SDS-PAGE/Immunoblot Detecção de multímeros Aâ no tecido cortical Humanos homogeneizados utilizando antígeno Epitope-Retrieval

Este protocolo permite a detecção de um beta malters no tecido cortical humano. O primeiro tecido homogeneizado é sonicado por sonda e clarificado por centrifugação de baixa velocidade. Em seguida, amostras de reduzido fervidas em tampão SDS e carregadas em uma poliacrilamida.

As proteínas do gel são transferidas para uma membrana de nitrocelulose e a membrana é aquecida a vapor em solução salina tamponada com fosfato. Finalmente, em um agitador orbital, a membrana é incubada durante a noite no anticorpo primário HRP conjugado com anticorpo secundário e, em seguida, reagente de peróxido luminal antes da exposição ao filme de raios-x. Olá, sou Rebecca Rosen, do laboratório de Larry Walker no Departamento de Neurociência do Centro Nacional de Pesquisa de Primatas Yerkes da Universidade Emory.