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DOI: 10.3791/66062-v
M. Atif Yaqub*1, Marta Zanoletti*1, Lorenzo Cortese1, Daniel Senciales Sánchez1, Caterina Amendola2, Lorenzo Frabasile2, Umut Karadeniz1, Jacqueline Martinez Garcia1, Marta Martin1, Jordi Cortes-Picas1, Alba Caballer3, Edgar Cortes3, Sara Nogales3, Alberto Tosi4, Talyta Carteano5, Diego Sanoja Garcia5, Jakub Tomanik6, Tessa Wagenaar6, Hsiao Mui6, Claudia Nunzia Guadagno7, Shahrzad Parsa8, Sanathana Konugolu Venkata Sekar7, Luc Demarteau6, Tijl Houtbeckers6, Udo M. Weigel8, Michele Lacerenza9, Mauro Buttafava9, Alessandro Torricelli2,10, Davide Contini2, Jaume Mesquida3, Turgut Durduran1,11
1ICFO - Institut de Ciències Fotòniques, The Barcelona Institute of Science and Technology, 2Dipartimento di Fisica,Politecnico di Milano, 3Critical Care Department,Parc Taulí Hospital Universitari, 4Dipartimento di Elettronica, Informazione e Bioingegneria,Politecnico di Milano, 5ASPHALION s.l., 6Splendo, 7BioPixS-Biophotonics Standards, IPIC,Tyndall National Institute, 8Hemophotonics s.l., 9PIONIRS s.r.l., 10Consiglio Nazionale delle Ricerche,Istituto di Fotonica e Nanotecnologie, 11Institució Catalana de Recerca i Estudis Avançats (ICREA)
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Descrevemos um protocolo para medir de forma não invasiva e contínua o índice de fluxo sanguíneo microvascular absoluto e a saturação sanguínea de oxigênio usando um dispositivo multimodal baseado em óptica difusa no infravermelho próximo. Em seguida, avaliamos a taxa metabólica de consumo de oxigênio e hiperemia reativa utilizando um teste de oclusão vascular.
O objetivo deste protocolo é avaliar a oxigenação microvascular e a hiperemia reativa em músculos periféricos, especialmente no contexto do manejo em terapia intensiva de pacientes críticos. Juntamente com as Tecnologias Ópticas Difusas e os Testes de Oclusão Vascular, podemos avaliar vários parâmetros para ter uma visão sobre oxigenação microvascular e hiperemia reativa. Estamos usando o dispositivo vascular que combina vários módulos, incluindo duas técnicas ópticas de infra difusa, oximetria de pulso e um torniquete automático.
Ele é projetado para medir a taxa metabólica de oxigênio e reatividade microvascular usando nosso teste de oclusão vascular induzida por uma oclusão arterial sustentada do braço. As informações da e-tecnologia são integradas para fornecer uma abordagem multimodal para o estudo da saúde microvascular. A espectroscopia no infravermelho próximo utiliza passagens de laser na ordem de picossegundos em múltiplos comprimentos de onda e mede o atraso e o alargamento de tais pulsos à medida que viajam pelo tecido.
Múltiplos comprimentos de onda são usados para calcular diferentes componentes do sangue e tecido. Em vasculares que utilizamos, utilizamos 685 nanômetros e 830 nanômetros para calcular a hemoglobina oxigenada e a hemoglobina desoxigenada e, portanto, a porcentagem de saturação microvascular de oxigênio. A espectroscopia de correlação difusa usa a variação da luz infravermelha próxima de uma fonte de laser coerente e de onda contínua.
Esta tecnologia, a fim de calcular o fluxo sanguíneo, aproveita o decaimento de uma função de auto correlação de intensidade speckle que é devido ao movimento de partículas de espalhamento de luz, como o glóbulo vermelho. No SDC, em vascular, utilizamos como comprimento de onda 785 nanômetros. Por fim, a oximetria de pulso mede a frequência cardíaca e o percentual de saturação arterial de oxigênio.
Com esse protocolo, o que conseguimos medir é a oxigenação tecidual. A oxigenação tecidual é um parâmetro bruto que combina perfusão tecidual, oxigenação arterial e taxa metabólica do tecido, portanto, oxigenação venosa. Quando realizamos o teste de oclusão vascular, o que temos é a taxa metabólica do tecido, então a desoxigenação, a dessaturação do sinal fornece informações da taxa metabólica, isolada, não perfusão, apenas taxa metabólica.
Depois disso, quando liberarmos o manguito após esse desafio isquêmico, teremos uma ressaturação, uma reoxigenação do sinal e uma resposta hiperêmica. Então essa reoxigenação e essa resposta hiperêmica estão fornecendo informações sobre a reatividade microvascular do tecido, que é o que fala sobre o desempenho da função endotelial. A sonda vascular possui janelas ópticas para fontes de laser e detectores para espectroscopia de correlação difusa e espectroscopia de resultados temporais.
