Veia Caudal e Punção Peniana Modificadas para Coleta de Sangue no Modelo de Rato

Laura Charlès; Thomas Agius; Irina Filz von Reiterdank; Janna Hagedorn; Yanis Berkane; Hyshem H. Lancia; Basak E. Uygun; Korkut Uygun; Curtis L. Cetrulo Jr.; Mark A. Randolph; Alexandre  G. Lellouch

doi:10.3791/65513

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Artigo de método

Veia Caudal e Punção Peniana Modificadas para Coleta de Sangue no Modelo de Rato

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DOI:

10.3791/65513

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30 de junho de 2023

Laura Charlès¹^,²^,³ , Thomas Agius^*⁴^,⁵ , Irina Filz von Reiterdank^*¹^,²^,³^,⁶ , Janna Hagedorn¹^,²^,³ , Yanis Berkane¹^,²^,³^,⁷ , Hyshem H. Lancia¹^,²^,³ , Basak E. Uygun²^,³^,⁸ , Korkut Uygun²^,³^,⁸ , Curtis L. Cetrulo Jr.¹^,²^,³^,⁹ , Mark A. Randolph¹^,²^,³^,⁹ , Alexandre G. Lellouch¹^,²^,³^,⁸

¹Vascularized Composite Allotransplantation Laboratory, Massachusetts General Hospital, ²Harvard Medical School, ³Shriners Children’s Boston, ⁴Center for Engineering in Medicine and Surgery, Massachusetts General Hospital, ⁵Department of Vascular Surgery, Centre Hospitalier Universitaire Vaudois and University of Lausanne, ⁶Department of Plastic, Reconstructive and Hand Surgery, University Medical Center Utrecht, ⁷Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, Rennes University Hospital Center (CHU de Rennes), Rennes 1 University, ⁸Center for Engineering in Medicine and Surgery, Massachusetts General Hospital, ⁹Plastic Surgery Research Laboratory, Massachusetts General Hospital

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Aqui, apresentamos um protocolo para oferecer alternativas rápidas, fáceis e confiáveis de coleta de sangue para o modelo de rato. Descrevemos três diferentes métodos de coleta de sangue de acordo com o contexto: punção da veia caudal sob anestesia ou em um animal consciente e punção da veia peniana dorsal sob anestesia.

Resumo

Amostras de sangue são necessárias na maioria dos desenhos experimentais em animais para avaliar vários parâmetros hematológicos. Este trabalho apresenta dois procedimentos para coleta de sangue em ratos: a punção lateral da veia caudal e a punção da veia peniana dorsal, que oferecem vantagens significativas em relação a outras técnicas descritas anteriormente. Este estudo mostra que esses dois procedimentos permitem uma amostragem rápida (menos de 10 min) e produzem volumes sanguíneos suficientes para a maioria dos ensaios (202 μL ± 67,7 μL). A punção da veia peniana dorsal deve ser feita sob anestesia, enquanto a punção lateral da veia caudal pode ser feita em um animal consciente e contido.

A alternância dessas duas técnicas, portanto, possibilita a coleta de sangue em qualquer situação. Embora seja sempre recomendado que um operador seja assistido durante um procedimento para garantir o bem-estar animal, essas técnicas exigem apenas um único operador, ao contrário da maioria dos métodos de coleta de sangue que exigem dois. Além disso, enquanto esses métodos descritos anteriormente (por exemplo, bastão jugular, coleta de sangue da veia subclávia) requerem treinamento prévio extensivo para evitar danos ou morte do animal, a punção da veia caudal e da veia peniana dorsal raramente é fatal. Por todas essas razões, e de acordo com o contexto (por exemplo, para estudos incluindo ratos machos, durante o período perioperatório ou pós-operatório imediato, para animais com veias caudais finas), ambas as técnicas podem ser usadas alternadamente para permitir repetidas coletas de sangue.

Introdução

A coleta de sangue é necessária para a maioria dos estudos em animais, tanto in vivo quanto in vitro. Em ratos, como a frequência e a quantidade de coleta de sangue podem ser significativas, é útil ter diferentes alternativas para coleta. Vários métodos foram descritos em estudos anteriores.

As técnicas mais utilizadas são a punção da veia caudal e a coleta de sangue da veia safena. A amostragem da veia da cauda é adequada para todas as estirpes de ratos. Com o treinamento adequado, o procedimento é simples de ser realizado e causa o mínimo de sofrimento ao animal¹. Da mesma forma, a coleta de sangu....