Name: Secreção de insulina estimulada por glicose via perfusão através da vasculatura de camundongos com pâncreas intacto (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 41 s
Description: Aprenda a técnica de perfusão do pâncreas intacto em camundongos para estudar a secreção de insulina estimulada por glicose em condições fisiológicas. Este método preserva o microambiente natural e permite avaliar respostas bifásicas e terapêuticas.

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<ol><li>Rosenberg, L., Wang, R., Paraskevas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+changes+resulting+from+islet+isolation+lead+to+islet+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Structural and functional changes resulting from islet isolation lead to islet cell death.</a> Surgery. 126 (2), 393-398 (1999).</li>
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<li>Weir, G. C., Leahy, J. L., Braunstein, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+insulin+and+glucagon+release+from+the+perfused+pancreas%2C+intact+isolated+islets%2C+and+dispersed+islet+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Res%22%5BJournal%5D)">Characteristics of insulin and glucagon release from the perfused pancreas, intact isolated islets, and dispersed islet cells.</a> Horm Res. 24 (1), 62-72 (1986).</li>
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<li>Heiser, A., Ulrichs, K., Müller-Ruchholtz, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+porcine+pancreatic+islets%3A+low+trypsin+activity+during+the+isolation+procedure+guarantees+reproducible+high+islet+yields%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Lab+Anal%22%5BJournal%5D)">Isolation of porcine pancreatic islets: low trypsin activity during the isolation procedure guarantees reproducible high islet yields.</a> J Clin Lab Anal. 8 (6), 407-411 (1994).</li>
<li>Basir, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+outcome+of+pig+islet+isolation+by+Pefabloc+inhibition+of+trypsin%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Improved outcome of pig islet isolation by Pefabloc inhibition of trypsin.</a> Transplant Proc. 29 (4), 1939-1941 (1997).</li>
<li>White, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+of+the+activation+of+endogenous+pancreatic+exocrine+enzymes+during+automated+porcine+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">A preliminary study of the activation of endogenous pancreatic exocrine enzymes during automated porcine islet isolation.</a> Cell Transplant. 8 (3), 265-276 (1999).</li>
<li>Lakey, J. R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine-protease+inhibition+during+islet+isolation+increases+islet+yield+from+human+pancreases+with+prolonged+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Serine-protease inhibition during islet isolation increases islet yield from human pancreases with prolonged ischemia.</a> Transplantation. 72 (4), 565-570 (2001).</li>
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<li>Cross, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagenase+penetrates+human+pancreatic+islets+following+standard+intraductal+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Collagenase penetrates human pancreatic islets following standard intraductal administration.</a> Transplantation. 86 (7), 907-911 (2008).</li>
<li>Balamurugan, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmful+delayed+effects+of+exogenous+isolation+enzymes+on+isolated+human+islets%3A+relevance+to+clinical+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Harmful delayed effects of exogenous isolation enzymes on isolated human islets: relevance to clinical transplantation.</a> Am J Transplant. 5 (11), 2671-2681 (2005).</li>
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<li>Cohrs, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+the+gap%3A+pancreas+tissue+slices+from+organ+and+tissue+donors+for+the+study+of+diabetes+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Bridging the gap: pancreas tissue slices from organ and tissue donors for the study of diabetes pathogenesis.</a> Diabetes. 73 (1), 11-22 (2024).</li>
<li>Panzer, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreas+tissue+slices+from+organ+donors+enable+in+situ+analysis+of+type+1+diabetes+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Pancreas tissue slices from organ donors enable in situ analysis of type 1 diabetes pathogenesis.</a> JCI Insight. 5 (8), e134525(2020).</li>
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<li>Chen, H., Li, L., Xia, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+alters+the+blood+glucose+response+to+ketamine+in+streptozotocin-diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Diabetes alters the blood glucose response to ketamine in streptozotocin-diabetic rats.</a> Int J Clin Exp Med. 8 (7), 11347-11351 (2015).</li>
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<li>Komatsu, M., Takei, M., Ishii, H., Sato, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose-stimulated+insulin+secretion%3A+a+newer+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22J+Diabetes+Investig%22%5BJournal%5D)">Glucose-stimulated insulin secretion: a newer perspective.</a> J Diabetes Investig. 4 (6), 511-516 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Oxigenador de membrana de fibra</td><td>Aparelho de Harvard</td><td>73-3757</td><td>Permite que o oxigênio entre no perfusato</td></tr><tr><td>Almofada de aquecimento</td><td>Braintree científico</td><td>39OM</td><td></td></tr><tr><td>Cetamina/xilazina</td><td>Patterson Veterinário</td><td>78908598</td><td></td></tr><tr><td>Quadro magnético</td><td>Braintree científico</td><td>39OM</td><td></td></tr><tr><td>Ímãs com elásticos</td><td>Braintree científico</td><td>39OM</td><td></td></tr><tr><td>Microscopia</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Nenhuma empresa específica</td></tr><tr><td>Tanque de oxigênio</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Nenhuma empresa específica</td></tr><tr><td>Tubos de PCR</td><td>ThermoFisher/Invitrogen</td><td>AM12225</td><td>Usado para coleta de perfusato</td></tr><tr><td>Tubo PE-30</td><td>Braintree científico</td><td>PE30</td><td></td></tr><tr><td>Tubo PE-50</td><td>Braintree científico</td><td>PE50</td><td></td></tr><tr><td>Bomba peristáltica</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Nenhuma empresa específica</td></tr><tr><td>Ferramentas cirúrgicas</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Nenhuma empresa específica</td></tr><tr><td>Sutura</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Nenhuma empresa específica</td></tr></tbody></table>

secreção de insulina estimulada por glicose via perfusão através da vasculatura de camundongos com pâncreas intacto

Glucose-Stimulated Insulin Secretion via Perfusion through the Mice Vasculature with an Intact Pancreas

Os resultados após o ELISA devem demonstrar secreção de insulina do pâncreas do camundongo em uma extensão dependente dos níveis de glicose do perfusato. Devido à novidade desse procedimento em camundongos, a análise do resultado e seu sucesso depende da comparação com vários outros ensaios de um pâncreas de camundongos perfundidos. Uma resposta bifásica da insulina a altas concentrações de glicose é considerada fisiológica, conforme avaliado em seres humanos e com métodos de perifusão de...