A separação do detector de fonte é de 25 milímetros para ambos. A sonda é indicada com o sensor de toque de capacidade e acelerômetro, uma carga e um sensor de luz. O sistema de segurança a laser no dispositivo usa o sensor de toque para brilhar apenas o laser quando a sonda é colocada no tecido.
Assim que o descolamento é sentido, os lasers são desligados, de modo que os pacientes, bem como os operadores estão seguros. Ligue o dispositivo. O dispositivo começa com um software desenvolvido internamente.
Vire a chave de segurança para a posição. Coloque a sonda completamente dentro da caixa de função de resposta do instrumento e pressione o botão de reset na sonda, se ela estiver brilhando. Aguarde até que o dispositivo esteja pronto.
Ele realiza auto-teste para garantir o funcionamento estável. Quando o dispositivo estiver pronto, ele perguntará se você deseja medir um IRF. Agora, o dispositivo ajusta automaticamente a intensidade do laser para atingir a taxa de contagem desejada de 1 milhão.
Pressione o botão de parada quando vir uma taxa de contagem estável e DTOF. Este IRF é salvo no dispositivo, bem como carregado no software para ser utilizado para cálculos em tempo real. Agora, podemos continuar a realizar uma medição fantasma.
Insira a sonda na caixa fantasma corretamente, de modo que o indicador de sonda anexado esteja ligado. O protocolo simulador inicia-se com o teste de controle de qualidade que verifica se um número suficiente de fótons é recebido pelos detectores DCS e TRS e também verifica se as contagens escuras estão dentro dos limites desejados. A verificação de qualidade também confirma que não há interferência entre as modalidades.
Continue o protocolo fantasma por pelo menos 30 segundos para ter uma quantidade suficiente de dados salvos para uma análise posterior. Fixe o torniquete no braço acima do cotovelo, como feito durante uma medição da pressão arterial. Não enrole o manguito frouxamente ou com muita força ao redor do braço.
Prender vagamente o torniquete precisará de mais ar para atingir a pressão desejada. A inflação lenta pode permitir que o corpo reajuste a fisiologia. Conecte o oxímetro de pulso ao dedo indicador do mesmo braço.
Se não for possível prender ao dedo indicador, prenda-o a qualquer outro dedo. Localize o músculo a ser sondado, que fica no antebraço lateral logo abaixo do cotovelo. O músculo pode ser traçado torcendo ligeiramente o braço com uma mão.
O músculo pode ser sentido entre o polegar e os dedos com a outra mão. Meça a circunferência do braço ao redor do músculo localizado usando uma fita métrica curta. Meça a espessura aproximada do tecido na parte superior do músculo usando um calibre de gordura corporal detalhado.
Fixe a cabeça da sonda no músculo com as fibras ópticas e os cabos indo em direção à mão. Não prenda bem a sonda. Pode afetar a fisiologia tecidual.
Certifique-se de que as fibras não estão tocando em nenhum objeto em movimento. Ele pode criar artefatos nos dados. Cubra a sonda com um pano preto para bloquear a luz externa.
Se o paciente estiver acordado, informe-o que o teste de oclusão vascular pode causar sensação de formigamento e não movimentar o braço. Certifique-se de que a sonda esteja conectada. O indicador LED no painel frontal do dispositivo está brilhando e o ícone de toque no software é verde, o que mostra que a sonda está conectada.
Pressione o botão de hora do protocolo. Abre uma nova caixa de diálogo. Digite o ID do sujeito, o ID do operador e a pressão alvo de mercúrio 50 milímetros maior do que a pressão arterial sistólica.
Pressione OK para iniciar o protocolo automatizado. Os dados em tempo real são exibidos nos gráficos. O protocolo começa com o controle de qualidade que ajusta automaticamente a potência do laser, verifica a contagem de fótons e a interface entre as modalidades.
A verificação de qualidade é concluída em dois minutos. Observe os ícones circulares rotulados DRS e DCS, que devem ficar verdes no final da verificação de qualidade. Os ícones verdes mostram que a taxa de contagem de fótons está dentro do intervalo desejado.
Não há luz externa entrando na sonda. Não há crosstalk entre as modalidades e, portanto, a medição pode ser continuada. Os gráficos são redefinidos no final da fase de qualidade e os sinais que representam os dados do paciente são plotados em tempo real.
Pressione o botão stop para abortar o protocolo. Se o paciente não estiver estável ou se o paciente necessitar de intervenção clínica a qualquer instante durante o protocolo. Pressione o botão extend para adicionar 30 segundos de duração pré-oclusão.
Se o paciente movimentar os braços e não tiver um sinal basal estável por qualquer outro motivo, o operador poderá pressionar a troca quantas vezes e em qualquer fase necessária. Cada botão pressionado adicionará 30 segundos. O torniquete infla automaticamente à pressão desejada para iniciar o teste de oclusão vascular.
