O uso de células tumorais do rato mamário em um ensaio de invasão in vitro como medida de comportamento de células oncogênicas

Este protocolo, o ensaio de invasão in vitro, é uma ferramenta útil para medir quantitativamente uma capacidade de migração de linhas de células através de uma matriz rica em proteínas e passar por uma membrana porosa, em um processo semelhante aos estágios iniciais da invasão celular cancerosa. Essas linhas celulares podem ser geneticamente alteradas a fim de expressar um gene ou ter a expressão reduzida de um gene, a fim de determinar se esse gene desempenha um papel na migração celular ou invasão celular. Muitos cânceres agressivos envolvem mudanças drásticas no comportamento celular, incluindo aumento da migração e invasão.

Assim, este ensaio de invasão in vitro pode nos permitir entender melhor os genes e outros fatores envolvidos nesse processo. Para iniciar este procedimento, cresça células tumorais mamárias de camundongos aderentes em um frasco T25 a 37 graus Celsius com 5% de dióxido de carbono e 100% de umidade até que sejam 70% a 90% confluentes para o primeiro dia do experimento. Recupere as pastilhas da câmara de Boyden do armazenamento e transfira-as para um capô de cultura celular para aquecer à temperatura ambiente por 20 minutos.