Isolamento de queratinócitos da pele humana: um método para cultivar queratinócitos primários de amostras de pele

- Os queratinócitos são as células mais proeminentes presentes na epiderme ou na camada mais externa da pele. Eles se organizam em várias camadas sobre a derme, associados a vários outros tipos de células, como melanócitos, células dendríticas e células de Merkel.

Para isolar os queratinócitos, comece retirando o tecido epidérmico da pele humana. Em seguida, trate com um tampão de digestão enzimática. As enzimas no tampão degradam as proteínas da matriz extracelular presentes no tecido epidérmico, iniciando assim a dissociação celular. Agora, adicione um meio adequado e interrompa mecanicamente o tecido.

Para liberar as células dissociadas em suspensão, filtre a suspensão de células epidérmicas através de uma peneira para remover quaisquer aglomerados ou detritos celulares. Centrifugue para peletizar as células epidérmicas e separá-las do sobrenadante contendo enzimas. Remova o sobrenadante e ressuspenda as células usando um meio de crescimento de queratinócitos preferido. Cultive as células pela duração desejada.

Durante a cultura, os meios otimizados enriquecem a expansão dos queratinócitos, promovendo seu crescimento seletivo sobre os outros tipos de células epidérmicas. No prot