Pressione os botões de mais ou menos para aumentar ou diminuir a pressão de oclusão desejada em passos de mercúrio de 5 milímetros se a pressão arterial do paciente mudar após o início do protocolo. O início e a parada do teste de oclusão vascular são automaticamente marcados com linhas verticais amarelas. O software é configurado para adquirir dados continuamente e executar automaticamente três minutos de teste de oclusão vascular.
Após três minutos do início do estudo, o protocolo padrão pré-definido dura mais seis minutos após a realização do teste de oclusão vascular para avaliar a recuperação após o término da resposta hiperêmica do paciente e a obtenção de uma condição estável. Pressione ok, quando o operador é notificado na conclusão do protocolo através de uma notificação pop-up que marca a conclusão bem-sucedida do protocolo. O operador pode remover a sonda e o manguito do paciente e limpá-los usando um cotonete de álcool ou equivalente.
Anote manualmente as informações clínicas e demográficas de acordo com os protocolos de estudo predefinidos, a circunferência do braço no local da sonda e a espessura do tecido adiposo sobrejacente no formulário de dados do paciente. O cálculo dos valores absolutos em tempo real da hemoglobina oxigenada, desoxigenada e total e da saturação de oxigênio tecidual é obtido por algoritmo de ajuste usando a curva de espectroscopia de recursos de ambos os comprimentos de onda. O cálculo do índice de fluxo sanguíneo em tempo real é realizado pelo algoritmo de ajuste utilizando as curvas de autocoerção por espectroscopia de coerção difusa.
Script de usuário escrito em seu idioma favorito para reabrir e visualizar dados de limite gravados. Por meio do roteiro, calcule-se o índice de consumo de oxigênio, a taxa e a amplitude de desoxigenação, a taxa de reoxigenação e a amplitude e área sob a curva da resposta hiperêmica reativa após o teste de oclusão vascular. A partir desse protocolo, podemos medir continuamente a saturação absoluta de oxigênio tecidual, o índice de fluxo sanguíneo e a saturação arterial de oxigênio.
A combinação desses parâmetros resulta na aquisição do índice de taxa metabólica de consumo de oxigênio durante a realização do teste de oclusão vascular. Quando o manguito é inflado, obtemos a taxa de desoxigenação que mostra a velocidade com que o oxigênio está sendo consumido na região da sonda. Ao final do teste de oclusão vascular, quando o manguito é desinsuflado, podemos ver a velocidade com que o tecido é reoxigenado que mostra a rapidez com que o oxigênio é fornecido a uma região esgotada de oxigênio.
Os resultados mostram aumento da hemoglobina desoxigenada e diminuição da hemoglobina oxigenada. À medida que o oxigênio é extraído da hemoglobina e o número de células esgotadas de oxigênio aumenta. Podemos observar uma tendência de declínio da saturação microvascular de oxigênio durante o teste de oclusão vascular.
A taxa precoce dessa diminuição é representativa da taxa metabólica de consumo de oxigênio. Enquanto o pico hiperêmico e o subsequente decaimento estão ligados à função endotelial e à reatividade microvascular. Vários biomarcadores têm sido utilizados na literatura, como taxa de desoxigenação, quantidade de desoxigenação, taxa de reoxigenação, valor de pico hiperêmico e área sob a curva para representar a gravidade das doenças, bem como a classificação entre populações saudáveis e pacientes.
Além da obtenção de valores absolutos de concentração, outra vantagem desse protocolo é o índice de fluxo sanguíneo. Como a saturação hiperêmica isoladamente não expressa o aumento local de oxigênio, o índice de fluxo sanguíneo complementa a obtenção de informações sobre a taxa metabólica basal de consumo e perfusão de oxigênio. Uma análise mais aprofundada do índice de fluxo sanguíneo também fornece o índice por estabilidade, uma vez que o dispositivo vascular é capaz de aquisição rápida de espectroscopia de correlação difusa.
Ao usar o protocolo, certifique-se sempre de que os testes de qualidade foram aprovados, o que mostra que todos os parâmetros do dispositivo estão dentro de intervalos aceitáveis. Portanto, os dados que estão sendo exibidos e armazenados são úteis e significativos. Com esse protocolo, podemos fornecer aos clínicos, de forma não invasiva, valores absolutos de saturação de oxigênio da hemoglobina e índice de fluxo sanguíneo, usando múltiplas tecnologias que os parâmetros clínicos obtidos podem ser usados para avaliar a perfusão tecidual, a função endotelial, a reatividade microvascular e o metabolismo do oxigênio.
Os protocolos totalmente automatizados para calibração de dispositivos, bem como medições humanas, reduzem as variações da base do operador e resultam em dados mais confiáveis.
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