Geração de células dendríticas derivadas da medula óssea: um método para gerar células dendríticas a partir da medula óssea de camundongos

- As células dendríticas ou DCs são células-chave apresentadoras de antígenos que ativam as células T. Em pacientes leucêmicos, essas células expressam mal o antígeno associado ao tumor e não conseguem provocar uma resposta imune específica do antígeno. As células dendríticas são abundantes na medula óssea. E, portanto, a medula óssea é o local preferido para seu isolamento para ajudar a estudar seu papel no câncer.

Para obter células dendríticas, extraia a medula óssea do fêmur ou tíbia de um camundongo sacrificado usando uma seringa cheia de mídia para lavá-la. Centrifugue e ressuspenda o pellet em tampão de cloreto de amônio-potássio ou ACK para lisar os eritrócitos. Agora adicione meios de cultura para interromper a lise e centrifugar. Ressuspenda o pellet no meio de cultura que contém um antibiótico. Adicione o fator estimulador de colônias de granulócitos-macrófagos ou GM-CSF e transfira a suspensão celular para uma placa de Petri.

Incube a placa pelo tempo desejado. O GM-CSF ajuda as células progenitoras a se diferenciarem em células dendríticas. Finalmente, ative as células com lipopolissacarídeos ou LPS, que se liga ao receptor de superfície das células dendríticas, result