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Coupled Assays for Monitoring Protein Refolding in Saccharomyces cerevisiae
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Saggi accoppiati per il monitoraggio delle proteine ​​in ripiegamento<em> Saccharomyces cerevisiae</em

DOI:
10.3791/50432-v

•

13:52 min

•

July 09, 2013

•

,
1Department of Microbiology and Molecular Genetics, Graduate School of Biomedical Sciences,University of Texas Medical School

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:46Construction of Strains Containing FFL-GFP Plasmid
  • 02:23Preparations Prior to FFL-GFP Induction and Enzymatic Recovery Assay
  • 03:48Induction of FFL-GFP
  • 06:22Enzymatic FFL-GFP Recovery Assay
  • 07:35Fluorescence Microscopy
  • 08:55Single Cell Microscopy
  • 10:47Results: Hsp104 is Required for Efficient Refolding of Heat-denatured FFL-GFP
  • 13:36Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Questo articolo descrive l'uso di una proteina di fusione GFP-luciferasi lucciola per indagare<em> In vivo</em> Folding delle proteine ​​in<em> Saccharomyces cerevisiae</em>. Usando questo reagente, ripiegamento di una proteina modello denaturato al calore può essere monitorato contemporaneamente mediante microscopia a fluorescenza e un saggio enzimatico per sondare i ruoli dei componenti di rete proteostasis nel controllo di qualità delle proteine.

Tags

Protein RefoldingProteostasisProtein FoldingProtein AggregationFirefly LuciferaseGreen Fluorescent ProteinFFL-GFPHsp104Hsp40Hsp70Nucleotide Exchange FactorProtein ChaperonesProtein Quality ControlNeurodegenerative Disorders

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