Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:59 min. • August 31st, 2026
Retire uma planta de batata cultivada in vitro.
Em seguida, utilize Agrobacterium recombinante, um patógeno vegetal que contém um DNA de transferência (T-DNA).
O T-DNA carrega um genoma completo do vírus X da batata, modificado para codificar um RNA não codificante que sequestre microRNAs vegetais específicos.
Infiltra as folhas com as bactérias e risca o caule com um palito revestido com as bactérias.
No local da inoculação, as bactérias excisam o T-DNA e o transferem como um DNA de fita simples para as células vegetais.
Utilizando a maquinaria da célula hospedeira, o T-DNA produz RNA genômico viral, que se replica e expressa RNAs não codificantes e proteínas virais.
O RNA não codificante liga-se às microRNAs vegetais-alvo, impedindo-as de se ligarem aos seus mRNAs-alvo e desencadear defeitos no desenvolvimento.
Enquanto isso, os RNAs genômicos virais formam complexos ribonucleoproteicos que se espalham sistemicamente através dos plasmodesmas, permitindo o silenciamento de microRNAs em toda a planta.
Anormalidades nas folhas, incluindo crescimentos ectópicos e folhas em formato de trombeta, indicam o papel no desenvolvimento dos microRNAs silenciados.
Quando a densidade óptica em seiscento
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