente, reduzindo os efeitos colaterais tóxicos. Aqui é descrita uma análise da atividade antitumoral de NPs de polianidrido carregados de IL-1α em um modelo singênico de camundongo com carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço (HNSCC). Células epiteliais orofaríngeas murinas expressando de forma estável HPV16 E6/E7 juntamente com células hRAS e luciferase (mEERL) foram injetadas por via subcutânea no flanco direito de camundongos C57BL/6J. Uma vez que os tumores atingiram 3-4 mm em qualquer direção, uma formulação de nanopartículas de 1,5% IL-1a - carregado 20:80 1,8-bis(p-carboxifenoxi)-3,6-dioxaoctano:1,6-bis(p-carboxifenoxi)hexano (CPTEG: CPH) (CPH) foi administrado a camundongos por via intraperitoneal. O tamanho do tumor e o peso corporal foram medidos continuamente até que o tamanho do tumor ou a perda de peso atingissem os critérios de eutanásia. Amostras de sangue foram coletadas para avaliar as respostas imunes antitumorais por punção venosa submandibular, e citocinas inflamatórias foram medidas por meio de ensaios multiplex de citocinas. Os linfonodos tumorais e inguinais foram ressecados e homogeneizados em uma suspensão unicelular para analisar várias células imunes através da citometria de fluxo multicolorida. Esses métodos padrão permitirão que os pesquisadores estudem a resposta imune antitumoral e o mecanismo potencial de NPs imunoestimulatórios e outros agentes de imunoterapia para o tratamento do câncer.

Introdução

Uma das áreas emergentes da imunoterapia contra o câncer é o uso de citocinas inflamatórias para ativar o sistema imunológico dos pacientes contra suas células tumorais. Várias citocinas pró-inflamatórias (ou seja, interferon-alfa (IFNα), interleucina-2 (IL-2) e interleucina-1 (IL-1)) podem montar imunidade antitumoral significativa, o que gerou interesse em explorar as propriedades antitumorais, bem como a segurança de medicamentos à base de citocinas. A interleucina-1 alfa (IL-1α), em particular, é uma citocina pró-inflamatória conhecida como citocina mestra da inflamação¹. Desde a descoberta dessa citocina no final da década de 1970, ela tem....