Secreção de insulina estimulada por glicose via perfusão através da vasculatura de camundongos com pâncreas intacto

Current methods for glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) in rodents involve ex vivo perifusion or static incubation of pancreatic islets and ...

glucose-stimulated-insulin-secretion-via-perfusion-through-mice

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Ensaiando in vitro a função das células β usando o mouse ilhotas isoladas de Langerhans é um componente importante no estudo da fisiopatologia do diabetes e terapêutica. Embora muitas aplicações a jusante estão disponíveis, este protocolo descreve especificamente a medida da intracelular monofosfato cíclico de adenosina (AMPc) como um parâmetro essencial para definir a função das células β.

Um Método para Mouse ilhotas pancreáticas Isolamento e intracelular cAMP Determinação

Vasodilatação induzida por insulina regula a perfusão muscular e aumenta o microvascular superfície (recrutamento microvascular) disponível para troca de soluto entre sangue e tecido do interstício. Combinado de microscopia intravital e ultra-sonografia contraste aprimorado é apresentado para avaliar simultaneamente a ação da insulina em vasos maiores e a microcirculação in vivo.

Combinado de microscopia Intravital e ultra-sonografia contraste aprimorado do membro posterior Mouse para estudar a vasodilatação induzida por insulina e perfusão muscular

Este protocolo demonstra isolamento de manchas murinas e semeadura em um andaime decelularizado. As ilhotas suportadas em andaimes foram transplantadas para a almofada de gordura epididimática de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina (STZ). As ilhotas sobreviveram no local do transplante e revertearam a condição hiperglicêmica.

Transplante de islotes apoiado em andaimes na almofada de gordura epidídmica de ratos diabéticos

Entre a transplantação de órgãos sólidos abdominal, enxertos pancreáticos são propensos a desenvolver danos de enxerto associada a lesão de reperfusão isquemia severa, levando eventualmente a perda precoce do enxerto. Este protocolo descreve um modelo de transplante de pâncreas murino utilizando uma técnica não-sutura do manguito, ideal para analisar estes danos deletérios, cedo.

Modelo do rato para transplante de pâncreas, usando uma técnica modificada do manguito

Este protocolo estuda o papel do ligante de chemokine (C-C motif) 5 (CCL5) no hipotálamo, entregando um antagonista, MetCCL5, dentro do cérebro de rato usando um sistema de infusão de cérebro de bomba micro-osmótica. Esta inibição transitória de CCL5 atividade interrompida hipotalâmica insulina sinalização, levando à intolerância à glicose e a sensibilidade periférica à insulina sistêmica.

Estudando o sinal de insulina hipotalâmico a intolerância de glicose periférica com um sistema de infusão contínua de drogas dentro do cérebro de rato

O atual artigo descreve a geração e caracterização metabólica de ratos alimentados com dieta de alto teor de gordura como um modelo de obesidade e resistência à insulina induzida pela dieta. Possui ainda mais protocolos detalhados para executar o teste de tolerância à glicose oral e o teste de tolerância à insulina, monitoramento de alterações de todo o organismo de glicose metabolismo na vivo.

Estudo do metabolismo in vivo da glicose em camundongos alimentados com dieta de alto teor em gordura usando o teste oral de tolerância à glicose (OGTT) e o teste de tolerância à insulina (ITT)

Transplante de ilhotas pancreáticas é uma maneira de conseguir normoglycemia no diabetes tipo 1. Este artigo centra-se na técnica de transplante através da rota intraportal para manter os níveis normais de glicose em ratos diabéticos.

Intraportal transplante de ilhotas pancreáticas no modelo de Mouse

A imagem in vivo de alta resolução do pâncreas foi facilitada com a janela de imagem intravital pancreática.

Visualização de nível celular longitudinal estabilizada do pâncreas em um modelo murino com uma janela de imagem intravital pancreática

Um clamp hiperglicêmico é usado para medir a liberação de insulina com uma concentração de glicose no sangue mais alta mantida. Uma pinça hipoglicemiante serve para medir a produção de glicose induzida por respostas contra-regulatórias. Ambos os métodos utilizam o mesmo procedimento cirúrgico. Apresentamos aqui uma técnica de clamp para avaliar o metabolismo sistêmico da glicose.

Clamp hiperglicêmico e grampo hipoglicêmico em camundongos conscientes

A depuração hepática da insulina é fundamental para regular a homeostase da glicose. Este artigo descreve um procedimento de perfusão hepática fácil de usar para avaliar diretamente a taxa de depuração da insulina hepática in situ em camundongos.

Avaliação da depuração de insulina em camundongos por meio de perfusão hepática in situ

Aprenda a técnica de perfusão do pâncreas intacto em camundongos para estudar a secreção de insulina estimulada por glicose em condições fisiológicas. Este método preserva o microambiente natural e permite avaliar respostas bifásicas e terapêuticas.

Secreção de insulina estimulada por glicose via perfusão através da vasculatura de camundongos com pâncreas intacto

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