Avaliação de comportamentos de interação social

O objetivo geral do experimento a seguir é estudar a interação social e a memória em camundongos. Este método é único, pois coloca o mouse de controle sob um copo de arame, permitindo que o animal experimental inicie ou termine livremente as interações, evitando o contato direto após se habituar a uma câmara central. O camundongo experimental pode explorar livremente duas outras câmaras, uma com um copo vazio e outra contendo um camundongo desconhecido.

O próximo passo permite ao rato uma escolha livre entre um animal já familiar e um segundo rato recém-introduzido. Em última análise, podem ser obtidos resultados que demonstram diferenças na sociabilidade natural e preferência pela novidade social em camundongos experimentais versus controle. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes, como o teste de interação social de uma câmara ou o teste de intruso residente, é que qualquer contato físico direto entre camundongos durante esse procedimento é proibido, permitindo ao animal experimental a liberdade de encerrar ou iniciar interações sociais.

O teste de sociabilidade e preferência de Crawley pela novidade social é realizado em uma caixa retangular de três câmaras. Cada câmara mede 19 por 45 centímetros e as paredes divisórias são feitas de plexiglass transparente. A seção do meio se abre para permitir o livre acesso a cada câmara.

Os copos de arame necessários para este procedimento devem ser grandes o suficiente para conter um único mouse e ter aberturas que permitam ampla troca de ar, mas evitem a interação física direta. Coloque um copo em cada lado da câmara, o comportamento durante o teste é registrado. Usando o programa Observer 6.0, todas as câmaras são limpas com etanol 70% entre os camundongos e, em seguida, com kaly, um a cinco para um entre as gaiolas para evitar viés Q olfativo e garantir a desinfecção adequada, respectivamente, começando habituando os animais experimentais ao ambiente de teste por 30 minutos.

Com as duas xícaras no lugar e as paredes divisórias fechadas, introduza um rato ingênuo na câmara central e aguarde cinco minutos para a aclimatação. Coloque um mouse de controle estranho dentro de um copo de contenção de arame, alterne a colocação do controle do lado esquerdo para o direito da câmara entre as tentativas. Após o período de habituação, remova as paredes entre os compartimentos para permitir que o sujeito explore livremente todas as três câmaras imediatamente comece a monitorar e registrar o comportamento por 10 minutos.

Neste exemplo, o programa Observer é usado para monitorar comportamentos em tempo real usando códigos para os parâmetros de interesse, registrar a duração e o número de contatos diretos ou ativos entre o mouse em questão e o copo vazio ou o compartimento do copo, o mouse mais estranho. Um contato ativo é um contato direto ou um alongamento do corpo do sujeito em uma área de três a cinco centímetros ao redor do copo. Registre também a duração e o número de outros comportamentos.

Isso inclui caminhar, se arrumar, falta de movimentos corporais por mais de cinco segundos ou congelamento, bem como qualquer comportamento incomum, como pular, comportamento repetitivo, etc. A duração e o número de entradas em cada compartimento também são registrados. Considera-se que o camundongo está na câmara quando sua cabeça e quatro poros entraram.

Para testar a novidade ou preferência social, coloque um segundo mouse de controle estranho dois dentro do copo no lado oposto da câmara. Monitore os mesmos parâmetros descritos acima por mais 10 minutos. Limpe todas as câmaras com etanol a 70% e, em seguida, com kaleido de um a cinco para um e demonstrado anteriormente, além da pontuação manual dos experimentos.

O uso de um sistema de gravação de vídeo é fortemente recomendado, pois permite a revisão off-line dos dados experimentais no futuro por um observador independente ou pela mesma pessoa, além de permitir a inclusão de parâmetros secundários adicionais, se necessário. Normalmente, um animal do tipo selvagem passará significativamente mais tempo no compartimento com um estranho em comparação com o compartimento com o copo vazio, indicando sociabilidade normal, motivação social e afiliação em camundongos GSK três nocautes alfa. No entanto, não há diferenças significativas entre o tempo gasto com o copo vazio em comparação com o copo contendo um estranho, indicando sociabilidade prejudicada neste modelo animal.

A segunda sessão do teste é projetada para estimar a novidade social e a memória social. Normalmente, um animal do tipo selvagem se lembra de seu contato anterior com um estranho e tende a passar mais tempo com o camundongo recém-encontrado, indicando memória social intacta e uma predileção por novas experiências. Ao contrário dos camundongos do tipo selvagem, os três animais mutantes alfa da GSK não mostram preferência pela câmara contendo um camundongo recém-introduzido em vez de uma câmara contendo um.

Agora, o comportamento indiferente do camundongo familiar de camundongos nocaute neste teste é indicativo de diminuição da motivação social e novidade após este procedimento. Outros métodos, como caixa de pato leve Mac elevada, campo aberto, FST TS T podem ser realizados para responder a perguntas adicionais sobre emoção, ansiedade e depressão, que podem afetar os resultados deste teste ou sua interpretação geral.