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Un protocolo para la evaluación funcional de la Proteína Total-mutagénesis de saturación Bibliotecas La utilización de secuenciación de alto rendimiento
 
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Un protocolo para la evaluación funcional de la Proteína Total-mutagénesis de saturación Bibliotecas La utilización de secuenciación de alto rendimiento

Article DOI: 10.3791/54119-v 11:36 min July 3rd, 2016
July 3rd, 2016

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Resumo

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Se presenta un protocolo para la evaluación funcional de amplias bibliotecas de saturación de un solo sitio de mutagénesis de proteínas utilizando secuenciación de alto rendimiento. Es importante destacar que este enfoque utiliza pares de cebadores para multiplexar ortogonales construcción de la biblioteca y secuenciación. Se proporcionan resultados representativos utilizando TEM-1 β-lactamasa seleccionado en una dosis clínicamente relevante de ampicilina.

Tags

Biología Molecular número 113, mutagénesis por saturación la secuenciación de próxima generación de alto rendimiento de secuenciación TEM-1 beta-lactamasa resistencia a los antibióticos cebadores ortogonales
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