Artigo de método

Avaliação da hiperalgesia do joelho em camundongos usando medição de aplicação de pressão

DOI:

10.3791/68480

⸱

13 de junho de 2025

 ,  , 
1Department of Internal Medicine, Division of Rheumatology, Rush University Medical Center, 2Chicago Center on Musculoskeletal Pain

Neste artigo

Resumo

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O protocolo descreve como medir a hiperalgesia do joelho em camundongos. Mostramos exemplos em modelos de camundongos de dor aguda no joelho, bem como em modelos de osteoartrite (OA).

Resumo

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A avaliação da hiperalgesia do joelho fornece um ensaio robusto para medir a sensibilização periférica no joelho e representa um comportamento dependente da dor clinicamente relevante que pode ser usado em modelos de artrite em roedores. Vários métodos foram relatados para determinar o limiar de respostas à compressão do joelho em roedores. Aqui, nosso objetivo foi adaptar os métodos existentes para desenvolver um método padronizado para avaliar a hiperalgesia do joelho em camundongos adultos, usando um dispositivo de Medição de Aplicação de Pressão (PAM). O protocolo inclui etapas detalhadas, recomendações de treinamento para novos experimentadores e dicas para alcançar resultados consistentes. Fornecemos sugestões para o treinamento ideal de um novo experimentador. Finalmente, resultados representativos são fornecidos para modelos agudos de hiperalgesia transitória e modelos experimentais de osteoartrite (OA), que são caracterizados por dor crônica. Este método é altamente sensível a intervenções farmacológicas, tornando-o adequado para avaliar os efeitos de mediadores como citocinas e para ensaios de triagem de medicamentos de médio rendimento. Em resumo, a abordagem descrita fornece um método robusto e clinicamente relevante para quantificar a hiperalgesia do joelho.

Introdução

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A osteoartrite (OA), a forma mais comum de artrite, é caracterizada por degradação progressiva da cartilagem, sinovite, remodelação óssea e crescimento de osteófitos1, e apresenta-se clinicamente como dor e perda da função articular. A OA é uma das principais fontes de dor crônica no mundo, impactando profundamente a vida dos pacientes devido à mobilidade reduzida e problemas de saúde associados, como ansiedade e depressão 2,3. Os medicamentos comumente prescritos para dor da OA incluem anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs), viscossuplementação, co....

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Protocolo

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Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Rush University. O protocolo descrito é avaliar a hiperalgesia do joelho direito em resposta a um estímulo mecânico em camundongos C57BL/6 adultos (10 semanas a 2 anos de idade) de ambos os sexos. Para medir a hiperalgesia do joelho esquerdo, troque de mãos.

1. Configurando o dispositivo de Medição de Aplicação de Pressão (PAM)

  1. Conecte um cabo do dispositivo PAM ao computador e o segundo cabo do dispositivo PAM ao transdutor de força.
  2. Ligue o computador e inicie ....

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Resultados

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Evolução temporal da hiperalgesia do joelho em um modelo de dor aguda no joelho
Todos os resultados apresentados foram previamente relatados pelo nosso grupo, e nos referimos a10para uma descrição detalhada. O primeiro exemplo mostra um modelo para induzir hiperalgesia aguda e transitória do joelho. Neste experimento, injetamos Pam3CSK4, um ligante sintético do receptor toll-like 2 (TLR2) (1 μg ou 3 μg, dissolvido em água estéril) a 5 μL, na ca.......

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Discussão

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A medição da hiperalgesia do joelho em camundongos oferece um meio relativamente rápido e direto de avaliar a hiperalgesia do joelho associada à artrite experimental. Como pode ser observado a partir dos resultados representativos mostrados, o ensaio pode detectar hiperalgesia de início agudo e transitória (Figura 2A). Relatamos esse comportamento em resposta a vários mediadores injetados na articulação do joelho, incluindo um fragmento de agrecan

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Divulgações

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AMM é consultor da Novartis, Merck, Roivant e Averitas. Ela recebeu apoio de pesquisa da Orion e da Eli Lilly. SI e REM não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

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Nossa pesquisa é financiada pelo Instituto Nacional de Artrite e Doenças Musculoesqueléticas e de Pele, Números de Concessão/Prêmio: P30AR079206 (AMM), R01AR060364 (AMM), R01AR064251 (AMM), UC2AR082186 (AMM), R21AR085242-01 (AMM) e R01AR077019 (REM).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Antagonista do receptor de quimioquina C-C 2 (CCR2RA)TocrisRS 504393
Computador (de qualquer tipo)Windows 7 mínimo
LidocaínaSigmaL5647
Medição de Aplicação de Pressão (P.A.M)Ugo Basile38500incluía transdutor, computador e cabos
Saco de sanduíchesMercado Integral de Alimentos6-1/2 x 5-7/8Cobrir o transdutor
ligando do receptor tipo toll 2 Pam3CSK4invitrogenTLRL-PMS

Referências

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  1. Tang, S., et al. Osteoarthritis. Nat Rev Dis Primers. 11 (1), 10(2025).
  2. Allen, K. D., Thoma, L. M., Golightly, Y. M. Epidemiology of osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 30 (2), 184-195 (2022).
  3. Schmukler, J., et al.

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Reimpressões e permissões

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Etiquetas

Knee HyperalgesiaPressure Application MeasurementOsteoarthritis PainMouse Pain AssayPeripheral SensitizationPain ThresholdIntraarticular InjectionDMM SurgeryPain BehaviorDrug Screening

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